北京市重大科技攻关项目(D121100003012001)
- 作品数：9 被引量：49H指数：4
- 相关作者：于霞黄海荣马异峰赵立平王晓波更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所成都市结核病防治院更多>>
- 发文基金：北京市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同报告时间结核分枝杆菌药物敏感性试验结果不一致的原因
- 2015年
- 目的探讨和分析使用绝对浓度法药物敏感性试验（简称“药敏试验”）时不同报告时间结果不一致的原因。方法2010年1—6月笔者收集采用绝对浓度法于37℃含INH的L-J培养基上培养4周时无菌落生长、时间延长至6周后才生长的13株菌株（含药培养基延迟生长菌株）。这些菌株来源于11例结核病患者（2例患者的菌株在低浓度和高浓度INH时均有菌落生长）；同时收集这11例结核病患者的临床敏感株作为对照菌株，共计24株菌株。进行比例法药敏试验和PCR菌种鉴定，并利用分枝杆菌散在分布重复单位（Mycobacterium interspersed repetitiveunit,MIRU）和结核分枝杆菌间隔区寡核苷酸分型（spoligotyping）技术进行基因分型，并选择对照菌株和含药培养基延迟生长菌株MRIU分型不同的3株菌株进行人工模拟不同浓度INH时混合的敏感菌株和耐药菌株进行绝对浓度法药敏试验，观察不同报告时间（4周和6周）的药敏试验结果。结果24株菌株经PCR鉴定均为结核分枝杆菌复合群。比例法药敏试验中13株含药培养基延迟生长菌株均对INH耐药，11株对照菌株均对INH敏感。3例患者的对照菌株和含药培养基延迟生长菌株Spoligotyping分型属于不同型别，分别为北京基因型和T2型、北京基因型和H3型、北京基因型和T2型。人工混合感染的3株菌株比例（临床株：H37Rv）小于1：128时可能会出现4周无菌落生长而6周有菌落生长的结果。结论对药物敏感性不同的结核分枝杆菌造成的混合感染，当耐药菌株的比例较低时，可能造成不同报告时间药敏试验结果不一致的情况。
- 谷蕴婷于霞李云絮赵立平王桂荣陈素婷黄海荣
- 关键词：分枝杆菌结核微生物敏感性试验
- 不同痰标本处理方法对结核分枝杆菌罗氏培养检测结果的影响被引量：14
- 2013年
- 目的分析采用简单法和离心法处理痰标本,以及采用离心法处理痰标本时不同离心条件对罗氏培养检测结果的影响。方法收集2010年9—11月北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室进行细菌学检查的疑似结核病患者痰标本198份,其中涂片阳性的痰标本99份,涂片阴性的痰标本99份。同时应用简单法和离心法对198份痰标本进行罗氏培养;离心法培养时分别采用5种不同的离心条件:3000×g离心15min、3000×g离心8min、3000×g离心25min、2000×g离心15min、5000×g离心15min。结果任何一种方法培养阳性即认定标本培养阳性,198份痰标本中共有126份培养阳性,其中97份来自涂阳痰标本,29份来自涂阴痰标本;简单法的阳性率为93.65%(118/126),离心法最高的阳性率为96.03%(121/126)。简单法的平均初生长时间为(20±8.56)d,离心法(3000×g离心15min)的平均初生长时间为(22±9.10)d,两者间差异有统计学意义(Z=-4.81,P<0.001)。在125份离心法培养阳性的标本中,3000×g离心15min、3000×g离心8min、3000×g离心25min、2000×g离心15min、5000×g离心15min,5种不同离心条件下的培养阳性率分别为96.03%(121/126)、89.68%(113/126)、95.24%(120/126)、92.06%(116/126)和96.03%(121/126)。结论罗氏培养过程中,简单法的阳性率与离心法接近,但由于简单法操作简单、污染率较低,初生长时间较短,因而可能更符合临床的需要;应用离心法进行罗氏培养时,离心力或离心时间的变化可能会影响培养的阳性率。
