国家自然科学基金(31171296)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 一种改良的蛋白质电泳考马斯亮蓝G-250染色方法被引量：8
- 2012年
- 目的建立一种简便、低毒的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法。方法电泳后的凝胶经短暂固定后,用含氨基磺酸的考马斯亮蓝G-250溶液染色,无需脱色。结果该方法灵敏度高于经典考马斯亮蓝R-250染色方法,并去除了常规染色和脱色液中有毒的甲醇等溶剂。结论改良方法具有灵敏度高、染色背景浅、节省染料、直接显色无需脱色及配方安全低毒等优点。
- 张瑶刘芳张页
- 关键词：电泳聚丙烯酰胺考马斯亮蓝
- 邻硝基苯基靛红查尔酮单用或与抗癌药或抑制剂联用的抗癌活性被引量：2
- 2013年
- 目的研究邻硝基苯基靛红查尔酮(ONIC)单独和联合用药的抗癌效果并分析其机制。方法检测ONIC对体外培养癌细胞的增殖抑制。用Chou氏法和金氏法探讨ONIC与10种抗癌药或通路抑制剂的联用效果。结果 ONIC对8种癌细胞系均有显著抗癌活性。与ONIC有协同作用的药物有5种:HSP90抑制剂17-AAG、Arf抑制剂布雷菲德菌素A、蛋白酶体抑制剂硼替佐米、mTOR抑制剂雷帕霉素、ERK1/2抑制剂U0126。与ONIC拮抗的药物有3种:RhoA抑制剂法舒地尔、PI3K抑制剂LY294002、LKB1-AMPK激动剂甲福明。微管稳定剂紫杉醇和Rac1抑制剂NSC23766与ONIC有叠加作用。结论 ONIC不仅自身有强抗癌活性,而且与不同药物联用具有特异的协同或拮抗效果,提示其机制可能与ONIC作用于RhoA和mTOR的上、下游通路有关。
- 戚雨婷张丽君赵翔张页
- 关键词：靛红查尔酮抗癌药联合用药
- 一种N取代4,6-二氯靛红的抗癌机制研究
- 2018年
- 目的癌症已成为威胁人类健康的最严重疾病之一，研发新型抗癌药，揭示其作用机制，具有重要医学意义。本研究报道了一种新型4，6-二氯靛红衍生物（FMDOS）的抗癌活性及其作用机制。方法利用酸性磷酸酶法检测FMDCIS对癌细胞体外增殖的影响；观察在FMDCIS作用下人肝细胞癌HepG2细胞的形态变化；应用流式细胞术分析FMDCIs对细胞周期的影响；于25℃离心分离可溶性的微管蛋白二聚体与不溶的聚合微管蛋白，检测FMDCIS处理组和对照组HepG2细胞内微管组装水平的差异；蛋白质印迹法检测FMDCIS所致细胞周期和凋亡通路中关键调控蛋白的改变；荧光染料单丹磺酰戊二胺（monodansylcadaverine，MDC）检测自噬小体的变化。结果FMDCIS对人肝癌HepG2和BEL-7402细胞，以及小鼠乳腺癌4T1细胞均有显著的杀伤效果，其中对HepG2细胞的杀伤效果最强，其IC50为0．57μg／mL。而FMDCIS对人胎肝细胞L02的Ic50为1．67μg／mL，明显高于HepG2细胞，表明FMDCIS对胎肝细胞的毒性相对较弱。光镜显示，FMDCIS作用后的HepG2细胞铺展能力丧失并变成圆形。流式细胞术检测结果显示，HepG2细胞在FMDCIS孵育6、12和24h后，G2／M期占比分别为（10．2±0．5）％、（71．3±1．3）％、（82．3±1．2）％，与对照组相比差异有统计学意义，F=161．38，P〈0．01，表明FMDCIS可将HepG2细胞阻断于G2／M期。此外，随着FM—DCIS作用时间的延长，G2／M峰左移，提示发生了染色体丢失和有丝分裂灾难。对照组HepG2细胞内可溶性微管蛋白与不溶性聚合微管蛋白之比值为1．01±0．02，而在FMDCIS给药组孵育24h后，可溶性与聚合微管蛋白比值增加到2．01±0．23（F=10．38，P〈0．01），表明FMDCIS具有秋水仙素样的抗微管药活性，可抑制细胞内微管组装。蛋白质印迹法检测结果显示，在FMDCIS作用下，HepG2细胞内周期蛋白CyclinB1含量增高，F
- 杨玉林赵翔张页
- 关键词：靛红抗癌药细胞周期阻滞细胞周期蛋白微管蛋白有丝分裂
- 一种N取代靛红衍生物对肝癌细胞的作用及机制
- 2018年
- 目的探讨一种新型N取代靛红衍生物(3MMIS)诱导肝癌细胞Hep G2产生周期阻滞并死亡的相关机制。方法利用酸性磷酸酶法检测体外抗癌活性。光镜下观察细胞的形态变化特征。流式细胞计检测细胞周期。Western blot检测细胞周期相关蛋白水平。检测3MMIS对微管组装的影响。结果 3MMIS对Hep G2细胞的IC50为0.4 mg/L。经过药物处理后细胞变圆,并出现很多囊泡。药物作用后细胞周期被阻滞在G2/M期,Cyclin B1持续增多,cyclin D1、cyclin E、E2F1、Rb和c-Myc的蛋白水平显著下调。3MMIS作用下细胞内可溶性游离微管蛋白增多,不溶性聚合微管蛋白减少。结论 3MMIS可以通过干扰微管蛋白的聚合引起Hep G2细胞发生周期阻滞,从而诱导细胞死亡。
- 何静宇赵翔张页
- 关键词：靛红自噬细胞周期阻滞微管蛋白抗癌药
