国家自然科学基金(30271678)
- 作品数：11 被引量：86H指数：7
- 相关作者：田道法何迎春刘书静江洁琼贺安意更多>>
- 相关机构：湖南中医学院湖南中医药大学湖南中医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学杰出青年基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 黄芪、黄连复方有效成分对二亚硝基哌嗪诱导气虚状态大鼠鼻咽上皮组织癌前病变的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察二亚硝基哌嗪在正常状态和气虚状态大鼠鼻咽上皮细胞的诱癌效率差异以及黄芪、黄连复方有效成分的防护作用。方法SD大鼠每日力竭游泳10min,连续30d以建立气虚状态模型,然后分组,每组动物10只。DNP皮下注射法诱癌,并应用黄芪、黄连复方有效成分进行干预。干预完成后200天,分别取各组动物鼻咽黏膜行常规病理组织学和超微病理观察。结果力竭游泳联合DNP诱癌组动物中,鼻咽黏膜上皮细胞出现癌前病变例数(n1=8)显著多于单纯DNP诱癌组(n2=3,P<0.05),而应用益气解毒中药干预后,该类动物鼻咽黏膜上皮细胞癌前病变例数显著降低(n3=3,P<0.05)。结论气虚状态下,实验动物鼻咽黏膜上皮细胞对DNP诱癌效应更加敏感,而黄芪、黄连复方活性成分能够有效阻逆该类病理过程。
- 杨明陈学东田道法
- 关键词：鼻咽癌
- 鼻咽癌中医辨证分型与预后相关性基因活性表达关系的初步研究被引量：15
- 2005年
- 目的 探讨鼻咽癌辨证分型与其原发灶癌组织中预后相关性基因活性表达的关系及其对患者预后的意义。方法对60例初诊鼻咽癌患者进行辨证分型,并检测其鼻咽活检标本nm23-H1、VEGF(voscular endoth-elial growth factor,血管内皮生长因子)基因表达活性,并于治疗后随访5年,分析其预后相关性。结果 辨证分型结果,气阴两虚型患者30例(50.0％),气血凝结型18例(30.0％),火毒困结型12例(20.0％)。气阴两虚型组鼻咽活检标本的nm23基因表达阳性率50.0％,VEGF基因表达阳性率70.0％,分别明显低于或高于其他两组(P<0.05),且其5年存活率低,累计复发率高。结论 初诊鼻咽癌气阴两虚证患者nm23-H1活性表达下调,vEGF活性表达上调,预后不良。
- 刘书静田道法李东芳
- 关键词：鼻咽癌活性表达预后气阴两虚型VEGF基因
- 重组质粒pLMP1-p53mt在人鼻咽癌HNE1和人宫颈癌HeLa细胞中的表达分析被引量：8
- 2006年
- 目的:研究重组质粒pLMP1-p53mt中EB病毒LMP1基因和突变型p53(p53mt)基因在HNE1和HeLa细胞中的体外表达。方法:体外培养人鼻咽癌细胞株HNE1和人宫颈癌细胞株HeLa,采用脂质体lipofectAMINETM2000介导将重组质粒pLMP1-p53mtDNA转染细胞,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Sourthernblot法分析p53mt基因和LMP1基因的表达情况。结果:经重组质粒pLMP1-p53mt转染的HNE1和HeLa细胞中检测到了p53mt基因和LMP1基因的表达。结论:重组质粒pLMP1-p53mt的LMP1基因和p53mt基因能分别在EDL-2启动子和CMV启动子控制下表达。该质粒可进一步用于转基因动物的制备和基因功能研究。
- 何迎春田道法贺安意江洁琼刘宇勤
- 关键词：质粒细胞
- 转基因雄性小鼠不育原因分析被引量：2
- 2006年
- 目的研究转基因雄性小鼠不育的主要原因。方法以野生型C57BL/6J作为对照,比较检测健康性成熟雄性转基因小鼠的睾丸、附睾、前列腺、提肛肌的脏器系数和精子数、精子活动度、活精率、精子畸形率;观察睾丸组织病理学变化及睾丸组织葡萄-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH-X)及琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果与正常非转基因对照鼠相比,转基因鼠睾丸的脏器系数与正常对照鼠相接近,附睾、提肛肌的脏器系数显著降低,精子数、直线运动精子数显著降低(P<0.01);转基因鼠睾丸组织曲细精管变薄,生精细胞排列不整齐,层次减少(2层),上皮部分有变性,精原细胞、初级精母细胞分裂异常,精子形成减少;G-6-PD、LDH、LDH-X及SDH的活性均显著低于对照鼠。结论外源基因整合后,引起睾丸组织酶活性下降,影响各细胞的生理、生化功能,进而引起睾丸发育严重障碍,精子减少和活动能力降低而导致不育。
- 何迎春田道法江志超刘宇勤江洁琼贺安意
- 关键词：转基因精子
- 人突变型p53和EB病毒LMP1转基因小鼠的建立被引量：19
- 2006年
- 目的:建立含突变型p53和EB病毒LMP1基因的双转基因小鼠模型,为研究突变型p53和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌前病变中的交互作用提供有力的工具.方法:通过分子克隆技术构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;采用显微注射法将线性化的表达载体注射至小鼠受精卵的雄性原核中,然后将注射存活的受精卵植入假孕母鼠的输卵管;取其产3wk龄子代鼠进行PCR初选,再通过Southern杂交进一步确证;利用HE染色法观察4mo龄转基因小鼠不同组织病理变化.结果:将转基因载体进行了707枚小鼠受精卵的显微注射,然后植入30只假孕母鼠的输卵管中,其中26只母鼠怀孕,移植成功率为86.67%;共出生子代鼠179只;PCR检测显示179只子代小鼠中有9只整合了p53mt和LMP1基因,转基因阳性小鼠比例为5.03%(9/179),Southern杂交结果进一步证实了9只基因组整合了外源基因的首建者小鼠;随机抽取其中的1只转基因阳性小鼠鼻腔黏膜、鼻咽、食管表现炎症,鼻咽黏膜上皮灶性增生.结论:成功建立整合人突变型p53和LMP1的转基因小鼠,且表现鼻咽黏膜上皮灶性增生,可为鼻咽癌前病变机制的研究提供手段.
