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广东省农业厅资助项目(2003247)

作品数：1 被引量：8H指数：1
相关作者：林彦星刘镇明耿忠海戚一达更多>>
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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学

主题

  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇圆环病毒
  • 1篇猪圆环病毒
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆及原核表...
  • 1篇核表达
  • 1篇PCV2
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇华南农业大学

作者

  • 1篇戚一达
  • 1篇耿忠海
  • 1篇刘镇明
  • 1篇林彦星

传媒

  • 1篇中国兽医学报

年份

  • 1篇2007
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
猪圆环病毒Ⅱ型ORF2截短基因的克隆及原核表达被引量：8
2007年
参照GenBank中猪圆环病毒Ⅱ型（Porcinecircovirus type 2，PCV2）的ORF2基因序列，设计合成1对引物，对PCV-2ZS株ORF2基因上含主要抗原位点的片段（ORF2-ME）进行PCR扩增，并克隆到pMD18-T Simple Vector中，进行序列测定。将重组质粒pMD—ORF2-ME的EcoR Ⅴ和Xhol Ⅰ双酶切产物插入原核表达载体pET-32a（＋），构建原核表达载体pET—ORF—ME。测序分析表明，克隆的ORF2-ME与GenBank上公布的PCV2毒株核苷酸序列同源性为99％～100％，推导的氨基酸序列同源性介于91％～100％之间。原核表达载体导入BL21（DE3）后用IPTG进行诱导表达，收集菌液进行SDS—PAGE和Western Blotting分析，结果表明ORF2-ME在BL21（DE3）中成功表达，所表达融合蛋白的相对分子质量约为40000，并能被PCV2阳性血清所识别，这就为PCV2感染诊断和抗体检测提供了依据。
林彦星孙彦伟刘镇明戚一达耿忠海
关键词：PCV2克隆
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