国家自然科学基金(30872398)
- 作品数：22 被引量：41H指数：4
- 相关作者：井申荣曾韦锟黄芬王瑞博罗永彬更多>>
- 相关机构：昆明理工大学昆明理工大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非结构蛋白P48和P22在诺如病毒感染中的作用被引量：2
- 2014年
- 诺如病毒（norovirus， Nov）属于人类杯状病毒科，是引起病毒性腹泻的主要病原之一。诺如病毒非结构蛋白P48可能与高尔基体有相互作用，破坏蛋白质的运输。而非结构蛋白P22能抑制细胞的蛋白分泌。这些研究对了解诺如病毒复制和致病机理奠定基础，同时也为抗病毒的药物开发提供方向。
- 杨思达井申荣李利
- 关键词：诺如病毒非结构蛋白P22
- 手足口病病原EV71和CA16的比较被引量：1
- 2012年
- 手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)是世界范围内流行的儿童传染病,曾在亚太地区出现过多次大规模的暴发和流行,肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackie virus A16,CA16)是引起该病的两种主要病原。尽管这两种病毒在遗传学上关系很近,但其感染在临床表现和体征方面均存在一定差异,这种差异是源于病毒基因组的不同,还是由遗传表型特性所致,是值得研究的课题。本文就二者的特征及感染后宿主的细胞反应和比较蛋白质组学研究进行综述。
- 张文慧井申荣
- 关键词：手足口病柯萨奇病毒A组16型蛋白质组学
- 重组腺相关病毒载体在基因治疗中的应用被引量：2
- 2009年
- 重组腺相关病毒(rAAV)载体具有安全性好、免疫原性低、能感染分裂细胞和非分裂细胞、能介导基因长期稳定表达等优点。因此,作为一种基因导入系统,rAAV载体在基因治疗的研究和开发中越来越受到关注。本文就rAAV载体在基因治疗中的应用作一综述。
- 董晓宇井申荣
- 关键词：重组腺相关病毒基因治疗
- 重组呼吸道合胞病毒G蛋白疫苗的免疫安全性研究
- 2016年
- 将呼吸道合胞病毒(respiratory syncytical virus,RSV)G蛋白与CpG佐剂共同免疫小鼠,分析RSV G蛋白免疫原性及安全性。前期纯化的G_(CX3C)和G_(CTL)两种蛋白分别与CpG佐剂混合,在0、2、4周以肌肉注射方式免疫昆明小鼠,免疫结束后检测小鼠肺部匀浆液中的IFN-γ、IL-4及Ig E等指标。同时末次免疫结束后,小鼠用滴度105pfu的RSV进行攻毒,解剖分离小鼠肺部,制备病理切片进行观察。G_(CTL)蛋白免疫组肺部匀浆液中的IL-4以及IgE低于G_(CX3C)蛋白免疫组。CpG组及GCTL+CpG组肺组织匀浆液中的INF-γ含量以及INF-γ/IL-4比值显著高于其他组(P<0.05),且ELISPOT实验表明CpG佐剂能够促使分泌INF-γ的脾淋巴细胞数量增多。攻毒后,通过肺部组织切片观察,发现PBS和CpG免疫组肺部病变极为严重,G_(CTL)+CpG组的病变程度比G_(CX3C)+CpG组严重,而G_(CX3C)组的病变情况比G_(CTL)组严重。这些结果表明,重组G_(CTL)蛋白能够降低动物免疫应答的Th2型极化,具有良好的安全性。
- 陈伟张凝乔磊陈卫东井申荣
- 人呼吸道合胞病毒与结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-F1的免疫原性
- 2013年
- 目的在大肠杆菌中表达并纯化人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的融合蛋白TB10.4-F1,检测其免疫原性。方法将重组工程菌TB10.4/pET28a/BL21和TB10.4-F1/pET30a/BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白的表达形式;表达的融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1经His TrapTMHP层析柱进行亲和层析一步纯化后,免疫BALB/c小鼠。小鼠分为TB10.4(30μg/只)、TB10.4-F1(30μg/只)及PBS(200μl)组,分别于0、2、4周免疫小鼠,于每次免疫前1 d经尾部取血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清中特异性的IgG水平;于末次免疫2周后摘眼球取血,分离血清,ELISA法检测特异性IgG水平及中和抗体滴度。结果表达的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1的相对分子质量分别约13 300和59 600,均以包涵体形式表达,表达量分别占菌体总蛋白的53.9%和12%;纯化后的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1纯度分别可达95%和80%;与TB10.4组相比,TB10.4-F1组IgG水平明显升高,IgG1/IgG2a值明显降低,但仍大于1;TB10.4-F1组小鼠血清中RSV特异性中和抗体滴度可达log102.699。结论融合蛋白TB10.4-F1免疫原性强,能激发出较为平衡的Th1/Th2反应,并产生抗HRSV的中和抗体。融合蛋白TB10.4-F1有望成为预防HRSV感染的候选疫苗。
- 王瑞博井申荣曾韦锟黄芬
- 关键词：结核分枝杆菌人呼吸道合胞病毒融合蛋白
- HSP60免疫学特性与疾病的关系被引量：6
- 2009年
- 热休克蛋白(HSPs)是一种应激蛋白,HSP60是HSPs中的重要家族之一.HSP60可以在天然免疫反应和适应性免疫反应中发挥作用,帮助机体应对过激环境.同时HSP60及机体对自身HSP60的免疫反应与许多自身免疫疾病的发生和发展有密切关系.
