河南省科技攻关计划(072102130019)
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
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- 包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立
- 2011年
- 以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏菌LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1 h;最适封闭条件为37℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点.
- 邓久虎许兰菊杨永珍张丹鹤苗银萍李炜
- 关键词:LPS抗体间接ELISA
- 鸡源福氏志贺氏菌的分离鉴定及药敏试验被引量:3
- 2011年
- 为了对新郑某养鸡场鸡群严重腹泻进行病原确切诊断并提供防治依据,采集病料进行了细菌分离鉴定和药敏试验.经细菌分离培养、抹片染色镜检、生化试验,初步鉴定出5株鸡源志贺氏菌.用分离菌株攻毒后的发病比例为2/5~4/5,死亡比例为1/5~3/5.由此表明5个分离菌株均具有一定的毒力.血清学试验鉴定结果表明,5个分离菌株均为鸡源福氏志贺氏菌.药敏试验结果显示,5个分离菌株对阿莫西林等12种药物具有多重耐药性,其中4个菌株对阿米卡星和氨苄/舒巴坦较敏感.
- 张丹鹤蒋媛媛许兰菊杨永珍邓久虎苗银萍
- 关键词:福氏志贺氏菌药敏试验
- 鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖的提取方法研究被引量:4
- 2010年
- 为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分别进行糖、蛋白质及核酸含量测定,结果显示,所提取纯化的LPS糖含量为27.06 mg/L,蛋白质含量为0.25 g/L,核酸含量为40.20 mg/L,鲎试剂检测具有凝集活性。上述结果表明:该试验方法能有效提取鸡鲍氏志贺氏菌LPS,提取物纯度较高,核酸及蛋白质含量较低,是提取脂多糖的一种简便快捷的方法。
- 潘国民许兰菊蒋媛媛李炜邓九虎白毅洁李欣
- 关键词:脂多糖纯化