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家蚕卵黄原蛋白及其受体基因被引量：13: 2005年; 家蚕小卵突变体 (Smalleggmutant ,sm) ,其卵体积仅及正常卵的 2 / 3,不能受精而致死。因其卵母细胞不能正常吸收卵黄原蛋白 (Vg) ,人们认为其原因可能是卵黄原蛋白受体基因 (VgR)突变所致。本研究首先通过克隆筛选和基因组序列分析 ,获得了 2 5 6 4bp含有 ployA的家蚕卵黄原蛋白受体基因 (BmVgR)片段。将该基因片段的预测蛋白与其它物种的VgR/YPR和低密度脂蛋白受体 (LDLR)家族比较 ,发现该基因具有LDLR家族的基本结构特征。其次 ,经RT PCR检测 ,结果表明BmVgR在sm的不同时期的卵母细胞中都能正常转录。最后 ,分别对sm不同发育时期的体液和卵的总蛋白进行SDS PAGE分析 ,发现该突变体的卵母细胞不能正常摄取体液蛋白 (包括Vg)。综合分析 ,sm不能正常摄取Vg ,可能并不是VgR的功能异常导致。; 林英赵萍侯勇李娟龚达平孙全夏庆友向仲怀; 关键词：受体基因低密度脂蛋白受体家蚕卵卵黄原蛋白卵母细胞

与家蚕细胞凋亡相关的Caspase基因BmIce的克隆和序列分析被引量：12: 2005年; DrIce基因在果蝇的细胞调亡代谢途径中起着重要作用。采用tblastn程序将DrICE在家蚕EST数据库中进行同源性检索,检索到的EST序列进行电子延伸,根据延伸结果设计引物,用RT-PCR检测和克隆测序验证,成功地克隆到家蚕第二种Caspase基因的全长cDNA(GenBank登录号为:AY885228)。克隆的cDNA长1410bp,ORF长825bp,编码275个氨基酸残基,预测分子量为31.8kD,等电点为6.15,基因名定为BmIce。将BmIce的cD-NA与家蚕基因组序列进行比对,结果表明该基因具有6个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。BmICE在氨基酸水平上与果蝇DrICE、线虫的CED-3的一致性分别为34%和29%,在第169个氨基酸残基处具有QACRG的五肽活性位点,该活性位点是Caspase家族的典型结构。与果蝇Caspase家族聚类分析中,BmICE与果蝇中具有短的N端结构域的DrICE、DCP-1及DECAY聚为一类,根据其结构分析和聚类分析,推测家蚕BmIce基因可能参与细胞凋亡的执行作用。; 段军朱虹查幸福赵萍夏庆友; 关键词：细胞凋亡 CASPASE 家蚕

家蚕化学诱变剂及诱导突变体的筛选被引量：8: 2007年; 在家蚕Bombyx mori基因组计划完成之后,其功能基因组研究成为该领域的最重要课题。突变体是功能基因组学研究的重要材料,因此,通过人为诱导获取大量的突变系统是及其重要的手段。本研究用化学诱变剂ENU、MNU、DES、5-BU、EMS诱导处理家蚕标准品种C108,筛选获得了非滞育红卵,长圆筒茧、小茧、丝胶茧及绵茧突变体,致死突变体及无鳞毛蛾翅突变体。结果还表明:MNU、DES诱变家蚕的突变效率高,注射翅原基比腹部更方便且效果好,化学诱导雄体比雌体的效果好;在时期上,注射蛹和蛾都有诱导效果。上述突变体大多为致死性突变,推测其可能与致死性基因突变有关。同时,本研究为应用TILLING技术鉴定家蚕更多目的基因突变体提供了有效的材料。; 林英陈冬妹代方银杨瑜向仲怀夏庆友; 关键词：家蚕化学诱变剂突变体 TILLING技术

家蚕先天免疫基因Bmimd的克隆、表达及序列分析被引量：2: 2008年; 昆虫的先天免疫应答由一组基因通过级联网络调控实现。果蝇Drosophila免疫缺陷(immune deficiency,imd)基因在体液免疫信号传递途径中起着重要的作用。我们利用生物信息学方法进行电子克隆,成功地找到了imd基因在家蚕Bombyx mori中的同源体,命名为Bmimd。该基因全长1092bp,由4个外显子和3个内含子组成,开放阅读框(openreadingframe,ORF)长750bp,编码250个氨基酸,预测蛋白质分子量为28.6kD。Bmimd序列中含有一个致死结构域,经聚类分析表明该结构域与哺乳动物的受体相互作用蛋白(receptor interacting protein,RIP)相似。将该基因亚克隆到PET-50b载体进行原核表达,表达出了带有2个6×His tag和1个Nus.Tag标签的重组蛋白。Western blotting结果表明Bmimd蛋白在5龄4天家蚕的头、脂肪体、生殖腺、表皮和中肠中都有表达,但丝腺中没有检测到表达。; 张雨丽程廷才许平震黄璐琳夏庆友; 关键词：家蚕克隆先天免疫

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国家教育部博士点基金(20040625011)