湖南省科技厅重点项目(02JTY2009)
- 作品数：5 被引量：65H指数：3
- 相关作者：刘劲芳邓永文陈风华方加胜伍军更多>>
- 相关机构：中南大学岳阳市第二人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅重点项目湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胶质瘤中肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定被引量：22
- 2005年
- 目的在胶质瘤中分离,培养及鉴定脑肿瘤干细胞,观察脑肿瘤干细胞的生长特性,建立脑肿瘤干细胞分离、培养及鉴定的方法,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法术中取胶质瘤细胞,接种于含生长因子的无血清培养基中培养,使其中的脑肿瘤干细胞增殖,并进行有限稀释实验确定肿瘤比例及增值能力;利用细胞免疫荧光及组织免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133和Nestin的表达。结果在胶质瘤中,只有大约1%的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长,并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力;体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物Nestin和CD133,在肿瘤组织切片中表达CD133阳性细胞。结论胶质瘤组织中存在极少数的脑肿瘤干细胞(大约为1%),并能在体外将其分离,培养;神经干细胞可能是脑肿瘤干细胞的起源细胞。
- 邓永文方加胜李茗初陈风华刘劲芳伍军周向阳方芳卢明陈成周仁辉曾飞跃
- 关键词：肿瘤干细胞CD133NESTIN胶质瘤
- 人类室管膜瘤中肿瘤干细胞的实验研究被引量：1
- 2007年
- 【目的】探讨人类室管膜肿瘤中肿瘤干细胞的存在及意义。【方法】术中取室管膜肿瘤组织,接种于含生长因子的无血清培养基中培养,使其中的脑肿瘤干细胞增殖,并进行有限稀释实验确定肿瘤干细胞比例及增值能力;将所得脑肿瘤干细胞接种于含血清培养基,观察其分化。利用细胞免疫荧光及组织免疫组化法检测脑肿瘤干细胞CD133的表达。【结果】在脑室管膜肿瘤中,只有大约0.82%的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长,增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球;接种于含血清培养基中后可贴壁分化。体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133。【结论】室管膜肿瘤组织中存在极少数的脑肿瘤干细胞(大约为0.82%)。
- 周仁辉方加胜邓永文陈风华刘劲芳
- 关键词：室管膜瘤肿瘤干细胞
- 重型颅脑损伤合并寰枢椎半脱位的诊断与治疗被引量：1
- 2005年
- 目的探讨重型颅脑损伤合并寰枢椎半脱位的诊断和治疗方法。方法重型颅脑损伤137例患者中合并寰枢椎半脱位者17例。每例患者均行颅脑和寰枢椎CT扫描,必要时加做寰枢椎CT三维重建或MRI检查。在积极治疗颅脑损伤同时,均予以颈围固定制动、颌枕吊带或颅环弓牵引治疗。结果17例重型颅脑损伤合并寰枢椎半脱位患者经治疗后12例神志转清,5例植物生存。2例有脊髓损伤者完全恢复。无1例因寰枢椎半脱位而导致呼吸骤停或猝死,CT复查寰枢椎结构恢复正常。结论对重型颅脑损伤患者在颅脑伤诊治的同时,应常规行寰枢椎CT检查,以明确诊断,早期治疗,能有效预防并发症,改善预后。
- 伍军王君宇邓永文陈风华霍雷刘劲芳侯永宏方加胜
- 关键词：重型颅脑损伤寰枢椎半脱位
- 神经干细胞移植治疗脊髓横断损伤的研究被引量：7
- 2005年
- 目的研究神经干细胞移植治疗对脊髓横断损伤的修复作用。方法采用成年S-D大鼠,随机分为脊髓(胸10)横断损伤对照组(n=7)和神经干细胞移植治疗组(n=7)。术后10周,感觉运动区皮质注射10%BDA示踪剂。动物再存活两周后取出相应的脑和脊髓组织,冰冻切片后,采用自由漂浮法行BDA染色显影,光镜观察。两组实验动物均于脊髓横断术后采用BBB评分法定期评估运动功能。结果神经干细胞移植治疗组所有大鼠BBB运动功能评分在横断损伤4周以后明显高于对照组(P<0.05)。BDA神经束路示踪技术研究显示神经干细胞治疗组7只中的6只大鼠在术后12周有部分BDA阳性标记的皮质脊髓束再生通过脊髓横断损伤部位,而对照组大鼠均未见再生的皮质脊髓束通过。结论在脊髓横断损伤后应用神经干细胞移植治疗,可明显改善损伤的运动功能。神经干细胞移植治疗促进了皮质脊髓束的再生并重新建立了部分神经纤维联系。BDA神经束路示踪技术为脊髓损伤后神经功能的恢复提供了解剖形态学依据。
- 伍军方方陈风华高俊伟柳浩然刘劲芳邓永文方加胜
- 关键词：神经干细胞脊髓损伤皮质脊髓束
- 髓母细胞瘤中脑肿瘤干细胞的分离培养及鉴定被引量：39
- 2006年
- 背景与目的:长期以来,脑肿瘤等实体肿瘤中是否存在肿瘤干细胞一直存在争论,最近已经有报道从胶质瘤和髓母细胞瘤等脑肿瘤及其它系统实体肿瘤中成功分离出肿瘤干细胞。本研究旨在利用简化的无血清培养基和悬浮培养方法,从人髓母细胞瘤中分离培养脑肿瘤干细胞,观察其在体外的增殖、分化,鉴定其特异性标志物CD133和Nestin的表达,验证肿瘤组织切片中CD133阳性细胞的存在,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法:术中取11例患者髓母细胞瘤组织,分离成单细胞悬液,接种于含表皮生长因子、成纤维生长因子以及B27添加剂的无血清培养基中悬浮培养,以分离其中的脑肿瘤干细胞;对其增殖形成的脑肿瘤干细胞球连续传代培养;并进行单克隆形成实验,以确定原代肿瘤组织中肿瘤干细胞的百分率,观察脑肿瘤干细胞球的形成过程。然后,将脑肿瘤干细胞球接种于含血清培养基,观察脑肿瘤干细胞的分化现象。最后,利用免疫荧光法检测脑肿瘤干细胞特异性标志物CD133和Nestin在脑肿瘤干细胞球中的表达;利用免疫组化法检测组织切片中CD133阳性细胞的分布,并计算CD133阳性细胞百分率。结果:本组11例髓母细胞瘤中均仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长、增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力。单克隆形成实验表明原代肿瘤细胞中具有单克隆形成能力的肿瘤干细胞百分率为(31.18±6.18)%。在含血清培养基中脑肿瘤干细胞发生贴壁分化,产生具有多种细胞形态的分化细胞。脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和Nestin;肿瘤组织切片中CD133阳性细胞呈巢状或散在分布,占全部肿瘤细胞的(33.06±8.57)%。结论:人髓母细胞瘤组织中存在一定量的具有自我更新和增殖能力、表达CD133和Nestin�
- 李茗初邓永文伍军陈风华刘劲芳方加胜
- 关键词：髓母细胞瘤肿瘤干细胞细胞分化CD133NESTIN
