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E-cadherin、Cyclin D1和Cyclin E在叶绿酸抗细胞恶变中表达研究被引量：1: 2006年; 目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT-PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各组细胞E-cadherin基因mRNA表达差异;荧光细胞免疫化学技术检测E-cadherin、Cyclin D1及Cyclin E蛋白水平。结果反式-BPDE诱导恶变细胞组出现E-cadherin基因在mRNA和蛋白水平表达缺失,而经叶绿酸抗转化组该基因表达正常。Cyclin D1、Cyclin E蛋白在正常对照组中表达阴性,而在反式-BPDE恶性转化组中上述两种蛋白呈现高表达,通过叶绿酸干预抗转化组中其表达明显下调。结论叶绿酸抗反式-BPDE致细胞恶变作用与其避免抑癌基因E-cadherin的表达缺失有关。叶绿酸在拮抗反式-BPDE致癌中具有影响细胞周期素CyclinD1和CyclinE表达作用。; 傅娟蒋义国宾晓农陈学敏; 关键词：细胞周期素

硫化镍转化人支气管上皮细胞基因差异表达芯片的研究被引量：2: 2005年; 背景与目的近年研究发现硫化镍(NiS)可引起人支气管上皮细胞(humanbronchialepithelialcell,16HBE)发生恶性转化及转化细胞致癌性,其机制可能与NiS引起基因突变、多种转录因子的异常表达有关。为此,本研究利用NiS恶性转化的体外培养细胞模型,用cDNA微阵列技术研究经NiS转化后的16HBE细胞基因的差异表达,从基因组水平探讨NiS所致细胞恶变的相关基因差异改变。方法分别提取16HBE和经NiS单独处理发生转化的NiS16HBE细胞的总RNA,逆转录合成cDNA并以Cy3dCTP和Cy5dCTP荧光素分别标记制作探针。探针混合后与含4000个人类基因的芯片杂交。以ScanArray4000扫描仪扫描芯片,以GenPixPro3.0软件分析荧光信号,然后对差异表达的基因进行生物学信息分析。结果NiS16HBE细胞样本与16HBE细胞样本比较,呈现差异表达的基因有151个(3.78%),其中81个(53.64%)上调,70个(46.36%)下调。结论NiS的转化作用与应激反应基因、免疫相关基因、DNA合成和修复基因、代谢相关基因、原癌基因和抑癌基因等多类基因的异常表达有关。; 宾晓农吕嘉春谭敏纪卫东陈家堃; 关键词：人支气管上皮细胞基因芯片

基因芯片筛选BPDE转化16HBE相关基因被引量：5: 2006年; 目的采用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化的人支气管上皮细胞(16HBE)相关基因,探讨该技术在分子毒理学研究中的应用。方法将实验组(BPDE-16HBE)和对照组(16HBE)的mRNA逆转录合成cDNA掺入荧光分子为探针,杂交于H40S基因芯片,分析2组基因的差异表达。结果在4096种人类基因中,BPDE转化的16HBE和正常16HBE间存在差异表达的基因有143条,其中高表达52条,低表达91条。结论基因芯片技术在筛选BPDE转化的16HBE相关基因改变上,具有高通量、高敏感、快速等特点,在毒物的分子致癌机制研究中意义重大。; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞

叶绿酸抑制细胞恶性转化的基因表达分析被引量：3: 2003年; 目的　采用cDNA微阵列技术探索人支气管上皮细胞经叶绿酸抗转化处理后基因的差异表达。方法　人支气管上皮细胞株 1 6HBE分别经二羟环氧苯并芘 (BPDE)单独处理及叶绿酸与BPDE联合处理后 ,提取 2种细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA并以Cy3 -dCTP和Cy5 -dCTP荧光素分别标记制作探针。探针混合后与含 4 0 0 0个人类基因的芯片杂交。以ScanArray 40 0 0扫描仪扫描芯片 ,以GenPixPro 3 0软件分析荧光信号 ,然后对差异表达的基因进行生物学信息分析。结果　叶绿酸与BPDE联合处理的细胞样与BPDE单独处理的细胞样比较呈显差异表达的基因有 1 0 6个 ,其中 67个 (63 9% )下调 ,另 39个 (36 8% )上调。结论　叶绿酸的抗转化活性与应激反应基因 ,免疫相关基因 ,DNA合成和修复基因。; 蒋义国朱丽瑾纪卫东; 关键词：叶绿酸基因芯片

