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自噬途径对反式-BPDE诱导人支气管上皮细胞16HBE影响及其机制的探讨被引量：1: 2012年; 目的:研究反式-BPDE诱导正常的人支气管上皮细胞16HBE发生恶性转化前后自噬水平的变化及其可能机制。方法:利用前期建立的细胞恶性转化模型,采用激光共聚焦扫描显微镜成像技术,在无损伤状态下,实时观测反式-BPDE恶性转化细胞(16HBE-T)和正常细胞(16HBE-N)中自噬体标记蛋白GFP-LC3的荧光强度及定位,并利用蛋白质印迹法技术检测细胞内自噬信号通路关键效应分子的表达。结果:16HBE-T细胞与16HBE-N细胞相比,GFP-LC3蛋白的点状聚集明显减少,只有16HBE-N细胞的1/3左右,表明自噬水平下降,蛋白质印迹法检测发现,mTOR激酶活性上升,Beclin 1表达下降。结论:反式-BPDE可能通过自噬途径参与诱导16HBE细胞恶性转化的癌变过程,将为预防和治疗肺癌提供重要信息。; 张岚杨磊吕嘉春; 关键词：肺肿瘤自吞噬作用

两种等位基因特异性扩增方法在结肠癌K-ras癌基因点突变检测中的应用比较(英文): 2012年; 针对传统电泳检测方法存在操作复杂、费时等缺点,提出一种用于检测K-ras癌基因点突变的实时荧光等位基因特异性扩增(Allele specific amplification,ASA)方法。该法采用突变型引物对结肠癌基因组中的K-ras基因进行等位基因特异性扩增,只有突变型样品能被顺利扩增出双链DNA产物,该产物能与双链DNA染料SYBR GreenⅠ结合,产生荧光信号从而被检测到。通过对荧光域值和溶解曲线分析来区分不同的基因突变类型。该法可以检测到野生型DNA中含量为1/1 000的突变型DNA,整个检测时间小于1 h。我们用该法检测31例结肠癌样品中K-ras基因密码子12发生的点突变,其中有15例检出为阳性。此外,还采用等位基因特异性扩增结合电泳分析对样品进行了检测,并对两种方法进行了比较。结果显示:实时荧光等位基因特异性扩增方法具有操作简便、快速、检测成本低等优点,为临床诊断基因突变引起的疾病提供了一种可行的手段。; 朱德斌张岚; 关键词：SYBR 结肠癌点突变

医学院校生物技术专业普通生物学教学实践与探索被引量：7: 2012年; 普通生物学是覆盖生命科学众多学科领域的综合性基础课程,也是生物技术类专业学生的一门专业基础课程,为了解决在医学院校低年级开设该课程所面临的教学内容多、知识面广、学时少、学生基本知识欠缺的突出矛盾,我教研室对普通生物学课程的教学内容和教学模式进行了改革与探索,旨在提高普通生物学的教学效果和质量,为培养高素质的合格人才提供科学保证。; 张岚曾军章远志; 关键词：普通生物学生物技术教学实践

小鼠增龄过程中胸腺细胞的退行性改变: 2011年; 目的:探讨在小鼠增龄过程中胸腺细胞退行性改变的机制。方法:选用20只不同月龄的昆明小鼠,共分为4组(乳鼠组、1月龄鼠组、3月龄鼠组及6月龄鼠组),用颈椎脱臼法处死小鼠,取出胸腺,通过HE染色检测各月龄小鼠胸腺细胞的状态和分布变化;采用流式细胞仪检测各月龄小鼠胸腺细胞的自然凋亡率及细胞周期各时相的细胞比例。结果:6月龄鼠组小鼠胸腺严重萎缩,胸腺细胞自然凋亡率与其他组比较,差异具有统计学意义。各组小鼠不同细胞周期的胰腺细胞分布不同,S期细胞凋亡速度最快。结论:小鼠增龄相关的退行性改变可能主要作用于S期进入G_2期的相关蛋白。; 张岚张锦宏罗深秋; 关键词：胸腺退行性改变

利用FRET技术实时检测Bid蛋白在TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中的作用: 2012年; 】目的在活细胞中实时检测TNF-α诱导PCI2细胞凋亡过程中Bid蛋白的作用并探讨PCI2细胞凋亡的信号通路。方法利用基于荧光共振能量转移（nuoreseence resonance energyt ransfer，FRET）原理设计的荧光探针pFRET-Bid（YFP-Bid-CFP）转染PC12细胞后，在激光共聚焦显微镜下实时检测Bid蛋白的切割情况，并采用专用软件进行数据分析。结果TNF-α诱导细胞凋亡的过程中，在短时间内（3h）就凋亡的细胞中观测不到bid的切割，而在8h后凋亡的细胞中却观测到了bid的切割。结论通过分析实验结果推测不同时间凋亡的细胞经过的信号通路是不同的，一个是不通过线粒体的较快途径，一个是需要通过线粒体的较慢途径。; 张岚朱德斌; 关键词：TNF-Α FRET

结晶型硫化镍通过自噬途径诱导16HBE细胞恶性转化癌变被引量：6: 2012年; 镍化合物广泛存在于人类职业环境中,是人类发生肺癌的主要危险因素。我们前期研究已证实金属毒物结晶型硫化镍(NiS)的暴露是发生肺癌的重要病因,但具体的致癌机制仍未明了。本研究利用前期建立的结晶型 NiS 恶性转化人支气管上皮细胞的细胞模型,首次采用激光共聚焦扫描显微镜成像技术,在无损伤状态下,实时观测恶性转化细胞(16HBE-T)和正常细胞(16HBE-N)中自噬体标记蛋白 GFP-LC3 的荧光强度及定位,并利用 Western Blotting 技术检测细胞内自噬信号通路关键效应分子的表达。共聚焦实验结果表明:16HBE-T 细胞与 16HBE-N 细胞相比,GFP-LC3 蛋白的点状聚集明显减少,经测量只有 16HBE-N 细胞的 1/3 左右,表明自噬水平下降;Western Blotting 检测发现:mTOR 激酶活性上升,Beclin 1 表达下降。上述结果证明,结晶型 NiS可通过多个自噬途径参与诱导 16HBE 细胞恶性转化的癌变过程,将为预防和治疗肺癌提供重要信息。; 张岚杨磊吕嘉春; 关键词：人支气管上皮细胞自噬 BECLIN

中国女性对于FMR1突变产前筛查的态度调查(英文): 2012年; 目的调查中国女性对于脆性X综合征产前筛查的态度。方法随机调查284位没有智力发育障碍及脆性X综合征家族史的女性,分为已婚已育(67/284)、已婚未育(54/284)及未婚未育(163/284)三组。结果各组愿意接受产前筛查的比率分别为77.6%、66.7%及74.9%。而各组选择在得知产前筛查结果阳性时愿意终止妊娠的比率分别为95.5%、92.6%及90.2%。结论在中国女性群体中对FMR1基因突变进行产前筛查有较高的接受度。大多数人选择接受针对脆X综合征的产前筛查。; 张岚章远志; 关键词：脆性X综合征智力发育障碍产前筛查

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广东省自然科学基金(S2011040003622)