国家自然科学基金(30600172)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目江苏省教育厅自然科学基金更多>>
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- 壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化被引量：2
- 2007年
- 目的建立多疣壁虎胚胎大脑皮层神经元和胶质细胞的分离、培养及纯化方法。方法分离孵化15d的多疣壁虎胚胎的大脑皮层,经胰酶消化,细胞计数后接种于培养瓶。采用差速贴壁及反复传代相结合的纯化培养方法培养胶质细胞;采用添加B27的神经元培养基培养神经元,并用免疫细胞化学方法鉴定。结果获得体外培养的壁虎GFAP阳性表达胶质细胞,4代后纯度达95%以上;采用神经元培养基,神经元生长良好,NF、MAPⅡ表达阳性,第10d纯度达95%以上。结论建立了壁虎细胞的培养方法,并获得高纯度的胶质细胞和神经元,为进一步对神经系统的深入研究提供细胞模型。
- 顾芸刘梅刘炎顾晓松
- 关键词：皮层神经元胶质细胞细胞培养多疣壁虎
- 多疣壁虎DNA含量的测定(英文)
- 2010年
- 采用流式细胞术方法测定多疣壁虎(Gekko japonicus)DNA含量(C值)。结果表明,多疣壁虎的C值为2.928 pg.C-1,计算其基因组大小约为2.86×109bp,雌性和雄性壁虎的C值分别为2.934 pg和2.923 pg。数据统计经独立样本t检验性别间无显著差异。相同方法测定了另外两种爬行动物北草晰(Takydromusseptentrionalis)和原尾壁虎(Hemidactylus bowringii)的C值,分别是(2.10±0.03)pg.C-1和(2.04±0.03)pg.C-1,并计算其基因组大小,北草晰为2.054×109bp,原尾壁虎为1.995×109bp。
- 刘炎李静顾云沈宓王勇军刘梅
- 关键词：流式细胞术多疣壁虎爬行动物
- 壁虎脊髓细胞的原代培养及形态学观察被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨壁虎脊髓细胞分离及培养方法。方法:分离壁虎脊髓,消化接种于细胞培养瓶中,采用不同渗透压、pH值、温度、消化、粘附基质的培养条件。结果:5%CO2、饱和湿度培养条件,在添加10%FBS的DMEM/F12培养基(渗透压200～260mmol/kg,pH7.2)中,获得了不同细胞类型的细胞,其中包括神经元样和胶质细胞样细胞,神经元样细胞NF染色阳性,GFAP染色阴性,而胶质样细胞GFAP染色阳性。结论:建立了壁虎脊髓细胞分离及培养方法,为壁虎脊髓再生过程中基因的研究提供细胞水平功能平台。
- 顾芸刘梅刘炎顾晓松
- 关键词：细胞原代培养传代培养壁虎
- 大鼠坐骨神经夹伤过程中腓肠肌组织Kif11和Kif15基因的表达变化被引量：1
- 2010年
- 目的:研究驱动蛋白家族成员11(kinesin family member 11,Kif11)和驱动蛋白家族成员15(kinesin familymember 15,Kif15)在大鼠失神经肌萎缩及再支配过程中的表达变化。方法:建立大鼠坐骨神经夹伤模型,测定腓肠肌湿重比了解肌萎缩程度,采用足迹实验测定坐骨神经功能指数了解神经损伤再支配恢复情况,采用Real-time PCR方法检测坐骨神经夹伤后不同时间腓肠肌组织中Kif11和Kif15 mRNA水平的表达变化。结果:在神经夹伤早期(1～7 d),腓肠肌组织中的Kif11和Kif15 mRNA迅速上升,7～14 d达到高峰,随后mRNA水平逐渐下降,至28 d时基本接近正常表达水平;同时可观察到腓肠肌湿重比及坐骨神经功能指数的恢复。结论:Kif11和Kif15 mRNA的变化与坐骨神经损伤(夹伤)引起的肌萎缩程度呈正相关。
- 巫荣华陆伟陈海姣刘梅
- 关键词：肌萎缩
