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一种简便实用的玉米干种子基因组DNA提取方法被引量：15: 2009年; 利用改良的CTAB法提取玉米干种子基因组DNA,DNA样品经紫外光谱吸收、琼脂糖凝胶电泳、PCR和酶切检测,表明获得的DNA样品纯度较好、无明显降解,DNA质量可满足下游分子生物学实验要求,证实该方法是提取玉米基因组DNA的一种有效方法。; 魏琦超畅丽萍周岩宫俊丽王慧娟; 关键词：玉米干种子基因组DNA

影响农杆菌介导的小麦遗传转化条件的研究被引量：4: 2010年; 利用小麦成熟胚愈伤组织的高效再生体系,对影响农杆菌介导的小麦遗传转化条件:预培养时间、共培养时间、抗生素(Kan)筛选压、头抱霉素浓度、菌液浓度和侵染时间等进行了研究。最后确立的转化条件为:预培养时间为1～2d,共培养时间为3d,Kan筛选压为100mg/L,头孢霉素所用浓度500mg/L,当菌液浓度OD600=0.6浸染45min。并对得到的再生植株进行了PCR检测,初步证实了目的基因转到了小麦基因组中。; 贺杰王伟胡海燕赵俊杰校现周; 关键词：小麦农杆菌

小麦种子活力与其保护酶活性关系的研究被引量：7: 2012年; 以周麦18、百农207和百麦196种子为试验材料,通过发芽试验及种子过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的测定,来研究小麦种子活力与其酶的关系,结果显示:无论非处理与老化处理的种子,百农207的发芽率最高,周麦18次之,百麦196最低;其对应的3种酶的活性相差较大,百农207种子中各种酶的活性都高于周18和百麦196,这说明3种酶活性越高,小麦种子活力越强。; 贺杰王伟胡海燕赵俊杰张胜利魏琦超; 关键词：小麦超氧化物歧化酶过氧化氢酶过氧化物酶种子活力

利用改良CTAB法提取小麦干种子总DNA被引量：15: 2009年; 利用改良CTAB法提取小麦干种子总DNA,总DNA样品经紫外光谱吸收、琼脂糖凝胶电泳、PCR和酶切检测,证实该法是提取小麦总DNA的有效方法,其总DNA样品质量可满足下游分子生物学实验要求。; 魏琦超畅丽萍周岩王慧娟宫俊丽; 关键词：小麦干种子总DNA

小麦成熟胚再生体系影响因素的研究被引量：6: 2010年; [目的]研究小麦离体培养的影响因素,探索小麦成熟胚愈伤组织诱导、继代、分化和植株再生的有效方法,建立一套成熟的植株再生体系,为进一步转基因研究奠定基础。[方法]采用河南的5个不同小麦品种,经小麦种子消毒,无菌取胚,然后接入诱导培养基进行愈伤组织诱导,愈伤组织再经继代培养、分化培养以至小麦植株再生。通过对它们浸种时间和成熟胚离体培养过程的观察,研究了不同预处理时间和植物激素,如2,4-D、ABA、KT、IAA和NAA,对小麦成熟胚愈伤组织在诱导、继代、分化和植株再生方面的一些影响。[结果]15h的浸种时间效果好;4.0mg/L2,4-D有利于愈伤组织形成;在继代培养基中添加0.3mg/LABA有利于小麦致密愈伤组织的诱导及再生能力的保持;KT和6-BA对提高芽的分化有显著作用;附加浓度1.5mg/LNAA和0.2mg/LIAA的1/2MS培养基可有效促进生根。[结论]浸种时间、基因型对小麦愈伤组织的继代、分化和再生有很大的影响,添加一定的外源激素有利于提高其植株的再生频率。; 贺杰曹银萍胡海燕赵俊杰周岩; 关键词：小麦成熟胚愈伤组织植株再生

