云南省自然科学基金(2009ZC168M)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：姬秋彦李健峰徐维明李智华李晓晶更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 3种方法提取的B群脑膜炎奈瑟菌外膜囊泡组分的免疫原性、毒性及杀菌活性被引量：3
- 2011年
- 目的采用3种方法提取B群脑膜炎奈瑟菌(Serogroup B Neisseria meningitidis,MenB)的外膜囊泡(Outer mem-brane vesicle,OMV),并分析其免疫原性、毒性和杀菌活性。方法分别采用去污剂+EDTA、EDTA、从培养上清液中离心提取3种方法获得MenB的OMV,即dOMV、nOMV和sOMV,SDS-PAGE分析OMV主要蛋白组分,Lowry法测定蛋白浓度,LAL试验测定内毒素含量。将3种OMV免疫小鼠,采用ELISA法测定小鼠血清中IgG抗体滴度,杀菌力试验测定3种OMV诱导针对MenB补体依赖的杀菌反应。结果 dOMV、nOMV和sOMV的主要蛋白成分基本一致,内毒素含量分别为5.0×103、7.5×104和4.0×106 EU/mg,产率分别为11.640、10.210和4.135μg/1010个细菌;dOMV、nOMV和sOMV组小鼠血清抗体滴度分为3.98×106、2.51×107和5.62×104,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),杀菌抗体滴度分别为501.70、697.11和55.39。结论用3种不同的方法成功制备了3种MenB的OMV,并对其免疫原性、毒性和杀菌活性进行了比较,为研发B群脑膜炎OMV疫苗提供了理论依据。
- 李晓晶高丹丹毕研伟姬秋彦闫玲梅戴宗祥李健峰李智华徐维明
- 关键词：疫苗
- B群脑膜炎球菌lpxL2基因敲除突变株的构建及初步鉴定
- 2011年
- 应用基因敲除技术的方法和原理,通过PCR扩增B群脑膜炎球菌lpxL2基因及载体pGBK T7上的Kan抗性片段,lpxL2片段与puc-18载体连接得到重组质粒msb-puc,以重组质粒msb-puc为基础,分别通过反向PCR和酶切2种方法构建lpxL2基因中间片段的缺失,并在缺失位点连入Kan抗性表达盒,从而得到重组质粒mpK,mpK转化B群脑膜炎球菌,并用PCR的方法对转化子进行初步筛选鉴定,初步确定突变株1株.本研究通过基因敲除MenB中LPS合成途径相关基因lpxL2的方法,降低LPS毒性,为B群脑膜炎球菌OMV疫苗的研发做了铺垫.
- 李晓晶姬秋彦肖红剑彭正华罗娜杨增福杨槐李健峰李智华徐维明
- 关键词：脑膜炎奈瑟氏菌基因敲除脂多糖
