青岛市自然科学基金项目(05-1-JC-91)
- 作品数：15 被引量：120H指数：5
- 相关作者：李荣贵岳文辉宋正旭黄粤马荣群更多>>
- 相关机构：青岛大学青岛市农业科学研究院山东师范大学更多>>
- 发文基金：青岛市自然科学基金项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 葡萄炭疽菌和辣椒炭疽菌rDNA-ITS区序列比较被引量：2
- 2009年
- 采用植物病原真菌核糖体基因ITS区通用引物对葡萄炭疽病和辣椒炭疽病的病原菌进行扩增,分别获得相应序列。序列比较结果表明,两者该区的序列同源性达91.27%,ITS1和ITS2区均存在差异,但ITS2区差异更丰富。
- 马荣群宋正旭黄粤李梅岳文辉
- 关键词：葡萄辣椒炭疽菌
- 辣椒炭疽病3病原核糖体基因ITS区的序列测定及分析被引量：18
- 2007年
- 辣椒炭疽病(pepper anthracnose)是辣椒生产中的主要病害之一。利用真菌核糖体内转录间隔区(internal transcribed spac-er,ITS)序列通用引物对辣椒炭疽病3病原进行扩增,分别获得其rDNA-ITS序列,序列分析结果表明,病菌的5.8S rDNA序列高度保守,而ITS区的可变性则相对较高,其中ITS1区的差异大于ITS2区的差异,说明ITS1区的变异较丰富,可考虑将该区域作为病原鉴定的PCR检测特异引物的靶序列,为今后各病菌的特异性分子鉴定提供可靠的靶标。
- 马荣群黄粤宋正旭李梅岳文辉
- 关键词：辣椒炭疽病核糖体基因ITS
- 马铃薯早疫病菌rDNA-ITS区序列分析被引量：5
- 2007年
- 采用真菌核糖体基因通用引物对马铃薯早疫病菌的rDNA ITS区域进行扩增,克隆测序其PCR产物,序列分析结果表明,马铃薯早疫病菌与链格孢属的其他几个小孢子种在该区域的同源性均为100%,不存在任何序列差异,说明rDNA ITS区域不适合作为马铃薯早疫病分子诊断的靶序列。
- 马荣群宋正旭黄粤李梅岳文辉袁铮
- 关键词：马铃薯早疫病ITS
- 实时荧光PCR技术及其在植物病害检测中的应用
- 实时荧光PCR技术较常规PCR具有特异性强、灵敏度高、快速、无污染等特点,随着该技术在各研究领域的普及,在植物病害病原检测上的应用也越来越广泛,本文概述了其原理与方法及其在植物病害检测上的应用。实时荧光PCR技术即将成为...
- 马荣群宋正旭黄粤岳文辉李梅
- 文献传递
- 马铃薯卷叶病毒CP基因的RT-PCR扩增被引量：8
- 2007年
- 根据马铃薯卷叶病毒CP基因的序列设计合成了两对特异性DNA引物,用RNA提取试剂RNAplant从感病的马铃薯叶片中提取总RNA,在3′引物引导下以总RNA为模板反转录合成cDNA第一链,然后进行PCR,分别扩增出了长627 bp和336 bp的特异性PCR产物,其大小与预期的CP基因及其部分序列一致,实现了马铃薯卷叶病毒CP基因及其片段的简便、有效的RT-PCR扩增。
- 何心凤郭宝太李广存杨煜王晓杰毕玉平
- 关键词：马铃薯卷叶病毒CP基因RT-PCR
- 累积番茄红素的大肠杆菌工程菌及其培养条件的研究被引量：3
- 2006年
- 噬夏孢欧文氏菌番茄红素合成相关基因同时克隆进表达载体pET-15b。构建pET-15bcrtIEB,将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导工程菌累积红色色素,经HPLC和吸收光谱分析,工程菌中合成的色素为番茄红素。研究了碳源、金属离子、培养温度、诱导剂浓度、诱导时间等参数对工程菌生长及色素累积的影响,确定了合适的培养条件培养基为改良LB培养基(蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、麦芽糖5g/L、MgCl20.1g/L,NaCl10g/L);起始培养温度为37℃;培养至OD600为0.6左右时加入IPTG,终浓度为0.5mmol/L,诱导温度降至30℃;诱导时间为14h。发酵完成后工程菌的生物量(干重)为3.45g/L,番茄红素的最高含量可达5.8mg/gDCW。
- 刘敏李荣贵杜桂彩范海
- 关键词：番茄红素工程菌
- 辣椒炭疽病抗性资源筛选被引量：16
- 2008年
- 以青岛当地主要致病菌辣椒红色炭疽菌为接种菌源,采用绿色成熟果期针刺接种法对73份辣椒资源进行辣椒炭疽病抗病性筛选,结果表明:7份材料表现抗病,10份材料表现耐病,其余感病,未发现对炭疽病高抗和免疫的材料,室内抗性筛选结果和田间抗性表现基本一致。
- 马荣群黄粤宋正旭李梅岳文辉
- 关键词：辣椒炭疽病抗性
- 温度及光照条件对辣椒炭疽病菌分生孢子产生的影响被引量：3
- 2007年
- 通过温度及光照处理,研究了辣椒炭疽菌(Gloeosprium piperatum)在PDA培养基上的最佳产孢条件。结果表明,25℃左右菌丝生长旺盛,30℃有利于其分生孢子的产生。光暗条件对菌落的直径影响不大,而光照条件则有利于分生孢子的产生。
- 马荣群岳文辉宋正旭黄粤李梅
- 关键词：温度光照辣椒炭疽菌分生孢子
- 噬夏孢欧文氏菌crtY基因在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化被引量：2
- 2007年
- 噬夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)可以累积类胡萝卜素,合成过程涉及的一系列反应都是在相关酶的催化下完成的,其中番茄红素环化酶由基因crtY编码,催化由番茄红素转化为β-胡萝卜素的酶促反应。本研究以噬夏孢欧文氏菌基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增获得crtY基因,测序正确后克隆进表达载体pET-15b,构建表达质粒pET-15b-crtY,重组质粒转化E．coli BL21(DE3),构建工程菌,经IPTG诱导后,重组番茄红素环化酶在大肠杆菌中实现了高效表达,通过镍离子树脂亲和层析和Superdex 75凝胶过滤层析,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌番茄红素环化酶,该蛋白体外具有催化番茄红素转化为β-胡萝卜素的活性。
- 李丽吴柘郭道森汪靖超李荣贵
- 关键词：ERWINIA纯化活性
- 马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因酿酒酵母表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 以重组质粒pBAD-LRCP-126为模板,经PCR扩增获得了PLRV缺失突变CP基因的特异性条带。目的片段与pYES2.1/V5-His/-TOPO的连接产物转化大肠杆菌TOP10F′获得了氨苄青霉素抗性菌落,酶切与DNA测序结果确认了酵母表达载体的正确性,该表达载体命名为pYES-LRCP-126。在30℃,酿酒酵母工程菌株INVSc1(pYES-LRCP-126)经2%半乳糖诱导培养16h,SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条23kDa的诱导表达的蛋白条带,其大小与预期的重组CP大小相符,表明PLRV缺失突变基因在酵母菌中实现了表达。
- 左玉玲王晓杰樊连梅王晶珊郭宝太
- 关键词：马铃薯卷叶病毒CP基因缺失突变酿酒酵母
