国家自然科技资源平台项目(2004DKA30450)
- 作品数:5 被引量:18H指数:2
- 相关作者:关伟军马月辉刘长青周雪雁刘桂林更多>>
- 相关机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所山西农业大学中国海洋大学更多>>
- 发文基金:国家自然科技资源平台项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 6种荧光蛋白基因在蒙古羊成纤维细胞中的表达被引量:5
- 2006年
- 采用脂质体介导法,将绿色荧光蛋白(pEGFP—C1、pEGFP-N3)、增强型青色荧光蛋白(pECFP—N1、pECFP—mito)、黄色荧光蛋白(pEYFP—N1)和红色荧光蛋白(pDsRed1—N1)等6种荧光蛋白基因导入蒙古羊体外培养成纤维细胞中,对基因的时空表达、阳性细胞生长与增殖状况、细胞凋亡与细胞活力以及提高基因表达率的最佳方法等方面进行了深入的研究。试验结果表明:6种荧光蛋白基因在转染后24、48和72h的转染率在12.3%~63.3%之间,经多重比较,各试验组之间有较大差异。转染24h后,6种荧光蛋白都均匀地充满细胞质和细胞核,只有囊状小泡没有标记荧光;转染48h后,EGFP、ECFP和EYFP仍在整个细胞中均匀表达,呈弥散分布状态,随着表达量的增加,在细胞核局部呈现块状或颗粒状的基因表达产物;DsRed荧光蛋白基因则主要在细胞核膜周围呈现由诸多颗粒状表达产物组成的环状轮廓;在优化的条件下,细胞凋亡率、阳性细胞的形态、生长与增殖状况与对照组比较差异不显著(P〉0.05)。本研究结果对于标记基因、核移植及转基因动物克隆等研究具有重要的参考价值。
- 关伟军刘长青娜日苏陆涛峰马月辉
- 关键词:蒙古羊成纤维细胞系荧光蛋白细胞定位脂质体
- 利用杜洛克猪子宫三种体外培养细胞构建三维医学模型
- 在体外培养出结构和功能与活体组织和器官相同或相似的结构功能体,以作为器官移植宝贵材料或其他生物现象的体外研究模型,是当今国内外医学界的重要课题。利用杜洛克猪子宫体外培养的上皮细胞、基质细胞和平滑肌细胞构建三维医学模型,时...
- 王有柱梁素丽白修云关伟军马月辉
- 关键词:子宫种子细胞细胞鉴定
- 文献传递
- 重要濒危畜禽体细胞库生物学检测技术平台的建立
- 按照美国ATCC体外培养细胞质量的检测标准对所构建的蒙古羊、五指山小型猪、德保矮马、北京油鸡、白耳鸡、藏鸡、清远麻鸡和北京鸭等47个重要、濒危畜禽遗传资源的体外培养细胞进行了细胞形态学、细胞活率、细胞生长曲线、微生物、核...
- 娜日苏关伟军马月辉
- 关键词:成纤维细胞系细胞培养生物学特性
- 文献传递
- 牛卵泡液对卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响
- 本试验旨在探讨牛卵泡液对卵母细胞体外成熟及重组胚发育的影响。试验结果表明: 不同直径牛卵泡液的成熟率、囊胚率与对照组相比均无显著差异(P>0.05),但孤雌激活囊胚率试睑细较对照组高,差异极其显著(P<0.01);牛卵泡...
- 李向臣梁素丽关伟军
- 关键词:卵泡液核移植
- 文献传递
- 畜禽体外培养细胞的凋亡及融合研究
- 本试验首先成功地建立了安格斯牛和丝羽乌骨鸡成纤维细胞系,并通过一系列生物学特性检测验证所建细胞系的质量后,进行了细胞融合及其凋亡的研究。细胞融合试验利用伊红和DAPI对两组细胞的细胞质和细胞核分别染色,再用50%PEG促...
