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人肝星状细胞的分离培养方法被引量：1: 2007年; HSC是细胞外基质的主要合成细胞。从人肝组织中分离培养HSC,用于中药药理研究,可以得到与人体内相接近的实验结果,从而增加实验数据的可信度。我们成功分离培养了人肝星状细胞（H-HSC）,报道如下。; 张文炜徐列明; 关键词：人肝星状细胞

转录因子MEF2对多种信号通路的调节及其生物学作用被引量：22: 2004年; 肌细胞增强因子 2 (myocyteenhancerfactor 2 ,MEF 2 )是一种特定的转录因子 .由于其涉及基因调节的不同环节及其多样的控制基因表达和功能的调节机制 ,正日益受到高度的重视 .目前发现MEF2最突出的功能是控制肌细胞分化过程中的基因转录 ,其主要作用是在骨骼肌、心肌和平滑肌的发育过程中介导细胞的分化 .MEF2作为钙依赖性调节因子 ,在神经系统的发育和分化中也发挥着重要的作用 .近来实验发现 ,MEF2可能参与肝脏纤维化的形成过程 ,是肝星状细胞 (hepaticstellatecell,HSC); 张文炜徐列明; 关键词：转录因子肝纤维化

转化生长因子β_1的c-jun氨基端激酶和p38蛋白激酶通路及其抑制剂与纤维化被引量：2: 2004年; 转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β-)是一个多功能肽类生长因子,对生长、分化、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积和免疫应答有广泛的潜在作用.TGF-β1是体内最有力的促纤维化因子之一,已表明其是多种组织纤维化发生的关键介导者.; 宋雅芳徐列明洪嘉禾; 关键词：C-JUN P38蛋白激酶组织纤维化抑制剂肽类

Traditional Chinese medicine for treatment of liver diseases: progress, challenges and opportunities被引量：33: 2014年; Traditional Chinese medicine(T CM) is commonly used in treating liver diseases worldwide, especially in China. The advantages of using TCM for treatment of liver diseases include: protecting hepatocytes, inhibiting hepatic infl ammation and antifi brosis in the liver. In this article, we introduce TCM herbal preparations from the Chinese materia medica(such as Fuzheng Huayu) that are typically used for the treatment of liver diseases. Literature surrounding the mechanisms of TCM therapy for treatment of liver diseases is presented and discussed. We propose that side effects of herbal compounds are often under-appreciated, and that more care should be taken in the prescription of potentially hepatotoxic medicines. Further, to deepen the understanding of TCM mechanisms, new techniques and methodologies must be developed. Future studies will lead to the enhancement of clinical outcomes of TCM. As complementary and alternative therapies, TCMs will play an expanding role in the future of liver disease treatment.; Chang-qing ZhaoYang ZhouJian PingLie-ming Xu; 关键词：中国传统医学肝脏疾病传统医药中医疗法

丹参酚酸B盐对人肝星状细胞内肌细胞增强因子2的影响被引量：9: 2008年; 以分离和培养的人肝星状细胞(H-HSC)为研究对象,观察H-HSC是否表达肌细胞增强因子2(MEF2)且与转化生长因子β1(TGF-β1)之间的关系,进一步探讨丹参酚酸B盐(SA-B)抗肝纤维化的作用机制,分离H-HSC后,用TGF-β1刺激培养的H-HSC,通过免疫印迹分析及分别转染含有MEF2启动子和I型胶原启动子的luciferase报道基因质粒入H-HSC,检测荧光素酶活性,观察经SA-B干预后MEF2,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及I型胶原表达的变化.结果显示H-HSC能够表达MEF2,且随H-HSC的活化而增加;经TGF-β1刺激的H-HSC内α-SMA的表达、I型胶原启动子的活性和I型胶原蛋白的生成均明显增强,同时MEF2启动子的活性和MEF2A和MEF2C的蛋白表达也明显增强;SA-B对以上这些物质的表达均有明显的抑制作用.上述结果说明MEF2参与了肝纤维化的形成,SA-B抑制H-HSC活化的作用与其抑制TGF-B1在H-HSC内的信号传导与抑制转录因子MEF2A和MEF2C的表达有关.; 张文炜毛子旭徐列明; 关键词：丹参酚酸B盐肝纤维化 TGF-Β1