- 赵立平朱玛姜广路于霞黄海荣
- 关键词：标本制备培养基细菌学技术
- 分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价被引量：3
- 2014年
- 目的评价结核分枝杆菌鉴定试剂盒（分子杂交法）进行分枝杆菌菌种初筛的准确性,并探讨如何快速准确地鉴定结核分枝杆菌复合群（MTC）和非结核分枝杆菌（NTM）混合感染标本.方法采用分子杂交法对200株结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定.人工制备结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌、结核分枝杆菌和脓肿分枝杆菌、结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌的混合感染模型,评价基因测序法、芯片法和Haintest在检测分枝杆菌混合感染中的准确性.结果以对硝基苯甲酸（PNB）分离鉴定结果为参照,分子杂交法的敏感性和特异性分别为65.12%（65/86）和98.25%（112/114）.对于人工制备的13种不同比例混合的H37Rv和NTM,芯片法和Haintest均可以准确鉴定出混合感染标本中的混合菌种,而基因测序结果表明,H37Rv：偶发分枝杆菌的比例在10% ～90%范围内才能区分出混合感染的类型.结论分子杂交法对于结核分枝杆菌诊断有较高的特异性,一旦经该法鉴定为NTM,则具有很高的诊断意义.明确标本中存在混合感染后可以采用芯片法或Haintest对临床上高致病的分枝杆菌进行菌种水平的鉴定.
- 于霞尚媛媛赵立平董玲玲马异峰王晓波黄海荣
- 关键词：结核分枝杆菌非结核分枝杆菌分子杂交法
- 环介导等温扩增技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌的初步评价被引量：14
- 2013年
- 目的评价环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术在结核分枝杆菌诊断中的应用价值。方法收集246份疑似肺结核患者的痰标本,分别进行涂片镜检,罗氏培养以及实时定量PCR和LAMP法检测。结果涂片镜检,罗氏培养实时定量PCR和LAMP法对结核分枝杆菌的检出率分别为30.89%,45.53%,54.47%,57.32%。以罗氏培养结果作为金标准,LAMP法诊断的敏感性为96.19%(101/105),特异性为76.87%(103/134),两种方法检测结果的一致性是Κ=0.71,两法具有很好的吻合性。以实时定量法为标准,LAMP法的敏感性为90.07%(127/141),特异性为93.33%(98/105),两法检测结果的一致性是κ=0.83,P<0.001。结论 LAMP法检测结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,与罗氏培养和RT-PCR有着较高的吻合性,很适合作为临床检测项目开展。
- 于霞梁倩马异峰付育红黄海荣
- 关键词：环介导等温扩增技术结核分枝杆菌实时定量PCR
- 结核分枝杆菌不同报告时间药敏试验结果不一致的原因分析
- 目的:探讨使用绝对浓度法药敏试验时,含异烟肼培养基上37℃培养4周没有菌落生长,而6周后有菌落生长的原因。方法:收集到来自11名患者的13株含异烟肼培养基上生长的菌株,同时收集11株空白对照培养基上的菌株。对上述菌株分别...