- 张艳艳李晗丛义梅关伟军马月辉
- 关键词:细胞系细胞凋亡细胞融合
- 文献传递
- 重要濒危畜禽体细胞库构建技术平台建立
- 本研究利用体外细胞培养技术对重要、濒危畜禽成纤维体细胞库的构建中最佳培养方法的确立、研究材料的选择、样品储存时间对细胞生长的影响、不同保存温度对细胞生长的影响、血清和培养基对细胞生长的影响、无抗生素细胞体外培养、污染的预...
- 吴宏梅关伟军马月辉
- 关键词:遗传资源体外细胞培养细胞库
- 文献传递
- 供体细胞状态对牛重组胚发育的影响被引量:1
- 2008年
- 本试验通过比较供体成纤维细胞的不同血清饥饿培养天数、传代次数、冻存复苏等方面试验条件对重组胚发育的影响因素进行了深入的研究。结果表明:供体细胞血清饥饿0、1~3、4~6、7~9d之间重组胚卵裂率没有显著差异(P〉0.05),但囊胚率以饥饿1~3d的最高,与4~6和7~9d组别差异显著(P〈0.05);以传代0、1~3、4~6、7~9代的细胞作为供体细胞,卵裂率没有显著差异(P〉0.05),桑椹胚率以传1~3代最高,差异显著(P〈0.05);2代细胞解冻后的卵裂率显著高于4和8代细胞,而以2和6代冷冻解冻后细胞为供体,卵裂率并无明显差异,8代细胞的桑椹胚率显著低于其它组。本试验为提高供体成纤维细胞在卵母细胞中重新程序化及后续重组胚发育等相关研究提供参考。
- 李向臣跃华刘鹏乌云其其格关伟军马月辉
- 关键词:血清饥饿核移植
- 影响畜禽肉质、风味、生长及抗病性状重要基因的分析被引量:2
- 2008年
- 作者在查阅大量国内外相关资料的基础上,结合具体的实验操作原理和规程,就影响畜禽肉质、风味、生长及抗病性状重要基因进行概括性的论述。其目的在于通过对影响家禽肉质、风味、生长及抗病等重要特色功能基因的论述和探讨,以期为家禽转基因研究、品种改良和新品种创新提供坚实的理论基础和技术支持。
- 刘帅道尔吉刘长青包阿东吴宏梅关伟军马月辉
- 关键词:畜禽抗病基因
- 太行黑山羊成纤维细胞系建立与生物学特性研究被引量:10
- 2005年
- 以太行黑山羊耳缘组织为材料,采用组织块直接培养法和细胞冷冻技术构建了成纤维细胞系,并进行了细胞活力测定生长动力学观察、微生物污染间检测、染色体标本制备、同功酶分析及生物学研究。结果表明:细胞群体倍增时间(PDT)约为24 h;细胞染色体中二倍体(2n=60)占主体,镜检细胞的百分比为98.2%;乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸(MDH)脱氢酶同工酶分析,没有其他物种污染;细菌、真菌、病毒、支原体检测阴性。该细胞库的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准。此项研究不仅在细胞水平上保存了这一重要畜禽品种的种质资源,而且亦为其基因组和后基因组及体细胞克隆等研究提供宝贵实验材料。同时,此技术平台的建立必将为其他畜禽遗传资源细胞水平的保存提供技术与理论支撑和保障。
- 关伟军马月辉周雪雁刘桂林刘学东
- 关键词:生物学特性研究
- 六种荧光蛋白基因在蒙古羊成纤维细胞中的时空表达
- 采用脂质体介导法,将pEGFP-C1、pEGFP-N3、pECFP-N1、pECFP-mito、pEYFP-N1 和pDsRed1-N1等六种荧光蛋白基因导入蒙古羊体外培养细胞中,对基因的时空表达、阳性细胞生长与增殖状况...
- 刘长青娜日苏陆涛峰关伟军
- 关键词:蒙古羊成纤维细胞系荧光蛋白细胞定位脂质体
- 文献传递