安徽省国际科技合作基金(06088017)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：汪天平王珍丽汪峰峰章乐生汪奇志更多>>
- 相关机构：安徽省血吸虫病防治研究所皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省国际科技合作基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 粪便中日本血吸虫虫卵DNA的提取及PCR检测方法的优化被引量：5
- 2008年
- 目的建立一套系统、完整的粪便日本血吸虫虫卵DNA提取法及PCR优化体系。方法利用蛋白酶K和苯酚法从感染日本血吸虫尾蚴的家兔粪便中提取DNA,根据日本血吸虫基因(AF00369)设计特异性引物,以粪便中提取的DNA为模板,采用PCR方法扩增目的基因片段,对PCR方法的各种反应条件进行优化并采用有限稀释法推测PCR检测法可检测到的最低虫卵数。结果以感染家兔的粪便中提取的DNA为模板,用PCR方法可扩增到分子量大小约为400 bp的特异性条带,测序结果经BLAST工具进行分析,与日本血吸虫基因(AF00369)比对的同源性为96%;25μl PCR反应体系的最优化反应条件:MgCl2 1.5μl;dNTP 0.5μl;引物1.0μl;DNA模板5.0μl;Taq DNA聚合酶0.5μl。扩增程序为:94℃预变性5min、94℃变性30s、53℃退火30s、72℃延伸30s,30个循环、72℃延伸7min、4℃保存。PCR检测法可检测到的最低虫卵数为0.015个。结论成功建立感染家兔粪便中虫卵DNA的提取方法及PCR血吸虫基因片段检测方法,同时对PCR反应条件进行优化,为从分子角度检测日本血吸虫虫卵DNA提供科学的实验依据。
- 王珍丽汪天平汪奇志操治国刘晓明肖祥尹晓梅周利汪峰峰章乐生
- 关键词：日本血吸虫粪便聚合酶链式反应
- 粪便PCR检测法用于诊断日本血吸虫病应用价值的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨PCR法检测日本血吸虫病的特异性、敏感性及与其他肠道寄生虫病的交叉反应情况。方法采用PCR法对经病原学检查确诊的阳性粪样、非血吸虫病流行区的正常人粪样以及钩虫、蛔虫、鞭虫等肠道寄生虫感染粪样分别进行检测,评价PCR法的各项检测指标。结果 PCR法检测日本血吸虫病的敏感性和特异性均为100%,与钩虫、鞭虫、蛔虫等肠道常见寄生虫均无交叉反应。结论粪便PCR法检测日本血吸虫病具有敏感性高、特异性强、交叉反应少等优点,具有较高的现场查病和临床诊断血吸虫病的应用价值。
- 王珍丽汪天平汪奇志尹晓梅周利汪峰峰王玥章乐生
- 关键词：日本血吸虫病聚合酶链式反应
- 聚合酶链式反应检测日本血吸虫的研究进展被引量：3
- 2008年
- 王珍丽汪天平
- 关键词：日本血吸虫病聚合酶链式反应免疫学诊断晚期血吸虫病人人群感染率
