国家自然科学基金(30571982) 作品数:9 被引量:33 H指数:5 相关作者: 曹励之 许望琼 贺钰磊 俞燕 杨明华 更多>> 相关机构: 中南大学 湖南师范大学 广西医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
高迁移率族蛋白-1诱导U937细胞分泌白细胞介素-1β的实验研究 2008年 细胞因子网络失衡与白血病发病密切相关。IL-1β对造血系统的调节有重要作用。在许多类型白血病的发病机制中,IL-1β以自分泌或旁分泌的形式直接或间接刺激白血病干/祖细胞恶性增殖。高迁移率族蛋白-1(high mobility group box 1.HMGB1)是新发现的一种重要细胞因子,在炎症反应调控中发挥重要作用。HMGB1是否参与调节白血病细胞分泌IL-1β,目前尚不清楚。我们以人单核细胞白血病细胞株U937细胞为研究对象,采用Western blotting、ELISA等技术研究HMGB1对IL-1β分泌的影响。 康睿 唐道林 曹励之 俞燕 张国元关键词:高迁移率族蛋白-1 U937细胞 白细胞介素-1Β 细胞分泌 细胞因子网络失衡 HMGB1基因沉默对阿霉素诱导K562/A02细胞凋亡增敏作用的研究 被引量:7 2008年 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因沉默对白血病细胞耐药逆转的作用。方法将HMGB1基因特异性干扰RNA(HMGB1 siRNA)导入K562/A02细胞中,通过Western blot和RT—PCR方法检测HMGB1基因在转染前后的表达;WST8法检测阿霉素(ADM)对转染前后K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测凋亡细胞百分率;Western blot检测线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO的释放:采用caspase活性定量检测试剂盒分析caspase-3的活性。结果①与未经处理的K562/A02细胞组相比,转染HMGB1 siRNA的K562/A02细胞组HMGB1 mRNA和蛋白水平分别下降86%和71%;②HMGB1基因沉默使K562/A02细胞对ADM的药物敏感性增强,其IC50值从转染前的(4.83±0.08)μg/ml降低到(1.33±0.10)μg/ml,并在ADM浓度为1μg/ml和5μg/ml时,细胞凋亡百分率分别增加27%、32%;③HMGB1基因沉默可促进ADM所致Smac/DIABLO从线粒体向胞浆释放。并增加caspase-3的活性。结论HMGB1基因沉默能明显增加K562/A02细胞对ADM的敏感性,逆转K562/A02细胞对ADM耐药。 谢岷 康睿 俞燕 朱珊 贺钰磊 许望琼 唐道林 曹励之关键词:细胞凋亡 188例急性淋巴细胞性白血病患儿的疗效及预后分析 被引量:6 2008年 目的对中南大学湘雅医院、广西医科大学第一附属医院急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的治疗结果及影响无事件生存率(EFS)的因素进行分析。方法所有病例均采用中华医学会儿科学分会血液学组1998年第二次修正的小儿ALL诊疗建议(简称荣成方案)化疗,采用Kaplan-Meier方法评估依从治疗的188例患儿EFS,组间患儿EFS差异用Log-rank检验,用COX比例风险模型分析独立因素对EFS的影响。结果374例接受诱导治疗儿童的完全缓解(CR)率为93.6%(354例),全程依从治疗的188例ALL的5年EFS为(68.1±5.6)%,标危、高危组5年EFS分别为(75.2±6.0)%、(47.6±11.6)%;总复发率为10.6%,复发的中位时间为13个月;188例患儿中共有29例死亡,死亡率15.4%;化疗相关死亡13例(7.0%)。危险度分组、t(9;22)/bcr-abl融合基因和白细胞计数为独立的不良预后因素。结论两家医院通过荣成方案治疗儿童ALL的总EFS接近70%,需要进行更加详细的危险因素评估和分组,降低治疗相关死亡率,提高儿童ALL治疗的依从性,以进一步提高EFS。 杨明华 贾文广 曹励之 贺钰磊 廖宁 陈国力 罗建明 许望琼 杨静关键词:无病生存 小儿白血病危险因素调查 被引量:6 2008年 目的研究儿童白血病的可能危险因素。