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Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基的筛选被引量：7: 2014年; 目的筛选Vero细胞生长的最适低血清培养基,用于流感病毒的细胞培养。方法分别以MEM、M199、DMEM/F12、DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加5%、2%、1%的小牛血清传代培养Vero细胞,通过细胞形态观察、细胞计数及MTT法检测细胞的增殖活力筛选最适基础培养基;将流感病毒接种低血清适应的Vero细胞,检测病毒收获液的血凝效价及残留BSA含量,电子显微镜观察病毒形态。结果以DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加2%小牛血清培养的Vero细胞长势良好,细胞数量较多,增殖活力最强。低血清适应的Vero细胞培养的流感病毒血凝效价最高可达1∶512,平均值为1∶384;病毒液中的残留BSA含量约为正常血清培养条件下的1/18;病毒形态完整。结论成功筛选出Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基,为更具生物安全性的流感疫苗的研发奠定了基础。; 耿兴良戴宗祥段盼盼郭琦宋绍辉寸怡娜姜述德廖国阳; 关键词：VERO细胞流感病毒血清培养基生物安全性

流感病毒减毒活疫苗的研究进展被引量：11: 2017年; 目前,疫苗接种仍是预防流感最有效的途径,流感疫苗主要有三价灭活疫苗和减毒活疫苗。灭活疫苗虽安全有效,但其抗原用量大,生产过程复杂,生产周期长,且黏膜免疫力弱;而流感病毒减毒活疫苗不仅能诱导机体产生抗体,同时可引起包括黏膜免疫和细胞免疫在内的一系列适应性免疫反应,因此,认为其免疫效果优于灭活疫苗。本文就流感减毒活疫苗的研究历史及现状、疫苗候选株的获得及基于细胞的流感减毒活疫苗的研发作一综述。; 耿兴良廖国阳; 关键词：反向遗传技术候选株

流行性感冒病毒裂觧疫苗的制备工艺研究被引量：1: 2013年; 目的研制安全有效的流行性感冒(流感)病毒裂解疫苗[Influenza Vaccine(Split Virion),Inactivated;lnfV-Sp]。方法将H1N1、H3N2和B型三株流感病毒分别接种鸡胚,收取尿囊液,经乙醚和聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)裂解病毒,制成疫苗,电镜观察了流感病毒裂解效果,用美国癌症研究所选育的Swiss小鼠[(Institute of Cancer Research,ICRUS)(ICRUS)分送各国饲养实验,各国称为ICR小鼠]进行了疫苗的安全性和免疫学效果实验。结果电镜观察结果显示,裂解剂对病毒裂解完全,疫苗中无完整病毒颗粒,裂解效果好,疫苗具有良好的安全性和免疫原性。结论动物实验初步表明,该疫苗安全有效,为开展人体临床研究提供了依据。; 高菁霞马磊周健蔡玮宋绍辉张新文郭晨周竞贤李卫东廖国阳戴宗祥; 关键词：流行性感冒病毒裂解疫苗血凝素电子显微镜免疫原性

人用H7N9禽流感疫苗的研究进展被引量：11: 2017年; 2013年初,中国部分城市和地区出现了禽流感病毒H7N9感染人的病例,截止目前已有超过500人感染H7N9,感染者死亡率约为30%。WHO专家预测,禽流感病毒H7N9可能引起大流行。因此,人用H7N9禽流感疫苗的研发刻不容缓。目前已有多个H7N9疫苗备选株通过了WHO安全性评价,可用于疫苗研发。在此基础上,H7N9灭活疫苗、减毒活疫苗以及重组疫苗均已取得较好的研究结果。本文对人用H7N9禽流感疫苗的研究进展作一综述。; 郭琦廖国阳; 关键词：流感病毒疫苗

成人剂量型流行性感冒病毒裂解疫苗的稳定性研究被引量：3: 2013年; 目的了解疫苗在不同温度和不同时间存放的质量变化,为研制安全有效的流感疫苗提供依据。方法将流感疫苗放置在4℃和37℃进行长期稳定性和加速稳定性试验,不同存放时间点测定流感病毒血凝素(HA)含量及各项质量指标。结果疫苗经4℃保存18个月和37℃保存2周,HA含量和其他质量指标都符合药典要求。结论成品流感疫苗在1年有效期内均合格。; 周健高菁霞马磊刘婧廖国阳戴宗祥; 关键词：流行性感冒病毒裂解疫苗血凝素稳定性

流感病毒裂解疫苗病毒种子批的制备和培养条件的研究: 2013年; 目的制备流感病毒裂解疫苗的主代和工作种子批,优化病毒培养条件提高产量,制备高质量的流感病毒裂解疫苗。方法将H1N1、H3N2和B型3株流感病毒分别接种SPF鸡胚,收获尿囊液,制备流感病毒裂解疫苗主代及工作种子批。流感疫苗工作种子批按不同稀释倍数、pH值、收获时间和冷胚时间优化病毒培养条件,制成疫苗,进行产量、安全性和免疫原性研究。结果通过优化不同型别流感病毒的培养条件,提高了抗原的血凝滴度,血凝滴度达到1∶1 024及以上,制备的疫苗具有良好的安全性和免疫原性。结论制备出了高产量和高质量的流感病毒裂解疫苗。; 马磊宋绍辉张新文周健蔡玮高菁霞李卫东廖国阳杨净思; 关键词：流感病毒裂解疫苗

H3N2流感病毒冷适应株的无血清培养被引量：3: 2015年; 目的：探索无血清培养H3N2流感病毒冷适应株的适宜条件。方法以无血清适应的Vero细胞为介质，对流感病毒冷适应株（H3N2）的培养条件进行优化，以得到较优的基础培养基、pH值、TPCK胰酶添加量及其补加时间、病毒接种量和病毒收获时间。结果 H3N2流感病毒冷适应株能够感染无血清适应的Vero细胞；经过优化，病毒培养液适宜pH为7．15-7．64， BSA和TPCK胰酶添加量均为0．8-1．2μg／ml，细胞培养36h接种病毒，接种量MOI为0．05-0．10，于25℃培养168h收获时病毒效价达最高。结论优化了H3 N2流感病毒冷适应株无血清培养的适宜条件。; 郭琦耿兴良龙云凤杨帆宋绍辉刘婧戴宗祥姜述德廖国阳; 关键词：无血清培养 VERO细胞

PEG-6000纯化流感病毒鸡胚尿囊液的研究被引量：5: 2014年; 目的探讨PEG沉淀法纯化鸡胚培养流感病毒尿囊液的工艺,对PEG-6000的浓度、沉淀时间、离心力进行优化,为流感病毒抗原和抗体制备提供了便捷的手段。方法向流感病毒鸡胚尿囊液添加PEG后进行高速离心收集沉淀,检测纯化病毒液效价、病毒形态,以及卵清蛋白含量。结果 PEG浓度为4%,沉淀时间2h,离心力8 000g条件下,病毒能完全沉淀,杂蛋白卵清蛋白含量低,病毒颗粒完整,浓缩液中病毒血凝效价为1∶10 240。以纯化病毒免疫山羊3次后,血清抗体滴度为1∶1 024且无交叉。结论本研究初步证明优化后的PEG沉淀法对鸡胚培养流感病毒尿囊液中的病毒浓缩、纯化达到了很好的效果。; 戴宗祥耿兴良周健马磊郭晨周竟贤高清霞张新文姜述德廖国阳; 关键词：流感病毒抗原抗体复合物

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