国家自然科学基金(30700959)
- 作品数：6 被引量：22H指数：3
- 相关作者：巢永烈陈新民朱庆党杨艳丽侯睿更多>>
- 相关机构：四川大学浙江大学医学院附属口腔医院上海市徐汇区牙病防治所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 机械应力对人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达的调节被引量：4
- 2008年
- 目的观察机械力刺激对人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达的影响。方法用Forcel四点弯曲加载装置通过对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别施加不同动态张、压应力(强度为1000、2000、4000μstrain,加力时间为0、0.5、1、4、8、12h),采用实时荧光定量PCR法研究机械力对人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达的影响。结果施加动态的张、压应力后,人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达量下调,这种下调变化与所施加应力的性质、大小和作用持续时间相关。人牙周膜成纤维细胞整合素β1对张、压应力刺激的感应不完全一致,机械力刺激越强,整合素β1表达越明显。结论动态张、压应力刺激在本实验提供的微应力范围内可以促进目的基因mRNA表达改变,不同的机械力对细胞整合素β1效应不同。
- 朱庆党巢永烈陈新民赵鹃
- 关键词：人牙周膜成纤维细胞压应力整合素Β1
- 张应力刺激下人牙周膜成纤维细胞纤连蛋白、整合素、细胞骨架的变化被引量：5
- 2010年
- 目的:研究不同动态张应力刺激下体外培养的人牙周膜成纤维细胞纤连蛋白、整合素β1和细胞骨架的变化。方法:刮取牙根中1/3牙周膜组织,采用Ⅰ型胶原酶消化结合组织块贴附法进行人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)原代培养并传代。用四点弯曲加载装置,通过对体外培养的hPDLF分别施加不同动态的张应力,采用实时荧光定量PCR法研究机械力对人牙周膜成纤维细胞纤连蛋白和整合素β1亚单位mRNA表达的影响。经荧光倒置显微镜观察施加不同动态张应力后细胞形态的变化。采用SPSS13.0软件包对荧光定量PCR所得数据取常用对数后行ANOVA分析。结果:张应力的大小及加力时间都对hPDLF纤连蛋白mRNA表达产生影响。加力后,hPDLF整合素β1亚单位mRNA表达下调,这种下调变化与所施加应力大小和作用持续时间相关。机械力刺激越强,整合素β1表达越明显。加力后,细胞骨架形态发生变化。加力前呈梭形,排列呈漩涡状,F-actin纤维粗且分布均匀;加力后,形态不规则,沿力的方向排列整齐,F-actin纤维细且分布不均匀;加力12h后,形态恢复到加力前形态,细胞F-actin荧光染色强度也由正常到下降再到正常。结论:动态张应力刺激在本实验提供的微应力范围内可以促进纤连蛋白、整合素β1mRNA表达改变,hPDLF细胞骨架的形态结构也发生一定规律的变化。
- 朱庆党刘丽杨艳丽
- 关键词：牙周膜成纤维细胞纤连蛋白整合素细胞骨架
- 体外不同动态力学应变对人牙周膜成纤维细胞增殖和功能活性的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)在动态力学微应变范围内细胞增殖和功能活性的变化。方法采用四点弯曲细胞力学加载装置对体外培养的HPDLF进行加载,通过流式细胞术(FCM)分析细胞周期的改变和定量分析细胞总蛋白含量和碱性磷酸酶(ALP)活性,研究不同作用方式、大小和时间的动态力学应变对细胞增殖和功能活性的影响。结果加载装置所产生的动态力学微应变范围对HPDLF的G0/G1期、S期细胞百分比、增殖指数PI、总蛋白含量及ALP活性产生明显的影响(P<0.05),其中G0/G1期细胞百分比减少,S期细胞百分比、PI、总蛋白含量及ALP活性增高,且此影响均与应变的大小和作用时间密切相关;动态力学应变加载方式的不同对HPDLF的G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分比、PI、总蛋白含量及ALP活性均有明显的影响(P<0.05),梯度加载组的促增殖和对总蛋白含量及ALP活性的上调作用均明显高于1000、4000μstrain两组。结论HPDLF细胞增殖和功能活性增加与动态力学应变的作用方式、应变大小、作用时间密切相关。
