国家高技术研究发展计划(无)
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 相关作者:成岩南文龙金宁一石毅关铭更多>>
- 相关机构:军事医学科学院吉林大学青岛农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因的重组鸭瘟病毒的构建被引量:2
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需区的TK基因(约2.5kb),将其克隆入pUC19载体获得载体puDTK。根据已知载体pcDNA-LacZ的序列设计了一对引物,PCR扩增出pcDNA-LacZ上含CMV启动子、多克隆位点、SV40及LacZ的完整的基因表达盒插入puDTK的TK上,获得质粒puDTCL。根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列,设计引物从T-HA质粒上扩增出HA基因,克隆到puDTCL的表达盒的多克隆位点NheI与ApaI之间,成功构建含LacZ及HA基因的转移载体质粒puDTCL-HA。将这载体质粒与DPV34F2疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经蓝斑克隆筛选和纯化,获得了遗传性状稳定的表达HA基因的重组鸭瘟病毒。
- 孙强强刘忠琛胡潇左青山吴美芹马晶李明义单虎
- 关键词:禽流感病毒鸭瘟病毒TK基因HA基因
- H7N7亚型禽流感病毒血凝素B细胞和Th细胞表位预测及初步鉴定被引量:5
- 2010年
- 预测H7N7亚型禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)B细胞和Th细胞(THelpCell,辅助T细胞,在免疫调节中起促进作用的T细胞亚群。)相关抗原表位,并对所获表位的抗原性进行初步鉴定。根据禽流感流行趋势,从GeneBank下载H7N7禽流感病毒HA氨基酸序列,使用生物信息学方法,对所下载序列进行预测与分析,获得H7N7亚型禽流感病毒血凝素B细胞和Th细胞相关抗原表位。通过H7亚型禽流感病毒阳性血清,初步验证所选表位抗原性。获得了5个H7N7亚型禽流感病毒候选B细胞和Th细胞表位,经过间接ELISA方法分析,其中HA165~178,HA180~193,HA241~255表序列相对保守,与流行的H7N7亚型禽流感病毒HA相应区域具有较好的一致性,同时具有与H7型禽流感病毒阳性血清抗体结合能力,预示了其成为功能表位的可能。所筛选的表位具有成为H7N7亚型禽流感病毒HAB细胞和Th细胞相关抗原表位的可能,为H7N7亚型禽流感表位疫苗的研究奠定基础。
- 白靓金宁一成岩石毅鲁会军南文龙田明尧赵翠青张金双关铭
- 关键词:禽流感病毒血凝素抗原表位