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中央财政支持地方高校发展专项资金([2010]358): 作品数：11 被引量：111H指数：7; 相关作者：詹若挺陈蔚文徐晖郑润生严萍更多>>; 相关机构：广州中医药大学华润三九医药股份有限公司厦门医学高等专科学校更多>>; 发文基金：中央财政支持地方高校发展专项资金广东省科技计划工业攻关项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

10种中药材和3种食品污染赭曲霉毒素A的LC-MS/MS检测研究被引量：11: 2015年; 目的：通过优化液相色谱条件和质谱条件,并结合稀释法克服基质效应的影响,建立适用于10种中药材和3种食品污染赭曲霉毒素A（OTA）的LC-MS/MS检测方法。方法：样品经84%乙腈提取后,上清液用色谱甲醇复溶（稀释4倍）,直接上样检测;流动相采用4.0 mmol·L^-1醋酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇,经C18色谱柱分离后注入质谱仪,在选择反应监测模式（SRM）下进行正离子检测。结果：经方法学验证,赭曲霉毒素A质量浓度在25.00～50 000 ng·L^-1范围内呈现良好的线性关系,r〉0.998 7;定量限25.0 ng·L^-1;高、中、低3个浓度水平的绝对回收率89.6%～95.2%,提取回收率84.2%～100.0%;13种样品的基质效应91.5%～118.7%。将该方法应用于实际100批样品的检测,结果显示100批样品中仅有1批的检测结果呈阳性（0.7μg·kg^-1）,表明该地区这些样品中OTA的污染情况不严重。结论：本研究建立的LC-MS/MS方法具有预处理简便、经济等优点,适用于这10种中药材及3种食品污染赭曲霉毒素A的快速检测。; 郑润生肖启衍邱薇徐晖詹若挺陈蔚文; 关键词：赭曲霉毒素A 稀释法

岗梅转录组及其乌索烷型三萜皂苷生物合成相关酶基因的发掘被引量：11: 2014年; 目的:发掘与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。方法:利用Illumina测序平台对岗梅根进行转录组测序,通过基因注释、同源分析、系统发生分析等生物信息学手段,发掘可能参与合成的单基因簇(Unigenes)。结果:在岗梅根转录组中发现了272条与萜类生物合成相关的Unigenes。这其中包括72条可能参与萜类生物合成上游途径的Unigenes,以及26条可能与三萜合成途径下游母核合成、氧化和糖基化相关的Unigenes。对其中部分Unigenes进行系统发生分析,进一步揭示了这些Unigenes与同源基因间的进化关系。利用酵母表达系统,鉴定了两个香树酯醇合酶IaAS1和IaAS2,其中IaAS1为少数以α-香树脂醇为主要产物的香树酯醇合酶之一。结论:本文从岗梅根转录组数据库中发掘到一系列可能与岗梅乌索烷型三萜皂苷生物合成相关的酶基因。对这些基因的进一步研究,有助于从分子水平揭示岗梅中乌索烷型三萜皂苷的生物合成途径。; 郑夏生罗秀秀徐晖詹若挺陈蔚文; 关键词：岗梅转录组三萜皂苷生物合成基因发掘

飞龙掌血根的质量研究被引量：7: 2015年; 【目的】建立飞龙掌血根的质量标准。【方法】采用薄层色谱法（TLC）对飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素进行鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）测定飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素的含量，同时参照《中国药典》附录相关方法，测定其水分、灰分含量。【结果】 TLC法可对飞龙掌血根中氯化两面针碱和毛两面针素进行鉴别，且斑点清晰，与其他成分分离度好； HPLC测定结果显示：氯化两面针碱在2.84～42.6μg／mL，毛两面针素在25.6～384μg／mL线性关系良好，平均回收率分别为99．2％（相对标准偏差sR＝1．12％）和100％（sR＝0．71％）；水分含量为75．8～98．9 mg／g，总灰分含量为12．4～33．6 mg／g。【结论】本研究所建立的方法专属性和准确性良好，可为飞龙掌血根质量标准的建立提供实验依据。; 温羚玲郑润生许雅萍秦泽慧徐晖詹若挺陈蔚文; 关键词：薄层扫描高压液相

无患子皂苷诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用及其机制研究被引量：10: 2015年; 目的:探讨无患子皂苷对人肺癌A549细胞的影响及其可能的分子机制。方法:采用MTT法检测无患子皂苷溶液对A549细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术观察和检测细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR法检测凋亡基因bcl-2 m RNA的表达。结果:无患子皂苷能显著抑制A549细胞的增殖,且呈浓度依赖性;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术结果显示无患子皂苷可以诱导A549细胞凋亡,实时荧光定量PCR法表明不同浓度的无患子皂苷均能明显降低bcl-2的表达。结论:无患子皂苷可通过诱导细胞凋亡而抑制A549细胞增殖,其作用可能与下调细胞凋亡相关基因bcl-2的表达有关。; 王美玲胡小红; 关键词：无患子皂苷肺癌A549细胞细胞凋亡

快速液相法同时测定鸡血藤原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素的含量被引量：16: 2014年; 【目的】建立快速液相色谱法同时测定鸡血藤药材中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素含量。【方法】采用Phenomenex Kinetex XB-C18（4.6 mm×100 mm,2.6μm）色谱柱,以乙腈—磷酸—水为流动相,等度洗脱（体积比为10∶90）,流速1.3mL/min,柱温25℃,检测波长260 nm,进样体积2μL。【结果】原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的线性范围分别0.091 6～0.549 6μg（r=0.999 7）、0.772～3.86μg（r=0.999 4）、0.670 5～4.023μg（r=0.999 7）;平均加样回收率分别为102.96%（sR=1.62%）、99.44%（sR=2.68%）、97.34%（sR=1.88%）。【结论】该方法简便、快捷,可用于鸡血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量测定,可为鸡血藤的质量控制研究提供参考。; 张敏刘翠婷严萍芦进财詹若挺

