国家科技重大专项(2009ZX08009-060B)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 相关作者：李瑞芬魏建华邓馨朱燕张兰军更多>>
- 相关机构：中国科学院植物研究所北京市农林科学院农业生物技术研究中心沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 野大麦HbCBL1和HbCBL2结构与亚细胞定位分析被引量：3
- 2011年
- 利用RT-PCR从野大麦cDNA扩增出两个基因HbCBL1和HbCBL2。蛋白结构分析表明,其具有典型的EF手臂,且HbCBL1的N-端含有豆蔻酰化结构域。为了明确野大麦HbCBL1和HbCBL2结构对其在植物体内亚细胞水平分布的作用,分别构建了以35S为启动子驱动的与绿色荧光蛋白基因GFP融合的植物表达载体,通过基因枪介导法将重组载体转入洋葱上表皮细胞,同时通过醮花法获得拟南芥稳定转基因株系,利用激光共聚焦扫描显微镜检测融合蛋白的表达部位。瞬时表达结果表明,融合蛋白HbCBL2::GFP在液泡膜上可见;HbCBL1::GFP在质膜上可见,同时在核中也有信号;HbCBL1的N端豆蔻酰化位点参与了该基因的定位。稳定表达结果表明,HbCBL2主要定位于液泡膜上;HbCBL1主要定位于质膜和细胞核;同时这两个蛋白在保卫细胞中也有表达。研究表明,HbCBL1和Hb-CBL2的结构决定了其亚细胞水平的表达部位,为进一步分析其生物学功能奠定了基础。
- 吴广宇李国婧王瑞刚李瑞芬魏建华
- 关键词：野大麦激光共聚焦扫描显微镜亚细胞定位
- 复苏植物旋蒴苣苔J结构域蛋白编码基因BhDNAJC2的克隆、表达与功能被引量：2
- 2015年
- 热激蛋白(HSP)是一类在受到逆境刺激后大量表达的蛋白质,能够帮助蛋白质正确折叠,促使变性蛋白质降解,缓解逆境胁迫对生物体的损伤。为揭示热激蛋白在耐旱的复苏植物中的保护作用,该研究对复苏植物旋蒴苣苔(Boea hygrometrica)HSP40家族中J结构域蛋白Bh DNAJC2的编码基因进行了克隆、表达与功能分析。Real-time PCR检测表明,该基因受脱水、低温、热激等多种逆境条件和脱落酸(ABA)诱导表达。Bh DNAJC2-YFP定位于细胞质、内质网和细胞核。过表达Bh DNAJC2的拟南芥(Arabidopsis thaliana)株系在干旱、热激、盐胁迫和碱胁迫下均表现出明显的抗逆性。综上所述,Bh DNAJC2可能在旋蒴苣苔抗旱、耐热及耐盐碱等胁迫反应中起关键作用。
- 陈世璇张振南王波朱燕龚月桦孙冬梅邓馨
- 关键词：热激蛋白结构域逆境胁迫亚细胞定位转基因植物
- 复苏植物旋蒴苣苔C2结构域小蛋白BhC2DP1参与植物对ABA的反应被引量：5
- 2012年
- 为揭示植物抗旱的调控机理,对复苏植物旋蒴苣苔(Boea hygrometrica)的一个编码C2结构域小蛋白的基因BhC2DP1进行研究。Real-time PCR和ProBhC2DP1:GUS报告基因检测显示,该基因只在干旱早期和外源Ca2+处理0.5小时时受诱导表达;分别施加Ca2+螯合剂EGTA和逆境激素ABA均抑制该基因表达,但二者同时处理则显著诱导其表达,表明ABA对该基因转录水平的调控是Ca2+依赖型的。过表达BhC2DP1的拟南芥(Arabidopsis thaliana)对ABA的敏感性增强,EGTA处理可消除其与野生型的差异,表明Ca2+是BhC2DP1蛋白参与ABA反应所必需的。综上所述,ABA和Ca2+信号途径的精细调控可能是决定干旱诱导旋蒴苣苔中BhC2DP1基因表达时间、丰度和功能的重要机制。
- 张兰军姬飞腾王丽丽亓岽东朱燕邓馨
- 关键词：C2结构域干旱复苏植物
- 野大麦CIPK基因的亚细胞定位被引量：4
- 2011年
- 为明确野大麦CIPK基因在植物亚细胞水平上的定位情况,以已知细胞质膜定位的拟南芥AtCBL1基因和液泡膜定位的AtCBL3基因作为参照,构建了这两个基因分别与红色荧光蛋白基因(RFP)融合的植物表达载体(参照载体),以及野大麦CIPK基因与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合的植物表达载体(目标载体),利用基因枪转化法将参照载体和目标载体共转化洋葱上表皮细胞,瞬时表达后利用激光共聚焦显微镜进行共定位分析。结果表明,该基因主要定位于细胞膜和细胞核,为进一步深入分析该基因的功能提供了重要依据。
- 李率帅阚国仕魏建华李瑞芬
- 关键词：亚细胞定位
