上海市科学技术委员会资助项目(05DZ0511)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
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- 检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立被引量：7
- 2007年
- 针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2的序列设计两对特异性引物及TaqMan探针,以感PCV2的PK-15细胞培养上清的DNA提取物为模板,分别扩增499 bp和131 bp的片段,建立了检测PCV2的TaqMan荧光PCR方法。结果表明:TaqMan荧光PCR检测PCV2的最佳探针浓度为0.5 pmol·μL-1;TaqMan荧光PCR两步法操作快捷,扩增131 bp的引物PCF1101/PCR1232检测敏感性高(3.17×102拷贝·μL-1),重复性好。在诸多检测样品中,除检测到PCV2检测指标出现阳性外,猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV),日本乙型脑炎病毒(JEV),猪伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV)及PK-15细胞等检测指标均为阴性,表明特异性强;与普通PCR的检测结果(2/10)比较,本法的敏感性和对临床样品的阳性检出率(3/10)更高。上述研究表明,本方法快速、敏感、特异,具有很高的重复性,且可实时监测,能有效检测PCV2。
- 刘俊平庄金山孙志张建武陶琦袁世山
- 关键词：猪圆环病毒2型TAQMAN荧光PCR
