国家自然科学基金(30772120)
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
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- 相关机构：北京大学第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺癌实验研究的几个热点问题及展望被引量：4
- 2011年
- 胰腺癌的发病率呈逐年上升趋势，2010年美国预计新增胰腺癌患者43140例，同年将有36800例患者死于此症，发病率与死亡率相当，在因肿瘤致死疾患中居第4位。数十年来胰腺癌相关的临床与基础研究一直为学术界研究的热点，现介绍近年来胰腺癌实验研究方面的几个热点问题。
- 杨尹默田孝东
- 关键词：胰腺癌患者发病率死亡率学术界
- 胰腺星状细胞对胰腺癌细胞增殖能力的影响及机制被引量：3
- 2011年
- 目的 观察胰腺星状细胞（PSC）对人胰腺癌细胞株增殖能力的影响,探讨其分子机制.方法 用免疫印迹实验检测成纤维细胞生长因子（FGFs）在胰腺癌细胞及PSC中的表达及分泌;噻唑蓝（MTT）比色法检测PSC细胞条件培养基（CDM）对胰腺癌细胞体外增殖的影响,以及除去FGFs之后影响的变化;MTT法检测PSC细胞CDM对Cyclopamine抑制胰腺癌细胞增殖作用的影响;体内实验观察PSC对胰腺癌细胞成瘤能力的影响.结果 PSC主要表达并分泌FGF2,而胰腺癌MIA PaCa-2和PANC-1细胞则主要表达FGF5;PSC细胞CDM刺激48 h后,胰腺癌MIA PaCa-2和PANC-1细胞体外增殖能力分别为对照组的（1.2993±0.1170）倍和（1.2447±0.0123）倍（P＜0.05）;中和CDM中FGFs后,FGFs（-）CDM对胰腺癌细胞增殖的刺激作用显著削弱;与单纯注射胰腺癌PANC-1细胞的裸鼠皮下种植瘤比较,PSC与PANC-1细胞混合注射组的平均肿瘤体积、质量均明显增加,分别由380.13 mm3和170 g增加至601.31 mm3和349 g（P＜0.05）;PSC细胞CDM处理后,Cyclopamine对胰腺癌MIA PaCa-2和PANC-1细胞的增殖抑制作用显著下降（P＜0.01）.结论 PSC在体内、体外均显著刺激胰腺癌细胞的增殖,增强其成瘤能力,其机制与PSC旁分泌FGF2作用于癌细胞相关;PSC显著降低了胰腺癌细胞对Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine治疗的敏感性.
- 田孝东陈国卫庄岩杨尹默
- 关键词：胰腺星状细胞胰腺癌成纤维细胞生长因子
- 沉默胰岛素样生长因子1类受体基因对胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响被引量：3
- 2011年
- 目的应用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术建立稳定低表达胰岛素样生长因子1类受体（IGF1R）基因的人胰腺癌Panc-1细胞株，并观察其对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法设计并合成3条针对IGF1R基因特异性的RNA干扰靶点，构建慢病毒pFU—GW-RNAi载体，经包装后转染293T细胞，获得病毒上清并测定其相应滴度；感染Panc-1细胞，通过实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）鉴定RNA干扰效率；筛选出基因沉默效率最高的慢病毒感染人胰腺癌Panc-1细胞，获得稳定转染细胞株。噻唑蓝（MTT）比色法检测干扰IGF1R后Panc-1细胞对吉西他滨敏感性的变化。裸鼠移植瘤模型检测干扰IGF1R前后体内成瘤能力及吉西他滨对移植瘤生长的抑制作用。结果在Panc—1细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株，吉西他滨对Panc-1细胞的半数抑制剂量（IC50）从（0．774±0．001）mg／L下降到（0．330±0．003）mg／L，Panc-1细胞对吉西他滨的敏感性增加了2．35倍。裸鼠移植瘤模型中，干扰IGF1R基因后皮下种植瘤生长缓慢，联合应用吉西他滨后对肿瘤生长的抑制作用进一步增加。结论慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默IGF1R基因，能显著增强胰腺癌细胞株Panc-1对吉西他滨的敏感性。
- 郝昆田孝东秦昌富杨尹默
- 关键词：吉西他滨胰腺癌慢病毒
- Hedgehog信号通路在胰腺癌发病机制中的研究进展被引量：2
- 2011年
- Hedgehog信号通路是调节动物胚胎正常发育的经典信号通路之一,主要由信号分子Hedgehog（Hh）、膜受体Patched（Ptch）、Smoothened（Smo）及某些中间信号传导分子和核转录因子Glioma-associated oncogene homolog（Gli）等组成.Hedgehog信号通路与胰腺胚胎正常发育密切相关,但在正常成熟胰腺组织中无表达或仅低表达.随着对Hedgehog信号通路研究的不断深入,发现Hedgehog信号通路传导异常可导致胰腺癌的发生,并与肿瘤侵袭、转移密切相关.该文对Hedgehog信号通路的构成、传导途径以及在胰腺癌发生中的机制进行综述.
