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转基因食品检测方法的现况与进展被引量：20: 2004年; 为给转基因食品检测提供参考 ,介绍包括除草剂生物分析法 (herbicidebioassays)、western印迹法 (Westernblot)、酶联免疫吸附试验法 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)、southern印迹法(Southernblot)、聚合酶链反应法 (PolymeraseChainReaction ,PCR)在内的蛋白质检测和DNA检测方法。一些新的方法如近红外光谱法 (near infraredspectroscopy)、DNA微阵列技术法 (Microarray)等略做介绍。对这些方法的基本原理、优缺点和应用范围以及存在的问题进行了分析 ,可供转基因食品检测研究选择分析方法时借鉴。; 周萍萍吴永宁张建中; 关键词：转基因食品印迹法酶联免疫吸附试验法聚合酶链反应法

转基因水稻潮霉素标记基因PCR检测方法的建立及其在基因水平转移研究中的应用被引量：3: 2006年; 为建立用于基因水平转移研究,尤其是DNA经加工和消化后稳定性研究的针对转基因水稻潮霉素标记基因hpt(hygromycinphos photransferase)的定性和实时定量PCR体系,设计针对hpt的上游通用引物多个片段定性PCR扩增体系,以植物叶绿体基因rbcl为内对照,PCR扩增产物经测序验证。将定性PCR中最小片段(236bp)连接到质粒载体pUC18pMDT载体上,提取质粒经验证后做外标。应用TaqMan—MGB荧光探针和引物,建立定量的外标校正曲线法,并评价方法的精密度。建立的定性PCR体系能稳定扩增出236bp～910bp不同大小的5个hpt片段,并经测序验证。实时定量PCR的线性范围为105～10拷贝(R2=0.998),最低能检出10拷贝,重复性好。本研究已成功建立了用于转基因水稻标记基因hpt基因水平转移研究的定性和定量PCR系统。; 沈立明吴永宁周萍萍张建中魏晓丽; 关键词：基因基因水平转移聚合酶链反应

转基因食品致敏性评价-BN大鼠动物模型研究: ＜正＞食物过敏（food allergy）接触或摄入某种食物成分引起的免疫反应主要是由免疫球蛋白（IgE）介导的速发性过敏反应。致敏原（allergen）几乎所有致敏原都是蛋白质,但并非所有蛋白质都是致敏原食品中有...; 贾旭东李宁杨晓光; 文献传递

转基因成分实时荧光PCR定量分析数学方程的理论研究被引量：15: 2005年; 目的:根据TaqMan荧光探针实时荧光PCR的技术原理,建立实时荧光PCR循环次数与荧光强度间的动力学方程、样品中转基因成分含量与X0及CT的定量关系和定量分析数学方程。方法:采用数学推导和理论测算的方法,研究数学方程中各参数的意义、影响因素、变化特点和规律。结果:转基因成分含量的定义、定量分析模式、样品DNA提取效率、PCR扩增效率、反应管中初始模板数、荧光分子形成效率、荧光测量阈值、PCR测量的系统和偶然误差,是导致定量关系发生偏离及测定灵敏度发生变化的重要原因。结论:数学方程中各项参数可用于评估定量关系的偏离程度及变化趋势,还可作为选择、优化定量分析条件和校正、降低定量方法系统误差的技术指标。; 邓平建杨冬燕李碧兰杨永存; 关键词：转基因成分实时荧光PCR 数学方程

不同加工条件下转基因大米潮霉素标记基因(hpt)稳定性研究被引量：14: 2006年; 目的从DNA稳定性的角度,探讨转基因大米潮霉素标记基因hpt向食品或消化道微生物转移发生水平转移的可能性。方法利用针对hpt不同大小片段的PCR扩增体系,对hpt在转基因大米加工食品中的稳定性进行研究。结果建立的PCR体系能稳定扩增出hpt236bp-910bp不同大小的5个片段。利用这一PCR体系对s86转基因大米不同加工食品的检测显示,加工米饭、粥大于500bp的片段已降解,爆米花和锅巴大于236bp的hpt片段已降解。对照M86大米加工米饭和粥仅能扩出植物叶绿体基因rbcl片段,爆米花、锅巴及空白对照所有扩增均为阴性。结论hpt在转基因大米加工食品中均已不同程度的发生了降解,不同加工方式对hpt片段降解影响显著,在加工后hpt以较大或完整片段向食品或消化道微生物转移的可能性减小。; 沈立明吴永宁张建中周萍萍魏晓丽朱祯; 关键词：转基因大米 DNA降解食品加工基因水平转移

北京市城区居民的转基因食品知识、态度、行为及影响因素分析被引量：27: 2005年; 为了解北京市居民对转基因食品的知识、态度和行为的现状及影响因素。抽取北京市居民中901人,调查转基因食品生物技术的知信行水平。转基因食品是生物技术的知晓率为72.7%,深入了解的49.3%,随文化程度增高呈上升趋势。对转基因食品持乐观态度的占63.1%,持悲观态度(有害或者害大于利)的占6.1%,乐观随文化程度增高呈上升趋势,随年龄增高呈下降趋势;61.9%的调查者认为转基因食品将走向大众(积极),30岁以下及乐观的人群态度更为积极。持乐观、积极态度者购买转基因食品的比率较高,为41.8%,而持悲观态度的为18.7%,差异有显著性;购买转基因食品人群比例随年龄升高呈下降趋势,与文化程度、性别没有关系;调整的价格对促进转基因食品购买有一定影响。北京市居民对转基因食品的知信行水平较高,态度影响购买行为,转基因食品的价格对购买有一定影响。; 项新华张正庞星火; 关键词：食品转基因

转基因大豆低密度基因芯片的检测方法研究被引量：8: 2008年; 目的建立Roundup Ready转基因大豆(简称RRS)的基因芯片检测方法,探讨其在转基因大豆检测中的应用。方法根据大豆中所转入的外源基因,选择camv35s启动子、nos终止子和cp4epsps基因,以大豆内源基因lectin基因为内参照基因设计了引物和探针,并制备了核苷酸芯片;通过多重PCR对样品核酸进行扩增和荧光标记后,将PCR产物与芯片杂交,检测大豆样品中所含的外源基因,并评价方法的灵敏度。结果检测转基因含量不同的RRS标准参考物,结果显示:camv35s启动子、nos终止子、外源基因cp4epsps检测灵敏度均可达0.45%。结论本研究所建立的基因芯片检测方法有良好的灵敏度及可重复性,有助于实现转基因大豆的高通量、高灵敏的检测。; 周萍萍尤元海吴永宁张建中; 关键词：转基因寡核苷酸序列分析聚合酶链反应

转基因食品中标记基因的生物安全性研究进展及对策被引量：13: 2003年; 标记基因是帮助对转基因生物体进行筛选和鉴定的一类外源基因 ,虽然它们仅在植物筛选的早期阶段发挥作用 ,但会存留在成熟的转基因作物中 ,因此其安全性研究不容忽视。本文着重对转基因食品中标记基因的生物安全性进行综述 ,分析其可能的风险及危害 ,总结了当前已被认可安全使用的标记基因。此外 ,对转基因食品进行强化标识是加强其市场管理的重要举措 ,其基础是要开发出准确可靠的转基因成分鉴定技术。文中对最终去除转基因食品中标记基因的方法也进行了介绍。; 杨丽琛杨晓光; 关键词：转基因食品标记基因生物安全性

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国家高技术研究发展计划(2002AA212041)