重庆市自然科学基金(CSFC-2005BB5291)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 相关作者:张超吕伟余佩武刘伟郝迎学更多>>
- 相关机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Stat3靶向RNA干扰重组体的构建及鉴定被引量:4
- 2006年
- 目的设计针对Stat3的发夹样RNA干扰重组体,通过脂质体转染结肠癌细胞HCT116观察其干扰效果,为探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计针对Stat3编码区的有短发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,克隆到载体Pavu6+27中构建重组体Pavu6+27-Stat3,再对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析。脂质体法转染重组体至大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒(Pavu6+27)转染为对照;RT-PCR法观察Stat3基因表达改变。结果酶切鉴定和测序分析均提示Stat3靶向RNA干扰重组体的构建成功,Pavu6+27-Stat3转染后HCT116细胞Stat3基因表达较空载体Pavu6+27转染的对照组显著下降。结论Stat3靶向RNA干扰重组体成功构建,并能有效抑制HCT116细胞中Stat3基因表达。本实验为下一步利用RNAi技术沉默肿瘤细胞中Stat3基因的表达,诱导肿瘤细胞凋亡或抑制其增生,为探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础。
- 吕伟张超郝迎学刘伟余佩武
- 关键词:STAT3RNA干扰