国家自然科学基金(30700999)
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 相关作者：毛立军郑骏年陈家存刘彦群裴冬生更多>>
- 相关机构：徐州医学院附属医院徐州医学院东南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金徐州市科技发展基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带IL-24基因的溶瘤腺病毒诱导黑素瘤细胞凋亡被引量：4
- 2010年
- 目的探讨携带IL-24基因的溶瘤腺病毒（ZD55-IL-24）诱导人黑素瘤A375细胞凋亡的作用。方法用PCR方法鉴定ZD55-IL-24，并大量扩增、纯化和病毒滴度测定。将ZD55-IL-24感染人黑素瘤A375细胞。结晶紫染色观察细胞毒性，MTr法测定细胞存活率，Western印迹检测溶瘤腺病毒E1A、IL-24基因蛋白表达。结果PCR鉴定表明ZD55-IL-24包含IL-24基因且没有野生型腺病毒污染；结晶紫染色结果表明ZD55-IL-24对A375细胞有明显的细胞毒性效应。M1Tr法结果显示，ZD55-IL-24对A375细胞的增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性效应。Western印迹结果表明ZD55-IL-24能在A375细胞内高效表达E1A、IL-24基因。结论溶瘤腺病毒ZD55-IL-24能携带IL-24基因在黑素瘤A375细胞中高效表达，抑制细胞增殖并诱导其凋亡。
- 蒋冠刘彦群郑骏年魏志平毛立军裴冬生
- 关键词：黑色素瘤溶瘤病毒
- 溶瘤腺病毒介导RNA干扰人端粒酶逆转录酶抑制HeLa细胞生长被引量：1
- 2009年
- 目的观察表达人端粒酶逆转录酶siRNA(hTERT-siRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-TERT-siRNA对体外培养人宫颈癌HeLa细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法以溶瘤腺病毒ZD55-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒AD-TERT-siRNA和增殖缺陷腺病毒AD-EGFP作为对照组。不同滴度四种病毒分别感染HeLa细胞,结晶紫法检测细胞毒作用,MTT法测定细胞生长抑制率;RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学(ICC)法分别检测hTERT的mRNA、蛋白质及抗原表达,Western blot和ICC法分别测定腺病毒E1A蛋白及抗原表达。结果对HeLa细胞的生长抑制作用和细胞毒作用ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA和ZD55-EGFP>AD-EGFP;ZD55-TERT-siRNA和ZD55-EG-FP感染的HeLa细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA>ZD55-EGFP、AD-EGFP。结论溶瘤腺病毒介导RNA干扰hTERT能有效抑制HeLa细胞生长及hTERT基因表达。
- 刘艳华郑骏年毛立军孙方浩温儒民张宝福李望刘俊杰裴冬生
- 关键词：溶瘤腺病毒RNA干扰
- Ki67基因干扰对裸鼠人肾癌细胞移植瘤的抑制作用
- 2009年
- 目的：探讨靶向Ki67基因干扰腺病毒（Ad—Ki67）对裸鼠人肾癌移植瘤Ki-67基因表达和肿瘤生长的影响。方法：建立人肾癌移植瘤模型，瘤体内注射Ad—Ki67，定期测量肿瘤体积，激光共聚焦显微镜观察移植瘤组织Ki-67抗原表达，原位末端标记法（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡。结果：Ad—Ki67能将Ki67基因有效沉默，Ad—Ki67组和Ad—EGFP组Ketr-3细胞Ki-67抗原表达水平分别为对照组的（78．7±6．5）％、（95．4±8．6）％；与对照组细胞凋亡阳性率（10．7±2．4）％比较，Ad—Ki67、Ad—EGFP组分别为（43．7±3．6）％和（21．8＋2．5）％，表明Ad—Ki67能有效诱导肿瘤细胞凋亡；Ad—Ki67能显著抑制肿瘤的生长，接种5周后Ad—Ki67组肿瘤体积为（469．5±41．6）mm2，Ad—EGFP组为（664．3．5±47．8）mm2，PBS组为（884．9±52．5）mm2。结论：靶向Ki67基因的干扰腺病毒Ad—Ki67对裸鼠肾癌移植瘤有显著的治疗效果，为治疗肾癌提供新的平台。
- 毛立军郑骏年李望温儒民陈家存孙晓青
- 关键词：KI67基因腺病毒载体肾癌
- 转移性去势抵抗前列腺癌免疫治疗进展
- 2016年
- 目前治疗转移性去势抵抗前列腺癌（metastatic castrate-resistant prostate cancer,mCRPC）的主要策略仍然是内分泌治疗联合化疗,前列腺癌固有的免疫原性及免疫学干预能产生保护性抗肿瘤反应,使免疫治疗成为治疗mCRPC的理想选择.随着sipuleucel-T于2010年通过美国FDA批准上市,目前多种形式的免疫疗法正在进行大量的临床探索.本综述将讨论已在前列腺癌开展的Ⅲ期临床免疫疗法最新进展,主要包括树突状细胞（dendritic cells,DC）疫苗、病毒疫苗、全肿瘤细胞系疫苗和免疫抑制关卡介导的免疫治疗.
