重庆市教委科研基金(040310)
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 相关作者：易永芬郑爱华周文文倪江涛石海鹏更多>>
- 相关机构：重庆医科大学重庆市第一人民医院重庆医科大学附属第一医院更多>>
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- Maspin、P53、Skp2蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的:研究maspin、p53及skp2蛋白在结直肠肿瘤组织中的表达及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测maspin、p53及skp2在50例结直肠腺癌,20例结直肠腺瘤、20例正常结直肠粘膜组织中的表达。结果:maspin蛋白在结直肠腺瘤和正常结直肠粘膜组织中的表达均高于结直肠腺癌(P<0.05);无淋巴结转移组maspin表达率高于淋巴结转移组(P<0.05);DukesC,D期结直肠癌组织maspin表达率低于DukesA、B期(P<0.05)。在结直肠腺癌及腺瘤中maspin与p53的表达均呈负相关(P<0.01),然而在skp2与maspin、skp2与p53之间没有发现相关性(P>0.05)。结论:maspin的表达可能受p53基因的调控。联合检测maspin、p53及skp2在结直肠肿瘤中表达水平,对判定结直肠癌恶性程度及预后可能具有重要参考价值。
- 倪江涛易永芬石海鹏
- 关键词：MASPINP53SKP2结直肠肿瘤
- MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的构建MASPIN真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901的影响。方法PCR扩增MASPIN基因全长,用载体PCR2.1构建重组质粒,转染至胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR、Western blot检测MASPIN基因表达变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期,观察过表达MASPIN对SGC7901细胞株的影响。结果成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体并转染至胃癌细胞株SGC7901,转染上调了SGC7901细胞株MASPIN在mRNA、蛋白水平的表达。转染MASPIN的SGC7901细胞增殖率随时间而减慢,第24、48、72小时的细胞增殖率分别为93.07%、81.97%、66.5%,明显低于转染空载体组(95.98%、95.79%、95.59%,P<0.05)。与转染空载体组相比,过表达MASPIN的SGC7901细胞株在G0/G1期所占比例明显提高(70.3%vs55.6%),S期细胞减少(19.8%vs34.9%,P<0.05)。结论成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体,过表达MASPIN可抑制SGC7901细胞株的增殖。
- 郑爱华易永芬周文文
- 关键词：胃肿瘤SGC7901细胞MASPIN增殖
- 转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响
- 2008年
- 目的研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制。方法构建maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Westernblot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化。结果经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1。成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低。结论成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达。
- 周文文易永芬郑爱华
- 关键词：MASPIN尿激酶型纤溶酶原激活物胃癌
- MASPIN真核表达载体的构建及对胃癌细胞SGC7901的诱导凋亡作用被引量：8
- 2008年
- 背景与目的:MASPIN基因与多种恶性肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、浸润、转移和凋亡中起着十分重要的作用。本研究通过构建MASPIN基因真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901凋亡的影响。方法:构建MASPIN/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR和Western bolt检测MASPIN基因、Bax/Bcl-2基因表达变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡特征性DNA梯形带;采用AnnexinV-FIFC/PI检测凋亡率。结果:酶切证实成功构建真核表达质粒MASPIN/PCR2.1;转染重组质粒组MASPIN mRNA(33.6±1.2)和蛋白水平(23.4±1.6)的表达明显高于未处理组(13.7±2.0、12.0±1.3)和空质粒组(15.0±1.5、12.3±1.5,P<0.05);凝胶电泳观察到特征性DNA梯带;各组细胞均有凋亡率的增加且呈时间依赖性:转染重组质粒∕TRAIL作用组最高,12、24、48h分别达到8.0%、16.3%、25.8%,转染重组质粒组为3.0%、8.2%、14.4%,TRAIL作用组为4.1%、9.8%、15.9%(P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组BaxmRNA和蛋白表达(55.3±2.1、75.4±1.3)高于转染重组质粒组(34.3±1.2、40.7±1.8,P<0.05)和TRAIL作用组(43.2±1.8、36.2±1.3,P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组、转染重组质粒组、TRAIL作用组Bcl-2mRNA表达为28.3±2.5、34.3±1.2、32.8±2.1(P<0.05),蛋白表达为17.4±1.5、45.1±2.1、42.8±1.5(P<0.05)。结论:上调MASIPIN基因的表达能显著增加胃癌细胞对凋亡刺激的敏感性。其机制可能通过上调Bax,下调Bcl-2基因的表达诱导胃癌细胞凋亡。
- 郑爱华易永芬周文文
- 关键词：MASPINTRAILBAX/BCL-2凋亡
- maspin mRNA和蛋白在胃癌中的表达及意义被引量：6
- 2009年
- 目的:研究胃癌及正常胃黏膜中maspin的表达,并探讨其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化S-P法检测胃管状腺癌(30例)、胃印戒细胞癌(30例)、正常胃黏膜组织(20例)中maspin的蛋白表达水平;同时应用半定量逆转录酶链反应(RT-PCR)检测正常胃黏膜组织和胃癌组织中maspin mRNA的转录水平。结果:在胃管状腺癌、胃印戒细胞癌、正常胃黏膜组织中,maspin蛋白阳性表达率分别为50%、46.7%、90%。正常胃黏膜组织maspin mRNA相对表达量明显高于胃癌组织(P<0.01)。maspin蛋白的表达与侵润深度、淋巴结转移相关,而与肿块的大小和TNM分期无关。Maspin mRNA的水平和蛋白的表达影响胃癌的润深度、淋巴结转移,而对肿块的大小和TNM分期无影响。结论:maspin基因的蛋白和mRNA在胃癌中表达下调可能在胃癌的发生发展中起着重要的作用,maspin的表达可能对胃癌的侵润转移具有抑制作用。
- 陈爱军易永芬邓玮
- 关键词：胃癌MASPIN免疫组织化学逆转录聚合酶链反应
- 大肠腺癌中p27^(kip1)、skp2和p53基因的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的:检测大肠腺癌组织中p27kip1、skp2、p53基因的表达情况,并分析与临床病理参数之间的关系,探讨其与大肠癌发生、发展的关系。方法:应用RT-PCR技术检测60例大肠腺癌、20例正常大肠粘膜组织中p27kip1、skp2、p53mRNA的表达水平,免疫组化SP法检测60例大肠腺癌、20例大肠腺瘤、20例正常大肠粘膜组织中p27kip1、skp2、p53蛋白的表达情况。结果:大肠腺癌组织中p27kip1、skp2、p53mRNA的表达水平分别为0.540±0.155,0.597±0.125,0.302±0.127均与正常大肠粘膜组织有差异(P<0.01)。60例腺癌中p27kip1、skp2、p53的阳性表达与它们在腺瘤和正常粘膜组织中的阳性表达有显著差异(P<0.001)。p53的表达与大肠癌浸润、淋巴转移及Dukes’分期有相关性(P<0.05);p27kip1和skp2的表达与肿瘤细胞分化程度、肿瘤组织浸润深度、Dukes’分期的进展及淋巴结转移有相关性(P<0.05)。p27kip1表达与skp2表达呈负相关(r=-0.714,P<0.001),p53表达与p27kip1表达呈负相关(r=-0.653,P<0.001),而与skp2表达呈正相关(r=0.617,P<0.001)。结论:在大肠癌恶变进程中,p27kip1、skp2和p53表达发生相应变化,它们均可能参与了大肠癌发生、发展的过程,3种基因的联合检测可为临床判断大肠腺癌的恶性生物学行为提供重要参考。
- 石海鹏易永芬倪江涛
- 关键词：大肠腺癌P27KIP1SKP2基因
