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大鼠髁突软骨细胞双向电泳图谱的比较被引量：1: 2010年; 目的：探讨大鼠髁突软骨细胞的双向电泳方法,比较不同染色方法的图谱,以助于对髁突软骨细胞进行蛋白质组学研究。方法：取第3代大鼠髁突软骨细胞,提取细胞总蛋白质,进行不同pH宽度的双向电泳,对蛋白质定量、样品溶解、聚焦时间、二向平衡时间进行探讨,并比较银染（silver）和改良考马斯亮蓝染色法（coomassi blue-silver）对图谱的影响,对获得的图谱进行Pdquest（Version 7.1）图像分析。结果：采用Bio-Rad标准方法进行双向电泳获得理想的2-DE图谱。大鼠髁突软骨细胞蛋白质大多集中在pH4~7范围。在窄范围的pH4～7分离后,蛋白质点分散。考马斯亮蓝染色检测到（1203±86）个蛋白质点,银染色检测到（1769±97）个蛋白质点。与改良的考马斯亮蓝染色比较,银染能更好地显示低丰度蛋白质,但背景加深。结论：大鼠髁突软骨细胞蛋白质的双向电泳方法可靠,结果较为满意,丰富了蛋白质组学数据库,为颞下颌关节的深入研究提供了可靠的实验依据;考马斯亮蓝染色蛋白质点清晰,背景干净,更利于后续的质谱鉴定。; 吴拓江李煌马巧玲王文梅; 关键词：髁突软骨细胞双向凝胶电泳

体外周期性单轴压应力作用下大鼠髁突软骨细胞肌动蛋白和中间丝波形蛋白的早期变化研究被引量：6: 2007年; 目的探讨体外周期性单轴压应力对大鼠髁突软骨细胞细胞骨架蛋白肌动蛋白(Actin)和中间丝波形蛋白(Vimentin)的早期影响。方法利用四点弯曲加力装置对第3代大鼠髁突软骨细胞进行周期性单轴压应力加载,力值为4000μstrain,时间为15、30、60、120、240min。同时设有不加力的对照组。采用免疫荧光技术和Westernblot免疫印迹技术研究大鼠髁突软骨细胞在周期性单轴压应力作用下Actin和Vimentin的早期动态变化。结果在4000μstrain压应力作用下,细胞骨架荧光逐渐下调,60min表达最低,但120min后细胞骨架的荧光表达逐渐恢复。Vimentin蛋白表达水平在30min开始下降,Actin蛋白表达在60min明显下调,几乎消失;但120min后两种蛋白表达水平开始迅速回升。结论4000μstrain压应力刺激对大鼠髁突软骨细胞Actin、Vimentin蛋白的表达存在时间效应性,表现为先下调后反馈增强的趋势,提示细胞对力学刺激的反应存在"自我调控保护"的机制。; 李煌李松吴拓江徐芸陈扬熙; 关键词：压应力髁突软骨细胞肌动蛋白

不对称性颌间牵引对成年SD大鼠髁突胶原成熟和钙盐沉积的影响: 2010年; 目的:通过观察不对称牵引引起的成年SD大鼠髁突软骨下骨的成骨活性变化,了解关节外不对称机械应力对髁突的影响。方法:选用10周龄雄性SD大鼠20只(随机分为轻力组8只、重力组8只、对照组4只),实验组动物使用关节外固定加力装置,分别施加0.39N和1.18N(轻力组和重力组)的力,加力第28天拆除加力装置,第56天取得标本。在实验前1天、去除牵引装置前1天和处死前1天注射荧光染料,。使用Masson染色和活体荧光技术观察软骨下骨的胶原成熟和钙盐沉积。结果:正常软骨下骨有成骨活动,在负荷加载后,加力侧骨胶原成熟程度高于非加力侧,较小负荷引发的成骨活动更为活跃。结论:成年个体的髁突软骨下骨在外力刺激下出现成骨活性变化,发生适应机械应力环境的重塑,压应力促进胶原成熟,但旋转位移抑制胶原成熟。负荷增加可促进成骨,轻力的促进效应更强。; 吴拓江许跃李煌瞿灵丽陈扬熙; 关键词：髁突软骨下骨成骨

Proteomic analysis of mechanical stressed condylar chondrocytes: ＜正＞Mechanical stress is one of the key factors affecting remodeling of condylar cartilage,in which chondrocyte...; Li Huang~1,Wu Tuo-Jiang~2,Wang Wen-Mei~1,Sun Wei-Bin~1,Zhang Xiang-Yu~3, Li Jie~3,Ma Qiao-Ling~1,Hu Qin-Gang~1,Hua Zi-Chun~(3**) (1.The Stomatological Hospital of Nanjing University,Nanjing,210009,China; 文献传递

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国家自然科学基金(30700963)