国家自然科学基金(30571963)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 碱性成纤维细胞生长因子对新生大鼠脑缺血后神经新生的影响
- 2009年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对新生大鼠脑缺血后神经新生的影响。方法通过结扎3日龄新生SD大鼠双侧颈总动脉制备脑缺血模型，随机分为治疗组（36只）：给予bFGF10ng／g侧脑室注射；对照组（36只）给予相同体积的生理盐水。另取36只新生大鼠，仅分离双侧颈总动脉，不结扎，不给予药物，作为假手术组。三组大鼠分别于术后第4、7、14天处死，获取脑组织标本，采用免疫荧光染色、Western印记和实时PCR方法，观察三组大鼠不同时点脑室下区巢蛋白（nestin）、Ⅲ型β-微管蛋白（Tuj1）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和少突胶质细胞NG2蛋白及其mRNA的表达变化。结果（1）免疫荧光染色：治疗组BrdU^＋／nestin^＋细胞数目术后7d达高峰[（48.7士5．9）个／视野]，高于同时点对照组[（32．2±3．1）个／视野]和假手术组[（17．3±1．6）个／视野]，差异有统计学意义（P〈0．01）；治疗组BrdU^＋／Tuj1^＋细胞、BrdU^＋／GFAP^＋细胞、BrdU^＋／NG2^＋细胞数目术后14d[分别为（92．6±9．7）、（58．2±6．1）、（57．3±5．4）个／视野]达高峰，高于同时点对照组[分别为（65．8±7．1）、（42．1±4．4）、（37．8±3．2）个／视野]和假手术组[分别为（35．3±3．1）、（33．6±3．4）、（22．4±2．1）个／视野]，差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）Western印迹和实时PCR.与免疫荧光染色结果一致，即治疗组nestill蛋白和mRNA表达术后7d达高峰，高于同时点对照组和假手术组，差异有统计学意义（P〈0．01）；治疗组Tuj1、GFAP和NG2蛋白和mRNA术后14d达高峰，高于同时点对照组和假手术组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论bFGF可促进新生大鼠脑缺血后脑室下区神经干细胞的增殖以及向功能神经细胞（神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞）的分化，可能对新生大鼠脑缺�
- 孙金峤沙彬周文浩周文浩
- 关键词：成纤维细胞生长因子2脑缺血神经新生
- 缺血性损伤对未成熟脑脑室下区神经新生的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察3日龄新生大鼠脑缺血后脑室下区(subventricular zone,SVZ)神经干细胞增殖及其向少突胶质细胞分化的变化,了解未成熟脑缺血性损伤后SVZ的自身修复作用。方法3日龄新生Sparuge-Dawley大鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组结扎双侧颈总动脉,造成脑缺血模型。采用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)腹腔注射标记新生细胞,免疫荧光双标记方法观察脑损伤后不同时间点SVZ新生细胞(BrdU+)、新生神经干细胞(BrdU+/Nestin+)及新生少突胶质细胞(BrdU+/O4+)的变化。结果①神经干细胞增殖变化:实验组缺血后SVZBrdU+细胞增多,术后4d达高峰(253.1±49.3),与同时间点对照组(133.5±17.7)相比差异有非常显著性(P<0.01);双标结果显示SVZBrdU+细胞大多为神经干细胞(Nestin+细胞)。②神经干细胞分化变化:实验组缺血后35d新生少突胶质细胞(BrdU+/O4+阳性细胞)数目增加,主要分布在胼胝体(56.0±7.2)、隔核(45.0±11.9)、纹状体(34.5±4.2)、嗅球(46.5±6.6),与对照组(17.0±6.4,20.5±5.0,14.5±5.8,23.5±8.4)相比差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论①缺血性损伤可激活SVZ神经干细胞增殖,并促进其向少突胶质细胞分化;②未成熟脑SVZ具有损伤后自身修复作用。
- 孙金峤沙彬周文浩杨毅
- 关键词：神经干细胞缺血脑室下区新生大鼠
- 碱性成纤维细胞生长因子对新生大鼠缺血脑组织转化生长因子β1及其受体mRNA表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）对3日龄新生大鼠脑缺血后星形胶质细胞数目以及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）及其受体——Smad2 mRNA表达的影响，探讨bFGF对未成熟脑缺血性损伤的保护作用机制。方法结扎3日龄新生SD大鼠双侧颈总动脉制备脑缺血模型，随机分为对照组（33只）、治疗组（33只）。另取3日龄新生SD大鼠33只为假手术组。免疫荧光染色方法检测三组大鼠术后4d、7d和14d脑室下区胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）阳性细胞数目；实时荧光定量PCR（real—time PCR）技术检测三组大鼠术后4d、7d和14d脑室下区TGF-131及Smad2 mRNA表达变化。结果（1）假手术组GFAP阳性细胞术后7d达高峰[（325．4±52．5）个／视野]，对照组、治疗组GFAP阳性细胞数术后14d达高峰[分别为（533．5±75．7）、（727．2±104．5）个／视野）]，三组同时点比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）对照组TGF-β和Smad2 mRNA表达在术后7d达高峰（分别为7．67±1．22和6．22±1．92），治疗组TGF-β1和Smad2 mRNA表达在术后14d达高峰（分别为8．65±1．02和7．67±1．41），三组同时点比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论未成熟脑缺血后，外源性bFGF可通过诱导TGF-β1的表达，引起星形胶质细胞反应性增生，而发挥其神经营养作用。
- 孙金峤周文浩杨毅沙彬高燕燕
- 关键词：成纤维细胞生长因子2转化生长因子Β星形细胞