- 刘宁毛立军陈家存
- 关键词：前列腺肿瘤免疫疗法
- SATB1和MMP2在人前列腺癌中的表达及临床意义被引量：2
- 2015年
- 目的探讨特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）在人前列腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学技术检测前列腺癌和前列腺增生症组织中SATBl、MMP2基因的表达，对其与病理分级、临床分期、前列腺特异性抗原（PSA）水平、年龄之间的关联作统计学分析，并分析SATB1和MMP2两者之间的相关性。结果SATB1在前列腺癌组织中的阳性率为90．00％（54／60），而在前列腺增生组织中的阳性率为13．33％（4／30），差异有统计学意义（P〈0．01）；MMP2在前列腺癌组织中的阳性率为71．67％（43／60），而在前列腺增生组织中的阳性率为6．67％（2／30），差异有统计学意义（P〈0．01）；SATB1和MMP2在前列腺癌组织中的表达强度与前列腺癌的病理分级和临床分期及转移呈正相关（P〈0．05），而与年龄和PSA水平无关（P〉0．05）；而在有转移的前列腺癌组织中SATB1和MMP2两者之间的表达存在显著的正相关性（P〈0．01）。结论SATB1、MMP2在人前列腺癌中的高表达，可能与前列腺癌的发生、转移及临床进展密切相关。
- 曹航毛立军陈家存
- 关键词：基质金属蛋白酶2前列腺癌
- 携带IL-18基因的溶瘤腺病毒对裸鼠恶性黑素瘤移植瘤的抗肿瘤作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨携带IL-18基因的溶瘤腺病毒（ZD55-IL-18）对裸鼠恶性黑素瘤移植瘤的抗肿瘤效果。方法取A375细胞2×10^6个接种于BALB~裸鼠腋下组织内，建立裸鼠黑素瘤模型，当移植瘤体积达100-150mm，时将其随机分为3组，每组8只，分别于瘤体内注射ZD55-IL-18、Ad—IL-18和磷酸盐缓冲液（PBS）。通过定期测量肿瘤体积观察肿瘤生长抑制情况，并切取肿瘤进行HE染色，观察肿瘤细胞生长形态；激光共聚焦显微镜下观察移植瘤组织IL-18表达水平、E1A蛋白的表达情况。免疫组化检测荷瘤裸鼠肿瘤组织CD34染色标记测定的肿瘤组织微血管密度；TUNEL法检测移植瘤组织细胞凋亡情况。结果肿瘤生长曲线表明，ZD55-IL-18处理组肿瘤生长速度较PBS组明显减慢，接种44d后ZD55-IL—18组肿瘤平均体积为（1039．378±29．67）mm3，Ad—IL-18组为（2900．46±62．65）m3，PBS组为（3980．24±63．78）mm3,各组间差异有统计学意义（P〈0．01）。HE染色发现，ZD55-IL-18处理组细胞核深染，很少见核仁，显示肿瘤组织生长抑制。激光共聚焦结果表明，ZD55-IL-18处理组IL-18的表达阳性率比Ad—IL-18处理组明显增强（P〈0．01），并可以在肿瘤组织中表达E1A蛋白；免疫组化检测显示，ZD55-IL-18治疗组肿瘤微血管密度明显低于PBS组（P〈0．05）。不同处理组移植瘤细胞凋亡阳性率ZD55-IL-18处理组（86．28％±3．25％）〉Ad—IL-18处理组（43．67％±3．46％）〉PBS处理组（10．73％±2．48％），各组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论携带IL-18基因的溶瘤腺病毒ZD55—1L-18对裸鼠恶性黑素瘤移植瘤的生长及转移有抑制作用，并探讨了其可能的作用环节。
- 刘彦群杨春华毛立军裴东生魏志平郑骏年
- 关键词：白细胞介素18
- 携带白细胞介素24基因溶瘤腺病毒对膀胱癌Biu87细胞的杀伤效应被引量：5
- 2008年
