安徽高校省级自然科学研究基金(KJ2009A160) 作品数:16 被引量:60 H指数:4 相关作者: 薛建平 张爱民 盛玮 朱艳芳 宋运贤 更多>> 相关机构: 淮北师范大学 宿州学院 淮北煤炭师范学院 更多>> 发文基金: 安徽高校省级自然科学研究基金 安徽省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
分子标记技术在药用植物研究中的应用 常用的DNA分子标记技术包括限制性片段长度多态性标记(RFLP)、随机扩增多态性标记(RAPD)、扩增片段长度多态性标记(AFLP)、简单重复序列标记(SSR)和位点特异性鉴别PCR(allele-spcific dia... 卢河东 薛涛 薛建平文献传递 根癌农杆菌介导sHSP基因对半夏的遗传转化 被引量:1 2012年 目的:建立高效的半夏遗传转化体系。方法:以半夏试管苗的叶柄为外植体,采用根癌农杆菌介导法,探索了酚类物质、农杆菌菌液浓度、侵染时间、预培养时间及共培养时间等对半夏遗传转化效率的影响。结果与结论:不经过预培养阶段,用含AS 40 mg.L-1的根癌农杆菌菌液侵染15 min后共培养3 d时可有效提高遗传转化效率。将转化后的叶柄接到含有100 mg.L-1Kan和350 mg.L-1Carb的分化培养基上进行筛选培养,30 d左右在叶柄的两端分化出抗性的试管小块茎。对抗性转化植株进行Gus染色和PCR检测,结果表明外源基因sHSP已经整合到半夏基因组中。 郭朝阳 崔婷婷 薛建平 朱艳芳 张爱民 盛玮 滕井通关键词:半夏 SHSP 农杆菌介导 半夏试管小块茎发育过程中相关基因差异表达的研究 被引量:3 2011年 目的:分析半夏试管块茎形成过程中总mRNA差异表达的变化规律,为研究半夏试管块茎形成的分子机制提供了信息。方法:利用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR),分离和克隆半夏试管小块茎发育的相关基因片段。结果和结论:分离到了15个半夏试管小块茎发育过程中特异表达的cDNA片段,在GenBank中进行同源性比较发现6个没有同源序列与之匹配,推测为新的cDNA片断;3个片段推导的氨基酸序列分别与真核生物启动子,MADS-box蛋白和乙烯信号转导因子有高度同源性。半定量RT-PCR进一步证实它们存在,并在半夏块茎形成不同天数高度特异表达。 盛玮 张爱民 黄月琴 薛建平 宋运贤 常莉关键词:半夏 基因表达 皖贝母总RNA提取方法的比较研究 被引量:7 2012年 目的:针对皖贝母鳞茎富含多糖、酚类和其他多种次生代谢产物的特点,筛选一种简单高效的皖贝母总RNA提取方法。方法:用异硫氰酸胍法、皂土法、改进的SDS/酚法、RNAiso plus 4种方法分别提取皖贝母鳞茎总RNA,并对提取的RNA进行电泳及RT-PCR技术检测与分析。结果:皂土法提取的总RNA条带清晰无弥散,完整性好无明显DNA和其他杂质污染,适用于RT-PCR试验。结论:皂土提取法是一种适合于皖贝母总RNA抽提的简单高效的方法。 卢河东 薛涛 李岳忠 薛建平 盛玮 朱艳芳 张爱民关键词:皖贝母 鳞茎 离体条件下药用菊花不同品种羟脯氨酸耐受性比较研究 2011年 目的:比较5种药用菊花试管苗在离体条件下对羟脯氨酸的耐受性,为药用菊花引种栽培和育种提供依据。方法:以5种药用菊花试管苗为材料,接种于添加不同浓度羟脯氨酸的培养基中培养,测定植株叶片内游离脯氨酸的含量,并统计植株的受害指数和存活率。结果和结论:在高浓度羟脯氨酸胁迫下,亳菊和怀菊试管苗受害指数较低,成活率相对较高,叶片内游离脯氨酸含量高,具有较强的HYP耐受性。滁菊和贡菊植株存活率低于亳菊和怀菊,表现为中等的HYP耐受性。杭菊试管苗存活率最低,HYP耐受性最差。 朱艳芳 郭朝阳 薛建平 张爱民 盛玮 宋运贤关键词:药用菊花 离体培养 羟脯氨酸 高温胁迫下半夏叶片总RNA变化及mRNA差异表达的研究 被引量:1 2010年 目的:分析半夏高温倒苗过程中总RNA及mRNA差异表达的变化规律,为研究半夏高温倒苗的分子机制提供了信息。