- 谷蕴婷于霞李云絮赵立平王桂荣陈素婷黄海荣
- 关键词：结核分枝杆菌绝对浓度法
- 文献传递
- 不同报告时间结核分枝杆菌药物敏感性试验结果不一致的原因被引量：1
- 2014年
- 目的探讨和分析使用绝对浓度法药物敏感性试验（简称“药敏试验”）时不同报告时间结果不一致的原因。方法2010年1—6月笔者收集采用绝对浓度法于37℃含INH的L-J培养基上培养4周时无菌落生长、时间延长至6周后才生长的13株菌株（含药培养基延迟生长菌株）。这些菌株来源于11例结核病患者（2例患者的菌株在低浓度和高浓度INH时均有菌落生长）；同时收集这11例结核病患者的临床敏感株作为对照菌株，共计24株菌株。进行比例法药敏试验和PCR菌种鉴定，并利用分枝杆菌散在分布重复单位（Mycobacterium interspersed repetitive unit，MIRU）和结核分枝杆菌间隔区寡核苷酸分型（spoligotyping）技术进行基因分型，并选择对照菌株和含药培养基延迟生长菌株MRIU分型不同的3株菌株进行人工模拟不同浓度INH时混合的敏感菌株和耐药菌株进行绝对浓度法药敏试验，观察不同报告时间（4周和6周）的药敏试验结果。结果24株菌株经PCR鉴定均为结核分枝杆菌复合群。比例法药敏试验中13株含药培养基延迟生长菌株均对INH耐药，11株对照菌株均对INH敏感。3例患者的对照菌株和含药培养基延迟生长菌株Spoligotying分型属于不同型别，分别为北京基因型和T2型、北京基因型和H3型、北京基因型和T2型。人工混合感染的3株菌株比例（临床株：H37Rv）小于1：128时可能会出现4周无菌落生长而6周有菌落生长的结果。结论对药物敏感性不同的结核分枝杆菌造成的混合感染，当耐药菌株的比例较低时，可能造成不同报告时间药敏试验结果不一致的情况。
- 谷蕴婷于霞李云絮赵立平王桂荣陈素婷黄海荣
- 关键词：分枝杆菌结核微生物敏感性试验
- 环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的系统评价被引量：13
- 2014年
- 目的采用Meta分析的方法评价环介导等温扩增法（LAMP）检测临床标本中结核分枝杆菌的准确性。方法通过检索PubMed、Embase、WebofScience、CochraneLibrary、CNKI、万方、维普数据库广泛收集文献，根据QUADAS质量评价标准评价纳入文献的质量，最终纳入16篇相关文献，共计18项研究。应用Meta—Disc软件对环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度、诊断比值比进行合并分析，对纳入的研究绘制受试者工作特征曲线。对纳入的研究进行异质性检验，采用Meta回归分析异质性的来源。Meta回归会生成相对诊断比值比（relativediagnosticoddsratios，RDOR）。当RDOR〉1．0，表明某个研究特征比没有这个特征的诊断准确性要高。结果最终纳入16篇文献，共计18项研究综合分析所有数据，合并敏感度为0．91（95％CI：0．90～0．93）；合并特异度为0．97（95％CI：0．96～0．97）；合并诊断比值比为283．02（95％CI：157．37～509．00）；受试者工作曲线曲线下面积为0．9829。研究间异质性来源与结果判断相关，紫外灯判读试验的精确性比肉眼判读试验的精确性高5．66倍（RDOR--5．66，95％CI：1.32-24．22，P=0．0225）。结论对纳入的研究分析证实，环介导等温扩增法检测临床标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度很高，表明该方法在结核病的快速诊断方面具有优势。
- 于霞马异峰付育红刘冠王晓波黄海荣
- 关键词：核酸扩增技术
- 分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价被引量：1
- 2014年
- 目的评价结核分枝杆菌鉴定试剂盒（分子杂交法）进行分枝杆菌菌种初筛的准确性，并探讨如何快速准确地鉴定结核分枝杆菌复合群（MTC）和非结核分枝杆菌（NTM）混合感染标本。方法采用分子杂交法对200株结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。人工制备结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌、结核分枝杆菌和脓肿分枝杆菌、结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌的混合感染模型，评价基因测序法、芯片法和Haintest在检测分枝杆菌混合感染中的准确性。结果以对硝基苯甲酸（PNB）分离鉴定结果为参照，分子杂交法的敏感性和特异性分别为65．12％（65／86）和98．25％（112／114）。对于人工制备的13种不同比例混合的H37Rv和NTM，芯片法和Haintest均可以准确鉴定出混合感染标本中的混合菌种，而基因测序结果表明，H3RV：偶发分枝杆菌的比例在10％～90％范围内才能区分出混合感染的类型。结论分子杂交法对于结核分枝杆菌诊断有较高的特异性，一旦经该法鉴定为NTM，则具有很高的诊断意义。明确标本中存在混合感染后可以采用芯片法或Haintest对临床上高致病的分枝杆菌进行菌种水平的鉴定。