- 目的观察携带人白细胞介素（IL）24基因的溶瘤腺病毒（ZD55-IL24）对膀胱癌Biu87细胞的杀伤效应。方法聚合酶链反应（PCR）鉴定溶瘤腺病毒ZD55-IL24并扩增、纯化和滴度测定。ZD55-IL24感染人膀胱癌Biu87细胞系，Western blot法检测腺病毒E1A和IL24蛋白的表达情况；原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡；通过结晶紫染色法检测细胞杀伤作用；噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活情况。结果PCR鉴定说明ZD55-IL24包含目的基因且无野生型腺病毒污染；Western blot结果表明ZD55-IL24能在肿瘤细胞内表达E1A并高效介导IL24基因在Biu87细胞中的表达；TUNEL法显示ZD55-IL24能显著诱导Biu87细胞的凋亡，ZD55-IL24、ZD55-EGFP、Ad—IL24处理的Biu87细胞凋亡率分别为（52．3±3．2）％、（26．3±2．3）％、（32．0±3．1）％。结晶紫染色结果表明ZD55-IL24对Biu87细胞有明显的杀伤作用，MTT表明用MOI=10的ZD55-IL24、ZD55-EGFP和Ad—IL24感染Biu87细胞，4d后存活率分别为（27．6±1．3）％、（48．7±2．5）％和（59．7±3．53）％。结论成功获得纯化的溶瘤腺病毒ZD55-IL24，并进一步证明ZD55-IL24可在膀胱癌细胞内选择性地增殖并诱导膀胱癌Biu87细胞的凋亡，显示出良好的抗肿瘤效果。
- 毛立军郑骏年李望刘俊杰胡薛莉史震孙方浩陈家存温儒民
- 关键词：溶瘤腺病毒IL-24膀胱癌
- 表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及抗肿瘤作用
- 2008年
- 目的观察表达白细胞介素18（IL-18）基因的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及其对Ketr-3细胞的杀伤作用。方法通过荧光显微镜观察表达绿色荧光蛋白的条件增殖腺病毒（ZD55-EGFP）在肾癌Ketr-3细胞中的感染和增殖情况。分别将表达IL-18的条件增殖腺病毒（ZD55-IL-18）及表达IL-18的普通腺病毒（Ad-IL-18）感染人肾癌Ketr-3细胞系，通过Western blot法检测病毒E1A和IL-18蛋白的表达；免疫细胞化学染色检测IL-18抗原表达；TUNEL法检测Ketr-3细胞的凋亡情况；噻唑蓝（MTT）比色法检测Ketr-3细胞存活情况。结果ZD55-EGFP能有效感染肾癌Ketr-3细胞并在其中大量增殖。Western blot检测结果发现ZD55-IL-18能在肿瘤细胞内表达E1A并有效介导IL-18表达，在病毒感染Ketr-3细胞48h后，ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18蛋白表达量分别为255．6±3．1、118．7±2．9。免疫组织化学检测显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18抗原阳性率分别为（82．4±3．2）％和（23．4±1．9）％。TNUEL检测结果显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的细胞凋亡率分别为（52．2±3．5）％和（25．5±1．9）％。病毒感染4d后，MTT检测结果显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组细胞存活率分别为（32．6±2．3）％和（73．3±2．5）％，表明ZD55-IL-18对Ketr-3细胞有显著的杀伤作用。结论ZD55-IL-18能在Ketr-3细胞中高效特异性表达IL-18基因并显示出良好的抗肿瘤作用。
- 李望郑骏年毛立军郝林郑宏祥刘俊杰裴冬生印晓星
- 关键词：肾癌腺病毒IL-18
- 骨髓间充质干细胞肿瘤靶向迁移机制
- 2016年
- 近年骨髓间充质干细胞（MSCs）在肿瘤中的作用和功能已经引起了大量关注，但在肿瘤发展过程中的作用仍存在争议，同时MSCs肿瘤靶向迁移特点是明确的，这使其作为抗癌剂的潜在运输载体有良好的研究前景。MSCs肿瘤靶向迁移机的机制目前依然不清楚，本文讨论近期关于MSCs肿瘤靶向迁移机的机制研究进展及间充质干细胞在恶性组织发展的潜在作用。
- 曹航毛立军陈家存
- 关键词：肿瘤干细胞间质干细胞
- 溶瘤腺病毒联合化疗治疗肿瘤的研究被引量：1
- 2008年
- 近年来用溶瘤腺病毒联合化疗治疗肿瘤的研究备受人们关注。肿瘤细胞对化疗药物的耐药性是目前临床上有效应用化疗方案的主要限制。溶瘤腺病毒能明显提高传统化疗对肿瘤细胞的杀伤效果，克服了传统肿瘤基因治疗中复制缺陷型腺病毒的转染效率低、靶向性差、抗癌基因表达量低的缺点。在肿瘤治疗中溶瘤腺病毒联合化疗将可能成为潜在有效的临床治疗方案。
- 蒋冠刘彦群郑骏年
- 关键词：肿瘤腺病毒科药物疗法