- 王鹏井申荣曾韦锟
- 关键词：免疫反应自身免疫疾病
- 大肠杆菌Rosetta(DE3)表达的呼吸道合胞病毒F2蛋白免疫学特性(英文)被引量：1
- 2012年
- 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体,目前还没有安全有效的疫苗问世,因此有必要采取不同的策略加快研发预防性疫苗.本研究将RSV融合蛋白(F)的F2肽段基因插入到载体pGEX-6P-1谷胱甘肽-S-还原酶(GST)融合标签下游,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物GST-F2,融合蛋白纯化后免疫昆明种小鼠三次,ELISA测定小鼠血清抗体.结果表明免疫后的小鼠可以产生高滴度IgG、IgA(p<0.05)抗体,IgG1/IgG2a比值显著高于对照组,但在小鼠呼吸道粘灌洗液中没有产生sIgA(p>0.01)抗体.因此F2蛋白具有良好的免疫原性,引起Th2型免疫应答,是RSV疫苗的候选蛋白.
- 井申荣曾韦锟黄芬王钰宁岳婷婷
- 关键词：呼吸道合胞病毒免疫学特性
- 呼吸道合胞病毒G和F蛋白诱导细胞因子免疫反应的研究进展被引量：6
- 2013年
- 呼吸道合胞病毒是引起儿童急性肺炎、支气管炎、哮喘等疾病的主要病原体。目前国内外仍没有安全有效的预防性疫苗。呼吸道合胞病毒感染引起相关细胞因子异常表达可能是导致呼吸道病理性损伤的主要原因,G黏附蛋白和F糖蛋白是疫苗研究的常用抗原,在诱导细胞因子分泌、调节宿主免疫应答、促使病毒逃逸免疫系统等免疫机理方面有重要作用。本文对RSV G和F蛋白诱导产生细胞因子及相关免疫应答调节机理研究进展做一简要综述。
- 王应明井申荣
- 关键词：呼吸道合胞病毒G蛋白F蛋白细胞因子
- 结核分枝杆菌分泌蛋白TB10.4的功能和应用被引量：2
- 2011年
- 近年来,结核的发病率又呈上升趋势,传统的结核疫苗已无法起到有效的保护作用。结核分枝杆菌分泌蛋白由于具有良好的免疫保护性因而备受关注。结核分泌蛋白TB10.4是免疫主导的蛋白,能够激发有效的免疫反应,因而成为研究结核新疫苗靶抗原之一。本文就近几年结核分枝杆菌TB10.4的相关研究作一综述。
- 王瑞博井申荣
- 关键词：结核分枝杆菌卡介苗
- 呼吸道合胞病毒截短G蛋白的原核表达、纯化及其免疫原性被引量：1
- 2013年
- 目的构建呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)截短G蛋白的原核表达载体,并对表达、纯化后的蛋白进行免疫原性及相关免疫指标的检测。方法人工合成G蛋白基因的部分核酸序列,采用重叠PCR法将CX3C模序替换为RSV M蛋白上的CTL表位,构建原核表达载体GCX3C-pET22b和GCTL-pET22b,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE鉴定后,采用Ni2+亲和层析柱纯化目的蛋白。纯化产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定后,免疫昆明小鼠,实验分GCX3C组(100μg GCX3C)、GCTL组(100μg GCTL)、阴性对照组(100μlPBS),分别于0、1、4周经小鼠双后侧肌肉注射免疫,经尾梢静脉取血,分离血清,检测IgG水平及嗜酸性粒细胞的数量,并通过小鼠体外淋巴细胞杀伤试验鉴定RSV特异性CTL应答。结果重组原核表达载体经双酶切及测序鉴定,证明G蛋白基因改造成功;重组蛋白的相对分子质量约14 000,表达量约占菌体总蛋白的40%,主要以可溶性形式表达;纯化的重组蛋白纯度达90%以上,可与抗RSV血清发生特异性反应;小鼠血清中的特异性IgG水平随免疫次数的增加而升高(P<0.01),GCX3C蛋白和GCTL蛋白的几何平均滴度分别为1 584.89和1 995.26;GCX3C组较GCTL组小鼠血清中嗜酸性粒细胞数量明显增加(P<0.01);GCTL蛋白免疫小鼠后可产生RSV特异性的CTL应答效应。结论已成功原核表达了GCX3C蛋白和GCTL蛋白,两种蛋白均有较好的免疫原性,GCTL蛋白可消除由CX3C模序引起的嗜酸性粒细胞增多,并增强了CTL效应,G蛋白基因的改造达到了预期效果。
- 李光井申荣田君曾韦锟魏云林
- 关键词：呼吸道合胞病毒G蛋白免疫原性CTL
