国家自然科学基金(81173422)
- 作品数：15 被引量：109H指数：5
- 相关作者：李平赵婷婷严美花张浩军文玉敏更多>>
- 相关机构：中日友好医院北京中医药大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高糖刺激INS-1细胞DNase I表达升高对细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的:探讨脱氧核糖核酸酶I(DNase I)在高糖引起的胰岛β细胞凋亡过程中的作用。方法:实验分3组,正常组、高糖组和高糖+DNase I siRNA组。其中正常组给予含有11.1mmol/L葡萄糖浓度的培养基外,其余2组均给予葡萄糖浓度为30mmol/L的培养基。通过转染外源性DNase I siRNA,敲降高糖培养的INS-1细胞内DNase I的表达。采用Western blot检测DNase I、caspase-3蛋白表达,流式细胞仪观察细胞凋亡的变化。结果:与正常组相比,高糖可以显著增加INS-1细胞DNase I和caspase-3的蛋白表达水平(P<0.05);与高糖组相比,高糖+siRNA组DNase I敲降后显著降低高糖所引起的细胞内DNase I蛋白表达水平(P<0.05),同时也显著降低高糖所引起的细胞内caspase-3的蛋白表达水平(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,高糖明显导致细胞凋亡率升高(16.7%),而敲降DNase I后则明显减少细胞凋亡的发生(9.9%)。结论:高糖可以诱导细胞内DNase I的表达升高,从而介导胰岛β细胞的凋亡,该研究可能为胰岛β细胞凋亡的机制研究提供新的证据。
- 朱斌李平严美花赵婷婷王华
- 关键词：脱氧核糖核酸酶IΒ细胞凋亡
- MicroRNAs在肾脏纤维化中的研究进展被引量：3
- 2016年
- MicroRNAs（miRNAs）,即微小RNA,是一种内源性的非编码小分子RNA（约20~22个核苷酸）,具有高度保守性,广泛存在于植物和哺乳动物中。miRNAs通过抑制蛋白翻译或沉默相应信使RNA调控着特定基因的表达,在细胞分化、增殖、发育和功能调节方面有着重要的作用并参与机体的生理病理过程。
- 孔勤李平
- 关键词：肾脏纤维化MICRORNAS肾纤维化生理病理纤维化程度SMAD
- EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨
- 2014年
- 目的:构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞(human embryonic kidney293T,HEK293T)中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响。方法:提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系。Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响。结果:(1)两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变。(2)转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;(3)TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65mRNA表达;(4)EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒(L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5),可在HEK293T细胞中过表达。为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础。
- 费敏李平赵婷婷孙斯凡古艳婷王华张浩军杨靖
- 关键词：重组质粒NF-ΚBP65糖尿病肾病
- 福辛普利对2型糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响及肝损伤的保护作用被引量：2
- 2015年
- 目的:观察福辛普利对2型糖尿病大鼠肝脏氧化应激的影响和对肝脏的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:采用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射加高脂饲料喂养方法,建立2型糖尿病并脂肪肝动物模型。将造模成功的大鼠随机分为正常对照组、模型组、福辛普利组和二甲双胍组,比较各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)水平,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)和TG水平,并在光镜下观察各组大鼠肝组织病理形态学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、TG水平显著升高,肝匀浆中SOD、CAT、GSH-Px水平明显下降,NO和TG水平升高。与模型组相比,福辛普利组和二甲双胍组大鼠血清中ALT、AST、TG水平显著降低,肝组织匀浆中SOD、CAT、GSH-Px水平明显升高,NO、TG水平显著降低。HE染色显示福辛普利组和二甲双胍组大鼠较模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显减少,肝细胞排列基本规则。结论:福辛普利可改善2型糖尿病大鼠肝功能,减轻肝细胞脂肪变性,其作用机制可能一定程度上与增强肝组织抗氧化酶活性、清除脂质过氧化物有关。