- 何迎春田道法卢芳国毛积芳
- 关键词：突变型P53基因LMP1基因鼻咽癌前病变转基因小鼠
- 中医药调节肿瘤细胞信号传导的研究进展
- 2006年
- 成细华田道法
- 关键词：肿瘤细胞信号传导中药调节
- 益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞株HNE1凋亡诱导活力的研究被引量：10
- 2007年
- 目的从益气解毒颗粒对体外培养的人鼻咽癌细胞株HNE1的细胞凋亡诱导活力角度探讨该方的抑癌机制。方法采用流式细胞术和免疫细胞化学法比较观察益气解毒颗粒原方及其拆方药物血清对体外培养的HNE1细胞凋亡诱导活力差异。结果益气解毒颗粒原方15%药物血清对HNE1的细胞凋亡诱导效应最为明显,48小时显示细胞凋亡指数13.69±0.26,且具有时间和药物浓度双重依赖性的特点,而在增强p53表达效应上,则以原方和益气组最为明显。结论益气解毒颗粒诱导鼻咽癌细胞凋亡主要是通过其益气组的功效而得以发挥,其机制之一可能是通过对p53的表达上调而实现的。
- 胡彬雅田道法任基浩
- 关键词：鼻咽肿瘤中草药
- 益气解毒颗粒对HNE3细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：18
- 2005年
- 目的观察益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞HNE3及其裸鼠移植瘤的抑制作用。方法益气解毒颗粒作用于HNE3细胞、宫颈癌细胞及其裸鼠移植瘤,分别进行体外抑瘤试验(包括IC50测定)和体内抑瘤试验。先行体外实验测定益气解毒颗粒对癌细胞半抑制浓度及其杀伤效力,再行体内实验,观察益气解毒颗粒对荷瘤裸鼠HNE3移植瘤的抑瘤效应,并以人宫颈癌细胞HeLa移植瘤和荷瘤模型动物作对照。结果益气解毒颗粒对HNE3细胞的半抑制浓度为0.037mg/mL,并显示了明显的体外杀伤效应和细胞凋亡诱导效应。在体内抑瘤实验中,益气解毒颗粒对HNE3移植瘤的抑瘤率为74.7%,伴有细胞增殖速度、成瘤能力的明显抑制,同时提高细胞分化能力,降低肿瘤的侵袭力。结论益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞HNE3具有明显抑制作用。
- 杜可田道法
- 关键词：益气解毒颗粒扶正祛邪裸鼠
- 肿瘤转移与细胞免疫及中药的干预被引量：8
- 2005年
- 刘书静田道法
- 关键词：肿瘤转移细胞免疫中药
- 转基因技术在鼻咽上皮细胞癌变中医病机研究中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的 探讨利用转基因技术研究鼻咽上皮细胞癌变中医病机的可行性及相关实践问题。方法 从鼻咽上皮细胞癌变的“气虚染毒”病机假说出发，通过分析其可能的相关性现代生物学基础和代表性指向基因，选取目的基因，显微注射法制备转基因小鼠，反复筛选，建立鼻咽癌前痛变纯系转基因小鼠模型，并以“益气解毒”法进行干预试验。反证模型动物的可靠性。结果 鼻咽癌“气虚染毒”中医病机假说的“气虚”部分与遗传背景有关，“染毒”部分与EB病毒感染活性有关，其可能的相关代表性指向基因分别为体细胞抑癌基因p53和EB病毒瘤基因LMP1。于C57BL／6J♀×CBA♂小鼠转入p53mt和EB病毒LMP1，经反复筛选，获得纯系转p53mt-LMP1基因小鼠品系，鼻咽、鼻腔耻膜等组织的目的基因表迭活性很高，并出现明显的上皮细胞异型性改变，显示了癌变发展趋势。经“益气解毒”中药的干预治疗，上皮细胞的异型性改变发展趋势出现抑制或逆转。结论 鼻咽上皮细胞癌变的“气虚染毒”病机假说具有特定的生物学基础。“气虚”状态由遗传因素决定，“染毒”之变由EB病毒瘤基因LMP1引起。“益气解毒”中药干预能够在很大程度上逆转由该病机诱发的鼻咽上皮细胞癌变进程。
- 田道法何迎春
- 关键词：益气解毒转基因
