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pLEGFP—N1-基质细胞衍生因子-1α的构建与目的基因在恒河猴骨髓基质细胞内的稳定表达: 2010年; 目的构建携带人基质细胞衍生因子（SDF）1α基因的反转录病毒真核表达载体pLEGFP-N1-SDF-1α,转染恒河猴骨髓基质细胞（BMSC）,观察外源性SDF-1α和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因在BMSC中的表达情况.方法应用基因重组技术,从pBudce4.1-SDF-1α获得SDF-1α基因片段,重组到pLEGFP-N1真核表达载体上.pLEGFP-N1-SDF-1α经病毒包装,转染至恒河猴BMSC,用Western免疫印迹和免疫细胞化学检测表达情况.结果酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入基因片段的正确性.BMSC转染pLEGFP-N1-SDF-1α后,在荧光显微镜下发出绿色荧光.western免疫印迹和免疫细胞化学证实SDF-1α在细胞内有效表达.结论成功构建本研究pLEGFP-N1-SDF-1α,经病毒包装转染至恒河猴BMSC,SDF-1α和EGFP基因在BMSC内有效表达.为BMSC-SDF-1α-EGFP工程细胞自体移植治疗相关疾病提供了依据.; 李三清徐强刘柯许百男潘力饶军华; 关键词：基质细胞衍生因子-1Α 绿色荧光蛋白质类骨髓基质细胞恒河猴

植物蛋白质翻译水平的调控被引量：5: 2015年; 不同的逆境条件可引起生物机体不同的应答反应,其中PKR(protein kinase double-stranded RNA-dependent)、PERK(PKR-like endoplasmic reticulum kinase)、HRI(heme-regulated inhibitor)和GCN2(general control non-derepressible-2)激活后使真核蛋白翻译起始因子2(e IF2)磷酸化,抑制蛋白质的翻译起始,帮助生物体适应各种逆境条件。雷帕霉素的靶蛋白(TOR)是一个进化上相对保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,参与细胞生长与增殖、新陈代谢以及蛋白质的翻译等进程,对细胞的正常生长发育有重要作用。近几年的研究表明,e IF2和TOR介导的信号途径在植物中是保守的,共同参与了蛋白翻译水平的调控。本文综述了植物中e IF2和TOR介导的信号途径对蛋白翻译过程的调控机制,以及蛋白质翻译在植物响应逆境中的重要作用。; 李厚华孔伟胜魏圆圆张海荣; 关键词：TOR

外源性SDF-1α和GDNF基因在恒河猴骨髓基质细胞内的稳定表达被引量：1: 2010年; 目的构建携带人基质细胞衍生因子-1α（SDF-100和胶质细胞源神经营养因子（GDNF）基因的真核表达质粒pBudCE4．1-SDF-1α—GDNF，转染恒河猴骨髓基质细胞（BMSCs），观察外源性SDF-Jd和GDNF基因在BMSCs中的表达情况。方法应用基因重组技术，从cDNA文库获得GDNF和SDF-1α基因，重组到pBudCE4．1双表达载体上。pBudCE4．1-SDF-1α—GDNF经脂质体转染培养的恒河猴BMSCs，48h后行GDNF和SDF-1αWestern blot和免疫组化检测。结果酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入基因片段的正确性：48h后行West blot和免疫组化证实GDNF和SDF-1α在细胞内能有效表达。pBudCE4．1-GDNF—SDF-1仅转染BMSCs表达的GDNF和SDF—1α蛋白的量是阴性对照细胞的10倍和6倍。结论双基因真核表达质粒pBudCE4．1-SDF-1α-GDNF转染至恒河猴BMSCs后．SDF-1α和GDNF基因在BMSCs内能有效表达，为BMSCs携带SDF-1α和GDNF双基因自体移植治疗相关疾病奠定了基础。; 徐强许百男刘柯潘力饶军华徐如祥; 关键词：基质细胞衍生因子-1Α 胶质细胞源神经营养因子

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国家自然科学基金(30600203)