南通大学自然科学基金(10Z048)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 缺氧复氧对大鼠心肌微血管内皮细胞活力的影响及机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的:研究缺氧复氧对大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)活力的影响及机制。方法:培养大鼠MMECs,制作缺氧复氧模型模拟缺血再灌注损伤。随机分为4组(n=24),正常对照组(N组)不作任何处理、缺氧复氧组(HR组)、LY294002预先给药+缺氧复氧组(LY294002组)、PDTC预先给药+缺氧复氧组(PDTC组),均进行缺氧2 h复氧2 h。复氧2 h时后MTT法测定细胞活力,Hoechst染色观察凋亡细胞显微结构。结果:与N组比较,HR组细胞活力降低(P<0.01);与HR组比较,LY294002组细胞活力降低(P<0.05),PDTC组细胞活力降低(P<0.01);与LY294002组比较,PDTC组组细胞活力降低(P<0.01)。结论:缺氧复氧可导致MMECs活力明显降低;PI3K/Akt/NF-κB信号通路参与了缺氧复氧调控过程,该通路可促进MMECs活力增强。
- 张春燕陈秋萍秦毅彬
- 关键词：PI3K/AKT缺氧复氧细胞活力心肌微血管内皮细胞
- 二氮嗪预处理对大鼠缺氧-复氧心肌微血管内皮细胞FKN、p53 mRNA表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察二氮嗪预处理对大鼠缺氧-复氧(H-R)心肌微血管内皮细胞(MMECs)Fractalkine(FKN)和p53 mRNA表达的影响。方法培养SD大鼠MMECs,分为四组:正常对照组(N组)、H-R组、二氮嗪组(DZ组)、二氮嗪+mitoKATP特异性阻断剂5-羟葵酸预处理组(DZ+5-HD组)。DZ组和DZ+5-HD组分别加入二氮嗪100μmol/L、二氮嗪100μmol/L+5-羟葵酸100μmol/L预处理2 h,然后和H-R组同样进行H-R 2 h。观察凋亡细胞形态,测定细胞凋亡率和活力、RT-PCR检测FKN和p53 mRNA转录水平。结果与N组比较,H-R组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖率显著下降,p53 mRNA和FKN mRNA表达显著增强(P<0.01);与H-R组比较,DZ组细胞凋亡率显著降低,细胞增殖率显著增强(P<0.05),FKN mRNA和p53 mRNA表达显著降低(P<0.01);DZ+5-HD组取消了DZ组的作用。结论二氮嗪预处理通过抑制细胞凋亡,促使细胞增殖,下调FKN mRNA和p53 mRNA表达而实现对H-R MMECs损伤的保护。
- 何磊张靓曹苏康焕菊沈施仁
- 关键词：二氮嗪心肌微血管内皮细胞FKNP53
- PI3K/Akt在线粒体ATP敏感性钾通道开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞FKN表达中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的观察PI3K/Akt信号在线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)开放抑制缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs)fractalkine(FKN)表达中的作用。方法培养SD大鼠离体MMECs,建立缺氧复氧损伤模型24皿,随机分为4组(n=6):正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(DZ组)、LY294002+二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(LY294002+DZ组)。DZ组加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,LY294002+DZ组在加入100μmol/L LY294002预处理2h后再加入100μmol/L二氮嗪预处理2h,然后和缺氧复氧组同样进行缺氧2h、复氧2h。Hoechst染色观察凋亡细胞显微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,RT-PCR检测Akt和FKNmRNA水平,Western blotting检测Akt蛋白水平。结果与N组比较,H/R组细胞增殖率显著降低(P<0.01)、凋亡率显著升高(P<0.01),FKN mRNA和FKN蛋白表达显著增加(P<0.01)、Akt mRNA和Akt蛋白升高(P<0.05)。与H/R组比较,DZ组细胞增殖率显著升高(P<0.01)、凋亡率显著降低(P<0.01),AktmRNA和蛋白显著升高(P<0.01和P<0.05),FKN mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与DZ组比较,LY294002+DZ组Akt mRNA和蛋白显著降低(P<0.01)、FKN mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论mito-KATP开放通过PI3K/Akt信号调节下游FKN mRNA的转录及表达,促使细胞增殖,抑制细胞凋亡,实现对缺氧复氧MMECs损伤的保护。
- 陈秋萍黄赛赛周伟伟沈施仁曹苏
- 关键词：线粒体ATP敏感性钾通道心肌微血管内皮细胞FRACTALKINE缺氧复氧反转录-聚合酶链反应
