安徽省教委自然科学基金(2005KJ343zc)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：许文华任明山陈兵许功林鲁云霞更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学附属省立医院更多>>
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- 重组人乙酰胆碱受体α亚基1-210诱导实验性自身免疫性重症肌无力模型被引量：3
- 2007年
- 目的克隆和表达人乙酰胆碱受体α亚基1-210(hAChR α1-210),并以该表达产物免疫 Lewis 鼠诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型。方法将经逆转录-PCR 扩增出的目的基因片段 AChR α1-210在大肠杆菌中诱导表达,经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和 Westernblot 鉴定表达产物为 rhAChR α1-210。将凝胶上一定剂量 rhAChR α 1-210融合蛋白与完全氟氏佐剂(CFA)充分乳化后,经皮下多点注入实验组,对照组则注入等剂量与 CFA 充分混匀乳化的空菌总蛋白。观察免疫后鼠体重的变化,并给予 Lennon 临床评分;低频重复电刺激检查电衰减反应和 ELISA法检测血清 AChR-ab 滴度作为评价造模是否成功的客观依据。结果将一定量的表达产物 rhAChRα1-210融合蛋白免疫 Lewis 鼠,并在4周后强化免疫一次。在强化免疫10 d 后实验组(n=10)部分鼠出现体重下降和肌无力,至实验结束时实验组有7只鼠 Lennon 临床评分达1级以上,对照组未见体重下降和肌无力表现。低频重复电衰减检查显示实验组3 Hz 和5 Hz 衰减率分别为13.90%±4.20%、13.20%±2.62%,对照组则为5.60%±2.06%、7.70%±2.40%,两组比较差异有统计学意义。ELISA 法检测血清 AChR-ab 滴度结果表明实验组阳性率为70%,对照组未出现阳性,两组比较差异有统计学意义。结论采用 rhAChR α1-210融合蛋白可成功诱导 EAMG 动物模型,与经典方法相比具有操作方法简单、成本较低、免疫原充足等优点。
- 许文华许功林陈兵鲁云霞任明山
- 关键词：重组融合蛋白质类