- 于霞尚媛媛赵立平董玲玲马异峰王晓波黄海荣
- 关键词：结核分枝杆菌非结核分枝杆菌分子杂交法
- 磺胺类药物对结核分枝杆菌的体外抑菌作用及与其他抗结核药物相互作用的研究被引量：4
- 2013年
- 目的评价磺胺甲噁唑(sulfamethoxazole,SMX)和甲氧苄啶(trimethoprim,TMP)对结核分枝杆菌的体外抑菌作用,并探讨SMX与其他抗结核药物的体外相互作用。方法采用微孔板Alamar blue法测定TMP联合SMX对121株结核分枝杆菌临床株的最低抑菌浓度(MIC)。同时采用分层整群抽样设计方法,抽取18株结核分枝杆菌临床分离株观察SMX在与利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、卡那霉素、氧氟沙星、利福布丁联用时MIC值的影响,以H37Rv为对照,通过计算分级抑菌浓度指数(FICI),观察SMX与其他抗结核药物之间是否存在协同作用。采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,MDR菌株、非MDR菌株、敏感菌株间MIC的比较采用非参数秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果90.08%(109/121)的结核分枝杆菌临床分离株可以被MIC为1/19(TMP∶SMX)μg/ml的复合制剂抑制生长,5株菌株的"TMP∶SMX=1∶19"的MIC为2/38μg/ml,仅有7株"TMP∶SMX=1∶19"的MIC≥2/38μg/ml,包括敏感株5株,MDR菌株2株。"TMP∶SMX=1∶19"对敏感株、MDR菌株及非MDR菌株MIC间的差异没有统计学意义(χ2=0.111,P=0.946)。对于H37Rv,SMX与其他抗结核药联合用药后,除了利福布丁表现出协同作用(FICI为0.281)外,其余药物均表现为无关作用。对18株临床分离株,SMX与其他抗结核药联合用药后,77.78%(14/18)表现为与利福布丁协同,FICI范围为0.205～1.063。结论TMP联合SMX有较好的抗结核分枝杆菌活性,并且这种活性与细菌对其他药物是否耐药无关;SMX与其他常用抗结核药的相互作用主要表现为无关。
- 于霞赵立平姜广路马异峰黄海荣
- 关键词：磺胺甲噁唑甲氧苄啶抗结核药微生物敏感性试验
- 环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的系统评价
- 2014年
- 目的采用Meta分析的方法评价环介导等温扩增法（LAMP）检测临床标本中结核分枝杆菌的准确性。方法通过检索PubMed、Embase、WebofScience、CochraneLibrary、CNKI、万方，维普数据库广泛收集文献，根据QUADAS质量评价标准评价纳入文献的质量，最终纳入16篇相关文献，共计18项研究。应用Meta—Disc软件对环介导等温扩增法检测临床标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度、诊断比值比进行合并分析，对纳入的研究绘制受试者工作特征曲线。对纳入的研究进行异质性检验，采用Mcta回归分析异质性的来源。Meta回归会生成相对诊断比值比（relativediagnosticoddsratios，RDOR）。当RDOR〉1.0，表明某个研究特征比没有这个特征的诊断准确性要高。结果最终纳入16篇文献，共计18项研究综合分析所有数据，合并敏感度为0．91（95％CI：0．90～0．93），合并特异度为0．97（95％C1：0．96～0．97）l合并诊断比值比为283．02（95％CI：157．37～509．00）l受试者工作曲线曲线下面积为0．9829。研究间异质性来源与结果判断相关，紫外灯判读试验的精确性比肉眼判读试验的精确性高5，66倍（RDOR=5．66，95％CI：1．32～24．22，P=0．0225）。结论对纳入的研究分析证实，环介导等温扩增法检测临床标本中的结核分枝杆菌的敏感度和特异度很高，表明该方法在结核病的快速诊断方面具有优势。
- 于霞马异峰付育红刘冠王晓波黄海荣
- 关键词：分枝杆菌结核核酸扩增技术
