国家教育部博士点基金(200800231078)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：曹谊林刘瑾春刘霞刘伟周广东更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 组织工程化软骨分泌蛋白的初步蛋白质组学分析被引量：1
- 2010年
- 目的通过蛋白质组学筛选组织工程化软骨分泌的可溶性蛋白中具有软骨诱导作用的因子。方法分别培养人软骨细胞与皮肤成纤维细胞,接种到PGA上,两种细胞-材料复合物培养2周后,移至无血清培养基中培养6d,并收集所有培养液,用于差异蛋白质组学分析。结果蛋白组学分析显示有21个差异点。对其中差异最大的点作质谱分析,显示该蛋白与Col2A1异构体2最为匹配。结论用蛋白质组学方法 ,可以高通量筛选软骨细胞分泌的,与软骨分化相关的重要蛋白;Col2A1异构体2可能与软骨分化有关。
- 刘霞周广东刘伟曹谊林
- 关键词：组织工程化软骨蛋白质组学
- 组织工程化软骨分泌的可溶性因子对骨髓基质干细胞诱导作用的实验研究被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨组织工程化软骨分泌的可溶性因子是否能够单独诱导骨髓基质干细胞（bone marrow stromai cells,BMSCs）软骨分化.方法 体外培养扩增猪BMSCs、猪关节软骨细胞以及皮肤成纤维细胞,以5.0×107/ml的细胞终浓度分别接种于聚羟基乙酸/聚乳酸（PGA/PLA）支架,应用隔离池进行隔离共培养.以软骨细胞-材料复合物与BMSCs-材料复合物隔离共培养为实验组,以皮肤成纤维细胞-材料复合物与BMSCs-材料复合物隔离共培养为对照组1,以单纯BMSCs-材料复合物为对照组2.各组标本均于体外培养8周后取材,通过大体观察,组织学,以及免疫组织化学,RT-PCR等方法对新生组织进行评价.结果 隔离共培养8周后,实验组软骨细胞材料-复合物诱导的BMSCs-材料复合物形成的组织略有缩小,外观类似软骨组织,组织学检测见软骨陷窝样结构,SafraninO染色可见软骨特异性基质分泌,免疫组化显示有大量Ⅱ型胶原沉积,RT-PCR检测组织表达Ⅱ型胶原、Ⅸ型胶原、COMP、Sox9等软骨特异性基因,提示形成了较成熟软骨样组织;而对照组成纤维细胞材料复合物诱导的BMSCs-材料复合物和未经任何诱导的BMSCs-材料复合物形成的组织淡黄色,明显缩小、变薄、质地较软,组织学检测均未形成软骨陷窝样结构,主要为纤维性成分,各种软骨特异性相关检测均为阴性.结论 软骨细胞分泌的可溶性因子能够单独诱导BMSCs软骨分化,可能是软骨细胞形成的微环境中发挥诱导作用的主要因素.
- 刘霞周广东刘伟曹谊林
- 关键词：骨髓基质干细胞软骨细胞软骨形成
- 体外诱导BMSCs向软骨分化的方法研究进展被引量：5
- 2011年
- 目的全面了解目前体外诱导BMSCs向软骨分化的方法,为软骨组织工程研究提供参考。方法广泛查阅近年来有关软骨组织工程中诱导BMSCs向软骨分化的文献,并进行综合分析。结果目前BMSCs诱导成软骨方法主要是添加外源性生长因子,其中TGF-β家族被公认为最重要的诱导和调节因子。其他重要的诱导方法包括添加多种化学因子、物理因素、转基因技术和微环境诱导等方法,但这些方法仍存在诱导效率低、诱导效果不稳定的问题。结论诱导方法的进展促进了BMSCs在软骨组织工程中的应用,建立更高效、简便、安全的诱导方法仍是软骨组织工程领域重要研究课题之一。
- 刘瑾春刘霞曹谊林
- 关键词：软骨组织工程BMSCS成软骨分化
- 胰岛素铁硒传递蛋白促进组织工程软骨形成的作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究胰岛素铁硒传递蛋白(ITS)对组织工程软骨形成的影响。方法第2代猪关节软骨细胞单层培养或离心形成细胞聚集体,根据培养液不同分为2组:常规培养组(达尔伯克改良伊格尔培养基+体积分数10%胎牛血清)和ITS组(达尔伯克改良伊格尔培养基+体积分数10%胎牛血清+体积分数1%ITS),噻唑蓝(MTT)法评估2组软骨细胞增殖;细胞聚集体培养1、2、3、4周后取材,比较2组细胞聚集体大体形态、湿质量、组织学、Ⅱ型胶原(ColⅡ)免疫组织化学染色和软骨特异基因表达。结果 MTT检测显示第5、6、7天ITS组光密度值显著高于常规培养组(P<0.01);ITS组软骨细胞聚集体体积在培养3周和4周时明显大于常规培养组;ITS组湿质量培养4周时为(7.91±1.49)mg,明显高于常规培养组的(5.37±1.31)mg(P<0.05)。ITS组细胞聚集体甲苯胺蓝染色和ColⅡ免疫组织化学染色明显强于常规培养组;2组软骨特异基因SRY相关高迁移组盒子基因9、ColⅡ表达相当,ITS组Ⅹ型胶原表达减弱,核心蛋白和Ⅰ型胶原表达增强。结论 ITS通过促进软骨细胞增殖和细胞外基质分泌可更好地促进组织工程软骨形成。
- 刘瑾春康宁肖苒刘霞曹谊林
- 关键词：软骨组织工程软骨细胞
- 软骨细胞培养中细胞去分化和再分化研究进展被引量：3
- 2011年
- 软骨细胞是软骨组织工程种子细胞的一个重要来源,应用自体软骨细胞构建的组织工程软骨可以成功修复大型哺乳动物关节承重面的缺损.自体软骨细胞移植术作为一种有效和成熟的技术已开始应用于临床关节软骨缺损修复,但软骨组织中的软骨细胞数量较少,接种支架前需要进行足量的扩增才能满足修复缺损的要求.
- 刘瑾春刘霞曹谊林
- 关键词：软骨细胞培养软骨组织工程种子细胞关节软骨缺损修复再分化自体软骨细胞移植术
