国家质检总局植物病原检测专项基金
- 作品数：10 被引量：48H指数：4
- 相关作者：吴兴海陈长法邵秀玲封立平魏晓棠更多>>
- 相关机构：山东出入境检验检疫局国家质检总局湖南农业大学更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 应用复合RT-PCR同时检测烟草环斑病毒和番茄环斑病毒被引量：4
- 2006年
- 将烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus)和番茄环斑病毒(Tom ato ringspot virus)的CP基因及RNA2基因序列引物,合成特异性RT-PCR检测引物,对烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应,结果显示,感染了烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的植物组织的PCR产物均出现600 bp和470 bp特异性扩增条带,而其他病毒均未出现扩增条带,证明这两对引物具有烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的鉴定特异性。将提取的烟草环斑病毒和番茄环斑病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果显示,此体系最低可检出烟草环斑病毒和番茄环斑病毒提取的RNA模板浓度为234 pg/μl和264 pg/μl。表明,复合RT-PCR是一种可同时检测烟草环斑病毒和番茄环斑病毒的快速检测方法。
- 吴兴海陈长法张云霞邵秀铃姜玉兰
- 关键词：复合RT-PCR烟草环斑病毒番茄环斑病毒
- 玉米细菌性枯萎病菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 成功建立了玉米细菌性枯萎病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。该方法根据细菌16S rDNA序列的特异性,设计出对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变特异性探针,并对10种细菌菌株和5种植原体进行了实时荧光PCR。结果表明,只有玉米细菌性枯萎病菌产生荧光信号,而其它参考菌不产生荧光信号,检测的绝对灵敏度是14.2 fg/μl质粒DNA,比常规的PCR电泳检测高约100倍。整个检测过程只需2h,完全闭管,降低了污染的机会,无须PCR后处理。
- 漆艳香朱水芳赵文军肖启明廖晓兰
- 关键词：玉米TAQMAN探针实时荧光PCR细菌性枯萎病
- 南芥菜花叶病毒分子生物学快速检测方法的研究被引量：3
- 2007年
- 根据南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic Nepovirus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR检测引物,对南芥菜花叶病毒和非南芥菜花叶病毒的感病植物组织进行了PCR扩增反应。结果,南芥菜花叶病毒的感病植物组织的PCR产物均出现364bp的特异性扩增条带,而非南芥菜花叶病毒均未出现扩增条带,证明这对引物具有南芥菜花叶病毒鉴定特异性。将提取的南芥菜花叶病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果表明,此体系最低可检出南芥菜花叶病毒提取的RNA模板浓度为150pg/μL。
- 吴兴海邵秀玲张凤娟王英超陈长法肖西志
- 关键词：分子生物学南芥菜花叶病毒
- DHPLC及其在植物检疫工作中的应用前景被引量：2
- 2006年
- 本文介绍了变性高效液相色谱(DHPLC)技术的基本原理及影响因素,并结合植物病原鉴定技术的特点,分析了DHPLC技术在植物检疫工作中的应用前景,证明了DHPLC技术将成为一种快速、准确、高效的新型植物病原检测技术。
- 吴兴海陈长法杨伟克魏晓棠刘爱华
- 关键词：DHPLC植物检疫
- GIS及其在植物检疫中的应用研究被引量：1
- 2007年
- GIS是一种决策支持系统，吸取了计算机地图制图、计算机图形学、航空摄影测量与遥感、数字图象处理、数据库管理系统等技术的成果，具有信息系统的各种特点，已取代地图成为地理学的第三代语言。GIS由于其具有强大的空间信息管理和空间分析功能，被广泛地应用于几乎一切与空间信息相关的领域，如城市规划、军事、测绘、农业和商业等。
- 吴兴海邵秀玲王英超陈长法魏晓棠封立平
- 关键词：GIS植物检疫计算机图形学数据库管理系统决策支持系统航空摄影测量
- 利用PCR技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)被引量：7
- 2007年
- 根据玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartiisubsp.stewartii)ITS基因序列,设计并合成了特异性PCR检测引物,对玉米细菌性枯萎病菌和非玉米细菌性枯萎病菌的标准菌株进行了PCR扩增反应.结果显示,玉米细菌性枯萎病菌的PCR产物出现301 bp的特异性扩增条带,而非玉米细菌性枯萎病菌均未出现扩增条带;其PCR检测的灵敏度为612 pg/μL.因此PCR技术是一种特异、灵敏、快速检测玉米细菌性枯萎病菌的方法.