小麦成熟胚诱导愈伤组织研究被引量：1: 2011年; 以小麦成熟胚为外植体进行离体培养,研究不同预处理温度、消毒剂、胚的放置方式、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)浓度等因素对愈伤组织的质量和诱导率的影响。结果表明:低温预处理使愈伤组织的诱导率提高,但差别不显著;0.1%HgCl2(氯化汞)消毒处理比20%NaClO(次氯酸钠)处理效果要好;将成熟胚盾片向上放置可明显提高愈伤组织的诱导率;培养基添加2 mg/L2,4-D时,2个小麦品种愈伤组织诱导率均高达80%,但随着2,4-D浓度的升高或降低,2个品种的诱导率均呈现下降趋势,不同品种间诱导率差异不大;在继代培养基中添加0.5 mg/L 6-BA和0.3 mg/L ABA可以显著改善愈伤组织的质量,并且能提高胚性愈伤组织的产生率。; 贺杰王伟胡海燕赵俊杰周岩; 关键词：小麦成熟胚愈伤组织影响因素

N^+离子注入对萌发期小麦中POD和SOD同工酶的影响被引量：4: 2009年; 采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究N+离子注入处理后小麦种子豫麦34萌发时期根、盾片、芽、胚乳中POD和SOD同工酶的变化。结果表明:N+离子注入可引起豫麦34的不同器官中POD和SOD同工酶的酶带与酶活性的不同变化,除芽中POD和SOD同工酶活性无明显变化外,其它器官中POD和SOD同工酶均表现为活性增强。4种器官相比,根和胚乳中同工酶变化较大,盾片和芽中同工酶变化不明显。其中,根中同工酶变化更为显著,N+离子束注入处理后根中POD同工酶多了Rf值为0.47的新酶带。; 赵俊杰欧行奇周岩贺杰付远志胡海燕; 关键词：小麦 POD SOD

农杆菌介导小麦遗传转化影响因素的研究被引量：3: 2011年; 选用河南科技学院近年来选育的小麦品种百农160的成熟胚愈伤组织和农杆菌菌株LBA4404,对农杆菌介导遗传转化中农杆菌浓度、感染时间、乙酰丁香酮浓度、头孢霉素质量浓度等几个重要影响因素进行了研究,建立小麦高效转化体系。结果表明,菌液OD600=0.6,侵染时间30 min时对愈伤组织的生存和转化最有利;浓度为200μmol/L的乙酰丁香酮可显著提高抗性愈伤再生率;随着头孢霉素浓度的升高,愈伤组织出现褐化,生长缓慢,再生率低,所以在有效抑制农杆菌的浓度范围内,尽量采取较低的质量浓度。在后期的抑菌分化筛选中,在继代培养基中添加头孢霉素的质量浓度为500 mg/L,继代扩增筛选培养2个月,每10～15 d换一次培养基;而在分化培养基中添加200 mg/L头孢霉素,即可获得再生率高的抗性愈伤。最适条件下转化频率达2.36%。; 贺杰胡海燕周岩赵俊杰魏琦超; 关键词：小麦农杆菌转化头孢霉素

影响小麦成熟胚愈伤组织诱导因素的研究被引量：1: 2011年; 采用河南的5种不同品种小麦成熟胚为外植体进行愈伤组织的诱导,采用不同质量浓度梯度的5种诱导培养基和3种继代培养基,着重研究影响愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的一些因素,以挑选出较好的愈伤组织,为进一步的遗传转化研究奠定基础。结果表明:不同品种间出愈率及植株再生率差异显著,周麦18号在5个小麦品种中表现最佳,郑麦9023次之。同时还发现培养基的成份也起着重要作用,2,4-D是诱导必需的生长素,使用浓度的范围为2.0～4.0 mg/L,浓度太低时愈伤组织质量差,颜色泛白,水浸状严重,但浓度太高会降低愈伤组织的生长速度,并明显抑制器官分化;另外VB1和脯氨酸在愈伤组织诱导时也起到不可忽视作用;继代培养中ABA明显改善了愈伤组织的状态,最佳使用浓度为0.3 mg/L。; 贺杰周岩胡海燕赵俊杰魏琦超; 关键词：小麦成熟胚愈伤组织

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