丹参酚酸B盐对转化生长因子β1活化的大鼠肝星状细胞内细胞外信号调节激酶信号转导通路的抑制作用(英文)被引量：4: 2012年; 目的:探讨丹参酚酸B盐(salvianolic acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)内细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号转导通路的影响。方法:采用原位灌流酶消化及Nycodenz密度梯度离心的方法分离正常大鼠HSC,将TGF-β1和SA-B直接添加于原代HSC的无血清培养液中。蛋白印记法检测HSC内磷酸化和总ERK,以及有丝分裂原激活蛋白激酶激酶MEK、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶Raf、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:SA-B可抑制正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内ERK上游激酶MEK的磷酸化;而对正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内MEK上游激酶Raf-1的磷酸化无明显抑制。SA-B对TGF-β1刺激的HSC内α-SMA表达有明显的抑制作用,SA-B与ERK阻断剂联用,几乎接近完全阻断α-SMA的表达。SA-B对正常培养的HSC和经TGF-β1刺激的HSCⅠ型胶原蛋白的合成都有明显的抑制作用。结论:SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK信号转导通路的作用环节在于抑制了MEK的磷酸化。SA-B通过抑制TGF-β1的ERK信号转导通路,减少了因HSC活化导致的α-SMA表达和Ⅰ型胶原蛋白合成增加。; 宋雅芳吕志刚徐列明; 关键词：丹参酚酸B 肝星状细胞转化生长因子Β1 细胞外信号调节MAP激酶类

丹参酚酸B对大鼠肝星状细胞中丝裂原激活的蛋白激酶通路的抑制作用被引量：35: 2004年; 目的探讨丹参酚酸B(SA-B)对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)中丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的抑制作用。方法分离大鼠HSC,于无包被塑料培养皿中原代培养7 d,继以10-6mol/L浓度的SA-B孵育,再加10 ng/ml的转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激。以蛋白印迹法观察SA-B对TGF-β1刺激的HSC内细胞外调节的蛋白激酶(ERK)表达及其磷酸化和对HSC表面TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβpRⅡ)表达的影响,观察由此改变致HSC合成Ⅰ型胶原蛋白的变化。ELISA法测定HSC培养液中Ⅰ型胶原的含量;酶谱法观察基质金属蛋白酶2、9、13(MMP-2、MMP-9、MMP-13)的活性。结果10-6mol/L浓度的SA-B可抑制原代正常培养9 d的HSC及TGF-β1刺激的HSC中ERK1/2的磷酸化,对TβRⅠ和TβRⅡ的表达无影响。SA-B可抑制原代正常培养的HSC合成Ⅰ型胶原,抑制TGF-β1刺激的HSC Ⅰ型胶原的合成及分泌。SA-B对HSC培养液中MMP-2和MMP-13的活性无明显作用,对MMP-9活性则有明显的促进作用。结论 SA-B抑制了正常原代培养已活化的HSC和经TGF-β1刺激的HSC内ERK信号传导通路,这一抑制作用与HSC的TGF-β1受体表达无关。SA-B通过抑制TGF-β1的信号传导,减少了HSC对Ⅰ型胶原的合成与分泌,此种细胞功能的改变可能与基质金属蛋白酶的降解作用无关。; 薛冬英洪嘉禾徐列明; 关键词：丹参酚酸B 肝星状细胞信号传导通路肝纤维化

丹参酚酸B对转化生长因子β_1和血小板衍生生长因子-BB在肝星状细胞内信号传导的影响被引量：26: 2006年; 目的探讨丹参酚酸B(SA-B)抗肝纤维化作用机制。方法分离大鼠肝星状细胞(HSC),于无包被塑料培养皿中原代培养7天,继以10-6mmol/L SA-B孵育,再加10ng/ml的转化生长因子β1(TGF-β1)或血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激。以Western blot法观察SA-B对TGF-β1或PDGF-BB刺激的HSC内ERK蛋白及其磷酸化表达的影响及对TGF-β1或PDGF-BB刺激的HSC表面TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)或PDGF受体β(PDGFR-β)表达的影响。结果SA-B可抑制原代正常培养9天的HSC及TGF-β1刺激的HSC中ERK1/2的磷酸化;对正常培养的HSC和TGF-β1刺激的HSC表面TβRⅠ和TβRⅡ的表达无明显影响。SA-B抑制原代正常培养9天的HSC和经PDGF-BB刺激的HSC中PDGFR-β的表达,但对PDGF-BB刺激的HSC中ERK1/2磷酸化没有明显作用。结论SA-B抑制TGF-β1诱导的HSC内ERK信号传导通路。这一抑制作用与HSC上TβR的表达无关,也与PDGF-BB在HSC内的ERK信号传导通路无关。SA-B对PDGF-BB在HSC内的信号传导通路的抑制作用在于抑制了HSC上PDGF受体的表达。; 薛冬英洪嘉禾徐列明; 关键词：丹参酚酸B 细胞内信号传导肝星状细胞

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国家自然科学基金(30271657)

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