- 郝昆谢学海杨尹默
- 关键词：HEDGEHOG信号通路胰腺癌信号转导
- Hedgehog信号蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2008年
- 目的 研究Hedgehog相关信号蛋白Ihh、Ptc和Smo在胰腺癌中的表达情况及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测54例原发性胰腺癌及5例正常胰腺石蜡标本中Hedgehog信号蛋白（Ihh、Ptc、Smo）的表达情况，并统计分析其阳性率与临床病理特征的相关性；采用Westernblot比较21例新鲜胰腺癌及癌旁胰腺组织标本Hedgehog信号蛋白表达量的差异。结果 54例胰腺癌标本中，Ihh、Ptc及Smo阳性率分别为70．4％、64．8％和88、9％，5例正常胰腺组织中均无阳性表达；Ptc阳性率与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移情况及肿瘤TNM分期显著相关，Smo表达率则与肿瘤分化程度显著相关（P〈O．05）；21例新鲜胰腺癌标本中Ihh、Ptc、Smo平均表达量均显著高于癌旁胰腺组织（P〈O．05）。结论 胰腺癌组织中Hedgehog信号蛋白表达量显著增加；Hedgehog信号蛋白与胰腺癌临床病理特征相关。
- 田孝东杨尹默汤坚强万远廉
- 关键词：胰腺肿瘤HEDGEHOGWESTERNBLOT
- Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究特异性阻断hedgehog信号通路对人胰腺癌Mia PaCa-2细胞增殖的影响。方法用Western blot方法检测7种胰腺癌细胞系中hedgehog信号蛋白表达情况，筛选出hedgehog通路活化明显的Mia PaCa-2细胞系进行研究；应用特异性hedgehog通路阻断剂KAAD-cyclopamine阻断Mia PaCa-2细胞的hedgehog信号通路，Western blot方法检测Glil蛋白表达变化；MTT法检测阻断hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响；RT-PCR方法检测胰岛素样生长因子2（IGF2）mRNA表达的变化。结果KAAD—cyclopamine处理后hedgehog信号通路中关键效应蛋白Glil表达水平明显下调（P=0．032）；KAAD-cyclopamine明显抑制胰腺癌Mia PaCa-2细胞增殖，其作用呈剂量及时间依赖性；阻断hedgehog信号通路后，胰腺癌细胞中胰岛素样生长因子2（IGF2）mRNA表达水平下调（P=0．037）。结论Hedghog信号通路异常活化参与促进胰腺癌细胞增殖；特异性阻断hedgehog信号通路后胰腺癌细胞增殖明显受抑制，其部分机制可能通过下调IGF2表达水平实现。
- 田孝东杨尹默汤坚强庄岩刘玉村万远廉
- 关键词：胰腺肿瘤信号传导HEDGEHOG
- 特异性阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞凋亡的影响及分子机制被引量：9
- 2008年
- 目的观察特异性阻断Hedgehog信号通路对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞凋亡的影响，探讨其可能的分子机制。方法应用特异性Hedgehog通路阻断剂KAAD—cyclopamine阻断MiaPaCa-2细胞的Hedgehog信号通路，噻唑蓝（MTF）法检测阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞生长情况的影响；流式细胞技术观察细胞凋亡的变化；Westernblot方法检测bax和bel-2表达的变化。结果KAAD．eyelopamine明显抑制胰腺癌MiaPaCa-2细胞生长，其作用呈剂量依赖性；阻断Hedgehog信号通路后，胰腺癌细胞凋亡显著增加，细胞中bax表达水平上调，bcl-2表达水平明显下调。结论特异性阻断Hedgehog信号通路使胰腺癌细胞生长抑制，凋亡明显增加，其机制可能为通过上调bax及下调bcl-2的表达水平实现。
- 王建军杨尹默田孝东庄岩
- 关键词：胰腺肿瘤脱噬作用信号通路