方法自行设计白血病危险因素调查表,对2005年1月至2007年1月中南大学湘雅医院儿科住院的136例白血病患儿进行1∶1配对对照研究,对所得资料进行单因素分析,选择其中有意义的进行多因素条件Logistic回归分析。结果88项指标单因素分析中有15项有统计学意义;其中出生体重、家族肿瘤病史、母亲生育年龄、房屋附近有高压线、家中进行装修、患儿既往频繁感染6项指标在多因素条件Logistic逐步回归分析中有统计学意义。结论本次调查提示出生体重、家族肿瘤病史、母亲生育年龄、房屋附近有高压线、家中进行装修、患儿既往频繁感染病史,可能为较显著的儿童白血病危险因子。 俞燕 陈可可 康睿 王卓 胡婷 黄琼 许望琼 曹励之关键词:儿童 白血病 LOGISTIC回归分析 WAVE1基因在白血病细胞多药耐药性中的作用 【目的】探讨 WASP 家族 Verprolin 同源蛋白1(WAVE1)基因在 K562/A02白血病细胞多药耐药机制中的作用。【方法】将 pEFBOS-WAVE1真核表达质粒转染 K562细胞构建 WAVE1高表达的... 康睿 曹励之文献传递 儿童急性髓细胞性白血病WAVE1基因对耐药相关基因表达影响的研究 被引量:2 2010年 目的探讨儿童急性髓细胞性白血病(AML)中WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVEl)基因参与P糖蛋白(P—gP)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达和调控的机制。方法将52例患儿依据是否在随访期内持续缓解(CCR)分为难治/复发组和缓解组,应用实时定量PCR(RQ-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中骨髓单个核细胞(BMMCs)中WAVE1、P—gP、MRP1、LRP及BCRP蛋白和基因mRNA的表达水平。将PCDNA3.1-WAVEl真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVEl高表达HL-60细胞,将WAVEl基因的特异性小片段干扰RNA(WAVEl siRNA)转染HL60/ADR构建WAVE1低表达HL60/ADR细胞;Western blot和RQ—PCR法检测基因转染前后白血病细胞系grAVE1、MRP1及BCRP蛋白及基因的表达水平。结果①复发/难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿WAVE1基因表达水平(P〈0.05);②同一患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平(P〈0.05);③与HL60细胞相比较,HL60/ADR细胞WAVE1mRNA及蛋白表达水平增加3.53倍及95%;④转染WAVE1后HL60细胞系MRP1 mRNA和蛋白表达水平分别增加16.54倍、129%,BCRPmRNA和蛋白表达水平分别增加4.93倍及96%,而转染WAVE1 siRNA的HL60/ADR细胞MRP1 mRNA和蛋白的表达水平为干扰前的0.11倍及43%,BCRPmRNA和蛋白的表达水平为转染前的0.14倍及71%。结论WAVE1与儿童AML的病程及预后相关,参与了髓系白血病细胞多药耐药的形成并可影响MRP及BCRP1等多个重要的耐药相关基因的表达和作用。 杨明华 赵明一 贺钰磊 汪敏慧 王卓 谢岷 吴秀山 曹励之儿童急性非淋巴细胞白血病耐药相关基因的表达及与WAVE1基因的相关性 目的:探讨儿童急性非淋巴细胞白细胞(AML)中WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因参与多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)、肺耐药相关蛋白基因(MVP)、乳腺癌耐药蛋白基因(BC... 杨明华 赵明一 贺钰磊 汪敏慧 王卓 谢岷 吴秀山 曹励之文献传递 高迁移率族蛋白1对Jurkat细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素β表达的影响 2008年 研究表明细胞因子失衡是白血病细胞免疫逃逸的重要机制之一。核蛋白高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)是新发现的一种重要细胞因子,参与各种炎症反应。