国家自然科学基金(30600250)
- 作品数:5 被引量:39H指数:2
- 相关作者:谭红梅吴伟康李艳张泉赵驰更多>>
- 相关机构:中山大学广州市儿童医院第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 小鼠血管内皮损伤/再生伴内膜增生模型的建立被引量:2
- 2007年
- 目的:探讨如何建立稳定的小鼠血管内皮损伤/再生及内膜增生模型。方法:用改良的空气干燥法造成小鼠颈总动脉内皮剥脱损伤模型。术后活体灌注Evans蓝染料以评估受损内皮再生情况,并取受损部分动脉作纵向切片,行CD31内皮细胞标志抗原检测。术后4周常规组织学检测内膜增生肥厚情况。结果:内皮损伤术后内皮完全剥脱,Evans蓝染色完全,未见CD31抗原表达,随着术后时间延长,Evans蓝染色部分从损伤边缘开始,逐渐向中心区缩小,CD31抗原表达逐渐增多。术后7 d仍可见部分损伤血管未再内皮化。术后4周可见明显新生内膜增生。结论:用改良的空气干燥法可以建立稳定的小鼠动脉内皮损伤/再生模型,并且伴有明显的新生内膜增生。
- 谭红梅赵明奇吴伟康孙娟李艳罗汉川梁天文
- 关键词:颈动脉损伤内皮细胞内膜增生
- 叶酸抑制高同型半胱氨酸诱导的肾小球纤维化
- 目的:探讨高同型半胱氨酸诱导的肾小球纤维化及叶酸的治疗作用及可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为3组,分别灌以双蒸水、蛋氨酸或蛋氨酸+叶酸。3月后处死大鼠,测定血浆同型半胱氨酸浓度,观察肾小球的大小和纤维化程度,测定...
- 曹露娄晓盈张泉谭红梅
- 关键词:肾小球纤维化高同型半胱氨酸
- 同型半胱氨酸诱导细胞周期G1/S阻滞抑制人脐静脉内皮细胞的增殖被引量:1
- 2010年
- 【目的】探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和细胞周期的影响及其可能的机制。【方法】HUVEC细胞采用含200mL/L胎牛血清、0.06g/L内皮细胞生长添加剂(ECGS)、0.05g/L肝素的M199培养。分为对照组(Control)、50μmol/L腺苷(Ade)组(A50)、50μmol/LHcy组(H50)以及Ade50μmol/L+Hcy50μmol/L组(A50H50)。分别通过细胞计数和MTT法观察Hcy对HUVEC增殖的影响,流式细胞仪检测Hcy对HUVEC细胞周期的影响,WesternBlot检测Hcy对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化状态的影响。【结果】A50H50组的细胞数与细胞增殖活性显著低于对照组、A50组和H50组(P<0.05)。A50H50组G1期细胞百分比显著高于对照组,S期细胞百分比则显著低于对照组(P<0.05),出现明显的G1/S期阻滞。A50H50组ERK磷酸化水平明显低于对照组。【结论】Hcy(50μmol/L)和Ade(50μmol/L)联合使用可引起HUVEC细胞周期的G1/S阻滞,抑制HUVEC细胞的增殖,其机制可能与ERK的磷酸化水平降低有关。
- 李倩闫婷婷张泉李林吴伟康谭红梅
- 关键词:同型半胱氨酸人脐静脉内皮细胞细胞周期细胞外信号调节蛋白激酶
- 叶酸抑制同型半胱氨酸诱导的人肾脏系膜细胞增殖被引量:6
- 2013年
- 目的观察叶酸对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人肾脏系膜细胞增殖作用的影响及其可能机制。方法人肾脏系膜细胞采用含5%胎牛血清的RPMI1640培养,采用不同浓度Hcy(200、400、600、800、1 000μmol/L)处理细胞,MTT法观察Hcy对人肾脏系膜细胞增殖的影响。选取理想的Hcy浓度,加入不同浓度叶酸(50、100、200、400μmol/L)处理细胞,观察叶酸对细胞增殖的干预作用。相同方法处理细胞后提取总蛋白,Western blot检测转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和细胞外调节蛋白激酶(extracellularregulated protein kinases,ERK)表达。结果 Hcy能诱导人肾脏系膜细胞的增殖,促进TGF-β和ERK蛋白表达,呈现剂量依赖性。叶酸干预后能抑制Hcy诱导的细胞增殖,下调TGF-β和ERK蛋白表达。结论叶酸能抑制Hcy诱导的人肾脏系膜细胞增殖,可能与抑制TGF-β和ERK蛋白表达有关。
- 曹露娄晓盈牟娜娜张泉谭红梅
- 关键词:同型半胱氨酸叶酸转化生长因子-Β细胞外调节蛋白激酶
- 快速起搏心房肌细胞中MAPKs表达的变化
- 2009年
- 目的研究快速起搏后心房肌细胞超微结构和丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)表达的变化。方法原代培养大鼠的心房肌细胞,并建立快速起搏细胞模型。实验分为对照组和快速起搏组,采用Western-blot检测细胞外信号调节激酶(ERK)和p38MAPK的蛋白表达及其磷酸化水平的变化;用透射电镜观察快速起搏24 h后心房肌细胞超微结构的变化。结果快速起搏24 h后,ERK和磷酸化ERK的表达均较起搏前明显升高(P<0.01);p38MAPK在快速起搏前后的表达无明显变化,而磷酸化p38MAPK的表达则较起搏前明显升高(P<0.01)。经过24 h的快速起搏,心房肌细胞出现糖原聚集、核固缩、空泡样变以及肌浆网扩张、线粒体肿胀、部分线粒体嵴轻度溶解等超微结构的改变。结论快速起搏早期,原代培养的心房肌细胞超微结构发生了明显改变,同时ERK和p38MAPK被激活,这可能是心房纤颤早期心房肌细胞结构重建发生的重要机制。
- 程伟肖颖彬
- 关键词:心房纤颤丝裂原激活蛋白激酶快速起搏心房肌细胞
- 同型半胱氨酸对血管内皮细胞增殖、贴壁和迁移的影响被引量:30
- 2008年
- 目的:探讨同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对血管内皮细胞生长、增殖、贴壁和迁移的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVEC,6-8代)采用含20%胎牛血清(FBS)、60 mg/L内皮细胞生长添加剂(endothe-lial cell growth supplement,ECGS)、0.005 U/L肝素的M199培养。在加入不同浓度的Hcy处理后,用胰酶消化细胞,白细胞计数板计数细胞;同时通过[3H]胸腺嘧啶核苷掺入实验观察Hcy对HUVEC细胞增殖的影响。此外,在加入不同浓度的Hcy处理后,用胰酶消化细胞,重新接种于纤连蛋白包被过的培养皿中,静置培养30 min,洗掉未贴壁细胞,对贴壁细胞进行固定、结晶紫染色、脱色、比色,观察Hcy对细胞贴壁的影响。并进一步通过划伤实验观察Hcy对内皮迁移的影响。结果:100 mmol/L及以上浓度的Hcy能抑制HUVEC增殖、DNA合成和细胞迁移,200mmol/L及以上浓度的Hcy能抑制HUVEC贴壁,并且随着剂量的加大,抑制作用都逐渐增强。结论:Hcy对HU-VEC细胞增殖、DNA合成、细胞迁移及贴壁均有着不同程度的抑制作用。这可能是Hcy参与动脉粥样硬化发病的机制之一。
- 谭红梅赵驰吴伟康李艳张选红
- 关键词:内皮细胞同型半胱氨酸细胞增殖细胞运动