环境基因组计划研究进展: 2007年; 周兰兰蒋义国曹虹聂玉强周永健; 关键词：人类基因组计划环境卫生环境暴露多态性

基因芯片筛选BPDE转化16HBE相关基因的研究: 目的采用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE)的相关基因,探讨该技术在分子毒理学研究中的应用价值。方法将实验组(BPDE-16HBE)和对照组(16HBE)的mRNA逆转录合成cDN...; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘人支气管上皮细胞; 文献传递

ISOLATION OF HUMAN TRANSCRIPTS EXPRESSED IN 16HBE CELLS RELATED TO CHLOROPHYLLIN ANTITRANSFORMING ACTIVITY AGAINST ANTI-BPDE BY cDNA REPRESENTATIONAL DIFFERENCE ANALYSIS: 2005年; Objective: To analyze the differentially expressed cDNA sequences related to chlorophyllin (CHL) mediated inhibition of malignant transformation of human bronchia1 epithelial cell line (16HBE). Methods: 16HBE cells treated with chlorophyllin and anti-BPDE were conducted as tester, 16HBE cells treated only with anti-BPDE were conducted as driver, and cDNA representational difference analysis (cDNA RDA) was used to compare the differential gene expression between the two kinds of cells. The cDNA fragments were ligated to pGEM-T vector and transformed into JM109 bacteria. The plasmid DNA was sequenced and compared with database in GenBank by BLASTN. Results: Among the 5 cloned cDNA sequences, three were novel and were registered in dbEST database, two showed sequence homology to alpha-enolase and a newly found gene ribosomal protein S18/S6-like. Conclusion: These 5 cDNA sequences might play important roles in antitransforming effect of chlorophyllin.; 朱丽瑾蒋义国; 关键词：RDA GEM

叶绿酸抗细胞恶变相关cDNA序列的克隆: 2003年; 目的:克隆叶绿酸抑制人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化的相关差异表达cDNA序列。方法:以叶绿酸及反式-BPDE共同处理的16HBE细胞为实验细胞,以反式-BPDE单独处理的16HBE细胞为对照细胞,采用cDNA代表性差异分析法,比较2种细胞基因表达的差异,分离叶绿酸抗反式-BP-DE作用的相关差异表达cDNA片段。分离的片段分别与pGEM-T载体连接并转化入JM109细菌中,对质粒DNA进行测序。以BLASTN程序进行GenBank的同源性检索。结果:克隆的5条cDNA序列中,有3条为新基因序列,另2条分别与类S18/S6人核糖体蛋白及alpha-烯醇酶等有同源性。结论:克隆的5条cDNA序列所在的基因可能与叶绿酸抗细胞恶性转化分子机制密切相关。; 朱丽瑾蒋义国; 关键词：细胞转化基因表达克隆

BPDE与NiS转化的16HBE恶性细胞系的建立及其生物学特性研究: 目的:探讨用BPDE和NiS转化的16HBE恶性细胞系BPDE-16HBE和NiS-16HBE的致癌性和转移潜能,并鉴定其生物学差异。方法:应用单个细胞克隆技术分离建立BPDE、NiS转化的16HBE恶性细胞株BPDE-...; 宾晓农谭敏吕嘉春纪卫东陈家堃蒋义国; 关键词：苯并(A)芘恶性转化致癌性; 文献传递

基因芯片筛选二羟环氧苯并芘转化支气管上皮细胞相关基因的研究: 目的:应用基因芯片技术筛选二羟环氧苯并芘(BPDE)转化细胞的相关基因,探讨基因芯片技术高通量筛查在细胞、分子毒理学研究中的应用价值。方法:按一步法抽提实验组BPDE转化支气管上皮细胞和对照组正常支气管上皮细胞的总RNA...; 宾晓农谭敏吕嘉春蒋义国陈家堃; 关键词：基因芯片二羟环氧苯并芘支气管上皮细胞; 文献传递

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广东省自然科学基金(20011054)

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