我们以淋巴瘤细胞系Jurkat细胞为研究对象在细胞水平观察HMGB1对TNF-α和IL-β表达的影响,以探讨HMGB1在白血病细胞因子网络失衡中的作用。 付玲 杨明华 曹励之关键词:JURKAT细胞 高迁移率族蛋白1 肿瘤坏死因子Α 细胞因子网络失衡 细胞因子失衡 HMGB1 儿童急性淋巴细胞白血病及阿霉素所致Jurkat细胞凋亡时WAVE1表达研究 被引量:6 2008年 目的初步探讨WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)在急性淋巴细胞白血病(ALL)发病中可能的作用及意义。方法运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法和蛋白质印迹(Western blotting)分别检测40例ALL初治患儿、15例化疗完全缓解半年、4例复发、10例非白血病患儿BMMCs中WAVE1 mRNA和蛋白的表达水平。以不同浓度阿霉素处理Jurkat细胞:采用MTT法测细胞增殖;②采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;③采用RT-PCR和Western blotting检测WAVE1表达。结果ALL初治和复发患儿BMMCs均有WAVE1 mRNA和蛋白的表达,对照和缓解组BMMCs中mRNA和蛋白低表达或无表达,初治和复发组的WAVE1 mRNA和蛋白的表达表达水平显著高于化疗后缓解组和对照组(P<0.01)。阿霉素明显抑制Jurkat细胞增殖,抑制作用呈剂量时间依赖效应(P<0.05);阿霉素作用24h后,细胞凋亡随药物浓度增增高而增加,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);细胞WAVE1 mRNA和蛋白表达水平随阿霉素处理浓度的增高而降低,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论WAVE1在ALL患儿BMMCs中高表达;WAVE1可能与儿童ALL病程相关,它可能成为动态检测儿童ALL病情的一个新指标。 王卓 胡婷 曹励之 康睿 赵明一 俞燕 许望琼关键词:急性淋巴细胞白血病 WAVE1 凋亡 儿童 急性淋巴细胞白血病患儿WAVE1和p22phox的表达及WAVE1与氧化应激的关系 被引量:5 2009年 目的研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WAVE1)及NADPH氧化酶亚基p22phox的表达并探讨WAVE1表达与白血病病程及氧化应激的关系。方法实时定量PCR法测定41例ALL儿童及10例正常对照儿童PBMCs中WAVE1和p22phox的表达水平。黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)和二硫代二硝基苯甲酸法(DTNB法)分别测定外周血血浆总超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果①儿童ALL活动期组(初治+复发)PBMCs中WAVE1,p22phox的表达水平与正常对照组和完全缓解组相比均显著增高(P<0.01);ALL完全缓解组中,WAVE1,p22phox表达高于正常对照组(P<0.05);②正常对照组、活动期组和缓解组血浆SOD活力分别为166.35±27.93,22.62±7.39,107.11±28.57U/mL;GSH-Px活力分别为490.94±39.38,91.73±28.88,267.56±82.64μmol/L。ALL活动期组外周血血浆总SOD,GSH-Px活性较完全缓解和正常儿童明显降低(P<0.01);③随着WAVE1和p22phox的高表达,血浆中SOD,GSH-Px活性呈现下降趋势。WAVE1的表达水平与p22phox表达水平呈正相关(r=0.34,P<0.05),与血浆SOD,GSH-Px活性呈负相关(r分别为-0.336和-0.408,P<0.05)。结论与正常对照组相比,WAVE1和p22phox在儿童ALLPBMCs中表达增高,而且其变化与ALL病程相关。ALL患儿氧化应激可能参与了WAVE1表达的调控。 贺钰磊 曹励之 杨静 杨明华 许望琼 谢岷 石壮关键词:WAVE1 P22PHOX 氧化应激 急性淋巴细胞白血病