- 吴兴海杨伟克邓明俊陈长法邵秀玲梁成珠封立平
- 关键词：PCR玉米细菌性枯萎病菌
- 应用分子生物学方法快速检测烟草环斑病毒被引量：1
- 2007年
- 根据烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus)CP基因序列,设计并合成了特异性RT-PCR扩增引物,对烟草环斑病毒和非烟草环斑病毒的感病植物组织样本进行了PCR扩增反应。结果,烟草环斑病毒的感病植物组织样本的PCR产物均出现1 760 bp的特异性扩增条带,而非感病植株组织样本均未出现扩增条带,证明该合成引物具有烟草环斑病毒鉴定特异性。将提取的烟草环斑病毒总RNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果可检出烟草环斑病毒RNA模板最低浓度为234 pg/μl。研究表明,分子生物学测定具有特异性强、灵敏度高、快速准确的特点,可应用于烟草环斑病毒检疫的快速检测。
- 吴兴海陈长法张云霞邵秀铃刘爱华
- 关键词：分子生物学
- 番茄溃疡病菌的PCR-DHPLC快速检测
- 2012年
- 根据番茄溃疡病菌ITS序列,设计并合成了PCR-DHPLC检测引物,对番茄溃疡病菌及其他病菌共10个标准菌株进行了PCR-DHPLC检测。结果表明,番茄溃疡病菌的PCR-DHPLC检测图谱出现了特异性吸收峰,而其他病菌均未在相同洗脱时间出现吸收峰,说明这种方法具有检测番茄溃疡病菌的特异性。灵敏度实验结果表明,PCR-DHPLC体系与PCR-琼脂糖凝胶电泳体系的检测灵敏度一致。研究表明,PCR-DHPLC方法是一种特异、灵敏、快速的番茄溃疡病菌检测方法。
- 吴兴海陈鹏左一鸣张成标封立平魏晓棠
- 关键词：番茄溃疡病菌
- 番茄溃疡病菌实时荧光PCR快速检测方法研究被引量：10
- 2007年
- 根据番茄溃疡病菌ITS(16S^23SrDNA间隔区)基因序列,设计并合成了荧光PCR检测引物(Fan1和Fan2)及特异性检测探针(Fanprobe),对番茄溃疡病菌和非番茄溃疡病菌的标准菌株实时荧光PCR反应。结果表明,番茄溃疡病菌PCR产物出现强烈的特异杂交信号,而非番茄溃疡病菌均未出现特异荧光信号,证明这对引物及探针具有番茄溃疡病菌鉴定特异性。将番茄溃疡病菌DNA做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度,结果表明,此体系可检出52.3 fg/μL的模板。
- 吴兴海邵秀玲邓明俊陈长法厉艳梁成珠
- 关键词：番茄溃疡病菌实时荧光PCR
- 菜豆细菌性萎蔫病菌16S rDNA基因克隆及TaqMan探针实时荧光PCR检测被引量：15
- 2004年
- 将菜豆细菌性萎蔫病菌(Curtobacteriumflaccumfacienspv.flaccumfaciens)16SrDNA基因进行克隆测序,并依据此序列设计菜豆细菌性萎蔫病菌的实时荧光PCR引物和特异性探针,对所收集的样品进行了检测.结果表明,该检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等优点,只有菜豆细菌性萎蔫病菌产生荧光,其他细菌没有荧光产生.检测的灵敏度为105CFU/mL的细菌悬浮液,相对灵敏度为106CFU/mL.
- 漆艳香朱水芳肖启明
- 关键词：实时荧光PCR