方法:经过不同时间的高温胁迫处理,测定半夏叶片总RNA含量变化和mRNA表达的差异。结果:半夏叶片总RNA的含量变化分为3个降低阶段和2个升高阶段,胁迫0,6 h时含量最高,胁迫4,42 h和倒苗时含量最低,差异显示表明胁迫6h的样品条带多态性和带型与0 h的接近,其余胁迫时间的样品条带远少于0,6 h时的样品条带,并且在不同的样品之间均有mRNA差异条带出现。结论:在半夏经高温胁迫而倒苗的过程中,基因表达开启与关闭和基因表达增强与减弱模式具有一定的规律,并且可能启动了不同的基因表达系统。 薛建平 吴林 盛玮 张爱民 李国兴 常莉 宋运贤 陶兴魁关键词:半夏 高温胁迫 蔗糖对半夏试管块茎形成过程中总RNA含量的影响 2012年 [目的]探讨蔗糖诱导半夏试管块茎形成过程中RNA的变化规律。[方法]以半夏试管苗为材料,采用5种蔗糖浓度处理,通过分光光度计测定总RNA含量,并结合差异反转录PCR技术,分析各浓度蔗糖处理半夏试管小块茎前后其总RNA的变化规律。[结果]各蔗糖浓度处理的半夏总RNA含量变化幅度较大,但总趋势表现为前15 d处于上升状态,从15 d到25 d开始下降,从25 d到30 d又开始小幅度上升。试管块茎的形成伴随着总RNA含量的上升,高浓度蔗糖处理可能启动了半夏试管块茎发育相关基因的表达。[结论]该研究结果为揭示蔗糖调控半夏试管块茎形成过程中相关基因的表达信息和分子机理提供了依据。 郭兰 张爱民 薛建平 朱艳芳 盛玮关键词:半夏 蔗糖 总RNA DDRT-PCR 地黄叶片试管块根诱导体系优化的研究 被引量:2 2012年 目的:研究不同浓度蔗糖和植物生长物质对地黄叶片试管块根诱导的影响,建立从地黄叶片诱导试管块根的高效体系。方法:以85-5地黄试管苗的叶片作为外植体,先经生根诱导,后转接至正交设计的培养基中,诱导地黄试管块根。结果与结论:NAA对试管地黄诱导影响显著,其次分别为蔗糖和6-BA,以试管苗叶片为外植体诱导地黄试管块根的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1+蔗糖70 g.L-1。该研究为今后利用地黄试管块根进行人工种子和次生代谢研究提供了高效的培养体系。 薛建平 薛涛 郭兰 朱艳芳 卢河东 张爱民 盛玮关键词:地黄 叶片 正交试验 宿半夏SRAP-PCR反应体系优化的研究 2012年 目的:研究宿半夏SRAP-PCR分子标记技术的优化体系。方法:采用L16(54)正交设计对宿半夏SRAP-PCR反应体系进行了5因素(dNTPs,Mg2+,模板DNA,引物,Taq酶)4水平优化筛选。结果:半夏SRAP最适合的正向引物是5'-TGAGTCCAAACCGGAAG-3',反向引物为5'-GACTGCGTACGAATTACG-3'。优化的反应体系为25μL反应体系中含有70 ngDNA模板,0.9μmol.L-1引物,0.2 mmoL.L-1dNTPs,1.5~2.0 mmol.L-1Mg2+,2.0 U Taq酶。结论:宿半夏SRAP-PCR体系的建立为今后构建半夏SRAP遗传图谱奠定了基础。 张爱民 卢河东 薛建平 陶兴魁 薛涛 盛玮 朱艳芳关键词:半夏 SRAP-PCR 反应体系优化 正交设计 半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究 被引量:4 2011年 [目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT 4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L毒莠定+1.5 mg/L KT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。 朱艳芳 毛春娜 张爱民 薛建平 李佳娣 宋运贤关键词:半夏 叶柄