- 李忻顾立刚赵婷婷张韫杨鑫张浩军严美花董晞赵海玲文玉敏李平
- 关键词：福辛普利2型糖尿病肝损伤氧化应激
- 肾脏病中医临床疗效评价的现状被引量：1
- 2013年
- 中医学迄今已有几千年的历史,客观存在的临床疗效是毋庸置疑的,但如何正确评价中医药的临床疗效,并建立起科学的中医临床疗效评价标准和体系已成为中医药现代化、国际化的关键。中医药临床疗效评价既要体现中医自身的规律特点,又要客观、科学的全方位反应临床疗效。目前,中医在肾病领域已初步建立既体现中医特色优势,又与现代诊疗模式相适应的临床疗效评价指标集。1基于现代化科技成果的指标中医认为＂欲知其内者,当以观乎外;诊于外者。
- 严美花李平
- 关键词：中医临床疗效评价中医药现代化肾脏病疗效评价标准疗效评价指标诊疗模式
- 糖尿病肾病ETFβ表达变化与脂毒性关系研究被引量：3
- 2015年
- 目的通过检测ETFβ在糖尿病肾病中的改变,探讨其与脂毒性的关系。方法体内实验采用腹腔注射链脲佐菌素合并单侧肾切除建立糖尿病肾病模型,并评价肾小管损伤情况,检测ETFβ在肾皮质中的表达变化。体外建立脂肪酸诱导肾小管细胞NRK 52E凋亡模型,构建ETFβ重组质粒,并将其转染至NRK 52E细胞,观察ETFβ过表达对脂肪酸诱导细胞凋亡的作用。结果链脲佐菌素合并单侧肾切除诱导的糖尿病肾病大鼠模型中,肾小管明显损伤,ETFβmRNA和蛋白表达均下降。脂肪酸可诱导NRK 52E细胞凋亡,过表达ETFβ可减少凋亡。结论糖尿病肾病模型中ETFβ表达下降,过表达ETFβ可降低脂肪酸诱导的肾小管细胞凋亡。
- 王华张浩军赵婷婷严美花董晞孙斯凡张并璇李平
- 关键词：糖尿病肾病脂肪酸凋亡
- Correlation Between sEH and Advancement of Nephropathy Diabetes and the Interference Effect of Chaihuangyishen Granule
- <正>Objective We observe the relations between the expression of sEH and kidney injury in different DN rat mode...
- Min FeiHaojun ZhangPing Li
- 文献传递
- 糖肾方减轻2型糖尿病大鼠肾脏脂质沉积的作用机制研究
- <正>目的:糖尿病肾病是糖尿病严重的微血管并发症,最新研究认为肾脏脂质沉积是疾病进展中一个重要因素。细胞外基质小分子类蛋白聚糖与低密度脂蛋白的结合是脂质在组织沉积的主要原因。复方中药糖肾方能够有效改善糖尿病肾病患者蛋白尿...
- 赵婷婷张浩军李平
- 文献传递
- NOX在糖尿病肾病氧化应激损伤过程中的作用
- 2012年
- 氧化应激是指机体活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生过多或机体抗氧化能力降低,从而导致潜在病理损伤的过程,早在1956年人们已经认识到ROS可以对老化细胞产生毒性作用[1]。ROS主要包括氧自由基和非自由基的含氧产物,如超氧阴离子(O2-)、羟自由基(OH)和过氧化氢(H2O2)等。生理状态下机体ROS的产生与抗氧化系统保持动态的平衡,适量的ROS可以杀灭细菌及清除白细胞。
- 朱斌朱斌李平张浩军
- 关键词：糖尿病肾病ENOS解偶联糖尿病性肾病肾疾病氧化应激
- 中国Alport综合征一家系的基因突变检测与临床表型分析被引量：1
- 2015年
- 目的:应用高通量测序技术,检测一个中国遗传性肾病家系的致病基因突变,探讨靶区域捕获和高通量测序方法在遗传性肾病基因筛查中的可行性。方法:收集家系临床资料和外周血样本;分析先证者的临床资料,并观察肾穿组织病理,采用目标区域捕获和高通量测序技术,对先证者355个遗传性肾病相关基因的外显子进行突变筛查;应用Sanger测序,在其他家庭成员中进行突变位点验证及突变-表型共分离分析,并对突变位点进行多物种的保守性分析。结果:结合临床检验结果和肾活检病理观察,先证者符合慢性肾小球肾炎,不排除Alport综合征的可能。基因筛查发现,该家系可确诊为X染色体显性遗传Alport综合征,家系中所有女性患者均为X染色体COL4A5基因c.3641G>A(p.Gly1214Glu)杂合突变,而男性患者均为该位点的半合子。且该位点在多个物种中具有高度的序列保守性。结论:该遗传性肾病家系是X染色体显性遗传Alport综合征,致病突变位点为COL4A5 c.3641G>A(p.Gly1214Glu)。靶区域捕获和高通量测序技术成本低、高通量、准确性高,适用于遗传性肾病家系的基因突变筛查。
- 赵海玲马亮李现成文玉敏严美花程小红李平
- 关键词：遗传性肾病ALPORT综合征高通量测序COL4A5基因