Mincle受体蛋白克隆、原核表达与纯化被引量：3: 2015年; 本研究通过应用基因工程技术,构建融合基因pET14b-Mincle的原核表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白Mincle,并对其表达产物进行纯化、鉴定、透析复性。采用RT-PCR技术扩增小鼠Mincle的基因片段,将其克隆于载体pMD18-T中,并克隆到带有His-tag的原核表达载体pET14b中;重组质粒经酶切鉴定、序列比对验证正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达目的蛋白。经1mmol/LIPTG在37℃下诱导5h获得了分子量约为22kDa的重组融合蛋白的优化表达,SDS-PAGE、Western Blot和ELISA证实了重组蛋白的特异性。Mincle以包涵体形式在宿主中表达,利用Ni2+亲和柱进行纯化和生物膜透析复性,纯化和透析后的蛋白经WesternBlot、ELISA法定性鉴别以及用白色念珠菌(SC5314)整个灭活细胞对复性后蛋白的活性测定,透析后的Mincle重组融合蛋白能与白色念珠菌的特异性结合体现其生物活性,表明获得了具有活性的蛋白,为后续研究打下基础。; 严萍朱喜梅李璐林文华詹若挺唐语谦; 关键词：基因克隆纯化

苦杏仁中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的液质联用检测分析被引量：20: 2013年; 基质效应是影响液质联用定量准确性的一个重要因素，在方法学评价阶段中必不可少。该研究采用稀释法，并通过优化色谱和质谱条件，成功克服苦杏仁的基质效应对整个分析过程的干扰，建立了一种可对苦杏仁污染黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2进行大量筛查及检测的液质联用方法，与Myeosep226净化柱纯化的方法相比，具有回收率高、经济、简便的特点；对11批样品进行检测发现有2批样品的黄曲霉毒素检测结果呈阳性，其中黄曲霉毒素B，的污染水平为1．590～2．340μg·k^-1，黄曲霉毒素总量（B1＋B2＋G1＋G2）的污染水平为2．340～3．304μg·k^-1，表明苦杏仁污染黄曲霉毒素这一现象应当引起重视，并且有必要对其贮藏方式进行考察，以减少黄曲霉毒素的污染。; 郑润生徐晖王文丽詹若挺陈蔚文; 关键词：液质联用技术苦杏仁

基于近红外漫反射光谱的鸡血藤药材定性分析被引量：13: 2014年; 目的:采用近红外光谱技术对不同产地鸡血藤进行定性和真伪鉴别分析。方法:利用近红外漫反射光谱法获取不同产地鸡血藤及其混伪品的近红外光谱图,运用近红外OPUS INDENT软件对相应的光谱图进行处理并建立定性鉴别模型。结果:建立的模型能有效地鉴别不同产地鸡血藤及其混伪品。结论:近红外光漫反射光谱法能够实现对不同产地鸡血藤及其混伪品的快速无损分析,为区分不同产地鸡血藤及其混伪品提供了一个客观的评价方法。; 张敏韩正洲严萍刘海婵张洁詹若挺陈蔚文; 关键词：近红外漫反射光谱法鸡血藤

稀释法结合LC-MS/MS检测在10种中药材污染黄曲霉毒素高通量筛查中的应用研究被引量：15: 2014年; 该研究运用稀释法，克服了基质效应对10种中药材污染黄曲霉毒素B，，B：，G，，G：的液质联用检测的影响，高、中、低3个浓度水平的基质效应检测结果在80．23％～115．5％，符合准确定量的要求。为增强检测结果的特异性和准确性，研究结合保留时间窗、定量离子与定性离子的峰面积比值2个指标对83批中药材的检测进行色谱峰的辨认，并以苦杏仁为基质溶液配制的3个浓度的质控样品对检测体系的稳定性进行考察。检测结果显示医院和药店的药材污染率分别为13．89％和17．02％，其中以使君子和红枣的污染率较高。质控样品的RSD〈6．6％，表明该分析方法可用于这10种中药材的高通量的筛查和检测，具有经济、快速的优点。; 郑润生徐晖彭苑霞王文丽詹若挺陈蔚文; 关键词：中药材黄曲霉毒素真菌毒素

南药青天葵资源和分子生物学研究进展被引量：4: 2016年; 对青天葵资源和分子生物学研究进展进行综述。近年来青天葵资源和分子生物学的研究涉及青天葵原植物与生药学鉴定、人工栽培和组织培养、分子鉴定及功能基因等方面,这些技术研究内容主要包括青天葵多倍体培养、分子鉴定、遗传多样性、转录组特征及功能基因克隆等。应用现代分子生物学技术已实现了青天葵及其近缘种、混伪品的分子鉴定,全面揭示了其遗传多样性及品种间的亲缘关系;通过构建青天葵转录组数据库,促进了对该植物的生长发育和代谢调控等相关功能基因的研究。近年来青天葵资源和分子生物学研究虽已取得一定成果,但尚未能真正解决青天葵资源匮乏的关键问题。今后可利用青天葵转录组数据及其基因资源,大规模挖掘基因信息,深入研究候选基因的功能,明确青天葵生长发育过程中的基因调控网络,利用基因工程手段保护青天葵的种质资源和促进种质资源开发进程。; 陈秀珍何瑞詹若挺; 关键词：青天葵生药鉴定人工栽培分子鉴定功能基因

中央财政支持地方高校发展专项资金([2010]358)

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