国家教育部博士点基金(20040023054)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：丁西来沈铿李颖陆惠娟何维更多>>
- 相关机构：北京协和医院上海市第一妇婴保健院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Fas及其配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞表达的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达。方法采用免疫组织化学方法了解Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达情况。结果免疫组织化学正常卵巢上皮Fas表达阳性率85.7%,Fas配体完全不表达;而卵巢上皮癌Fas表达阳性率31.9%,Fas配体表达阳性率8.5%。结论Fas在卵巢上皮癌细胞低表达,可能是肿瘤细胞逃避Fas介导的宿主免疫的机制。
- 丁西来沈铿李颖陆惠娟
- 关键词：卵巢肿瘤FAS配体
- 靶向性Fas基因转导卵巢癌细胞系SKOV_3的实验研究
- 2009年
- 目的为了解决Fas基因转导中靶向性差的问题,在基因上游插入人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse tran-scriptase,hTERT)启动子,构建真核表达质粒,了解其对Fas表达的提高程度。方法将Fas基因自质粒pcDNA3/Fas中用限制性内切酶KpnⅠ和XbaⅠ切出,插入到KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后的载体pAd/TERT中hTERT启动子的下游,构建pAd/TERT-Fas,并进行酶切鉴定和测序鉴定。然后转染pAd/TERT-Fas、pAd/TERT和pcDNA3/Fas到低表达Fas的SKOV3,并命名为T-F、T和F。对转染克隆细胞进行逆转录PCR、实时PCR、Western免疫印迹和流式细胞分析,了解Fas基因在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果质粒pAd/TERT-Fas经酶切及测序鉴定构建成功。转染SKOV3鉴定结果如下:实时聚合酶链反应中T-F的循环阈值(cycle threshold,CT)值为29,F的CT值为31.4,T和未转染SKOV3不表达Fas;Western免疫印迹结果显示在F和T-F组Fas蛋白有表达,T-F组表达明显强于F组;流式细胞分析Fas在未转染SKOV3、T、F、T-F组分别为1.1%,4.9%,10.9%,15.1%。结论本研究成功构建真核表达质粒pAd/TERT-Fas,并转染SKOV3,结果显示hTERT启动子可提高Fas表达。
- 丁西来沈铿何维吴鸣杨佳欣
- 关键词：FAS卵巢肿瘤