- 侯睿陈新民巢永烈吴珺华
- 关键词：牙周膜成纤维细胞细胞增殖碱性磷酸酶流式细胞术
- 体外不同动态力学应变对人牙周膜成纤维细胞整合素α5、α6及β1的表达影响
- 2010年
- 目的:探讨体外培养的人牙周膜成纤维细胞(HP-DLF)在动态力学微应变范围内细胞膜表面整合素α5、α6、β1表达变化。方法:采用四点弯曲细胞力学加载装置对体外培养的HPDLF进行加载,通过流式细胞术(FCM)分析不同动态力学应变对HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表达的影响。结果:未加力条件下体外培养的HPDLF膜表面同时有整合素α5、α6、β1亚单位的表达;且β1的表达量最高,α5次之,α6较低;不同大小应变组和不同作用时间组的细胞膜表面整合素α5、α6、β1表达量之间均存在统计学差异(P<0.01),动态力学应变引起了HPDLF膜表面整合素α5、α6、β1表达的上调,此影响与应变的大小和作用时间密切相关;在不同亚单位间存在一定的相关性和差异性。结论:动态力学应变作用下整合素α5、α6、β1亚单位表达的上调,提示整合素β1亚族(特别是αβ亚单位结合体-α5β1和α6β1)可能在HP-DLF的力学信号转导中具有重要的调控作用。
- 侯睿陈新民巢永烈李小玉
- 关键词：牙周膜成纤维细胞流式细胞术整合素
- 应力对人牙周膜成纤维细胞Ⅰ型胶原和纤连蛋白mRNA表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的 探讨机械应力下人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts，hPDLF）Ⅰ型胶原和纤连蛋白mRNA表达的变化，为阐明力信号的细胞内转导机制提供依据。方法对体外培养的hPDLF分别施加不同动态张、压应力（强度为1000、2000、4000μstrain，加力时间为0、0．5、1、4、8、12h），定量聚合酶链反应（PCR）检测Ⅰ型胶原和纤连蛋白mRNA表达。结果随时间延长1000μstrain张应力和压应力均使Ⅰ型胶原和纤连蛋白mRNA表达增强，2000恤strain和4000μstrain张应力均使Ⅰ型胶原mRNA表达先增强1h后减弱，而2000μstrain和4000μstrain压应力均使Ⅰ型胶原mRNA表达持续减弱，2000μstrain张应力和压应力均使纤连蛋白mRNA表达持续增强，而4000μLstrain张应力和压应力均使纤连蛋白mRNA表达先增强4h后减弱。结论本项实验提供的应力范围内动态张应力和压应力刺激可改变hPDLF Ⅰ型胶原和纤连蛋白mRNA的表达。
- 朱庆党巢永烈陈新民胡军
- 关键词：成纤维细胞应力纤连蛋白类
- 动态张、压应力刺激下人牙周膜成纤维细胞细胞骨架变化被引量：11
- 2008年
- 目的:观察不同动态张、压应力刺激下人牙周膜成纤维细胞细胞骨架的变化。方法:用Forcel四点弯曲加载装置对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别施加不同动态的张、压应力(强度为1000、2000、4000μstrain,加力时间为0、1、2、4、8、12h),经荧光倒置显微镜观察施加不同动态张、压应力后细胞形态变化,细胞骨架荧光染色强度测定分析细胞骨架F-actin表达量的变化。结果:加力后细胞骨架形态和微丝蛋白发生规律性变化;细胞F-actin荧光染色强度正常→下降→正常;细胞骨架对张、压应力作用的反应敏感程度无明显差异。结论:在一定的张、压应力范围内人牙周膜成纤维细胞细胞骨架的形态结构具有一定的稳定性。
- 朱庆党巢永烈陈新民杨艳丽
- 关键词：人牙周膜成纤维细胞压应力细胞骨架
