国家自然科学基金(30872617)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 胰岛素受体底物在乳腺发育和恶性转化中的作用被引量：1
- 2008年
- 胰岛素受体底物(insulin receptor substrates,IRSs)家族是胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素样生长因子-1受体(insulin like growth-1 receptor,IGF-1R)酪氨酸蛋白激酶的主要细胞内底物,主要介导细胞对胰岛素、胰岛素样生长因子-1、白介素、干扰素、肿瘤坏死因子等多种细胞因子的反应。作为结合蛋白,它们通过连接并传递从上游的激活子到下游的效应器之间的信号,从而调节细胞正常的生长、代谢、生存与分化。在胰岛素受体底物家族接受并应答的众多细胞外信号中,大部分是与乳腺发育相关的关键信号,该蛋白在乳腺细胞中的表达是否正常决定乳腺细胞是正常发育还是恶性转化。
- 卜艳红唐爱国
- 关键词：胰岛素受体底物乳腺发育恶性转化乳腺癌
- shRNA沉默IRS-1基因对鼠前脂肪细胞分化和PPARγ表达的影响
- 2010年
- 目的观察胰岛素受体底物-1（IRS-1）基因表达受阻对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化和脂质过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）表达的影响。方法针对小鼠IRS-1基因开放阅读框上的2个区域合成短发夹核糖核酸[shRNA（M和MH）],以pGenesil-1vector为载体构建带绿色荧光蛋白（GFP）靶标的shRNA质粒。以脂质体LipofectaminTM2000介导转染3T3-L1前脂肪细胞,并设阴性对照（HK）载体转染组。细胞转染后,G418筛选稳定表达的阳性克隆并通过免疫印迹法鉴定。应用0.5mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）、10-6mol/L地塞米松（DEX）和5μg/mL胰岛素（Ins）分别诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞空白对照组、HK载体转染组、M和MH转染组分化,在诱导分化的不同时间点收集细胞。用免疫印迹法检测PPARγ的表达。脂肪细胞内脂滴用油红O染色观察。结果与空白对照组、HK组和转染M组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞相比,转染MH组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞IRS-1蛋白表达水平降低70%以上;而MH转染组细胞PPARγ蛋白的表达与前3组3T3-L1前脂肪细胞比较无改变。前3组3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞成功,PPARγ蛋白的表达在脂肪细胞分化成熟过程中逐渐增高。油红O染色显示,随着脂肪细胞的分化成熟,桔红色脂滴逐渐增多;而转染MH组IRS-1shRNA质粒的3T3-L1前脂肪细胞经诱导,油红O染色桔红色脂滴显着减少,直到分化的第8天,才见少许桔红色脂滴,且PPARγ蛋白的表达无变化。结论 IRS-1基因沉默后可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,并在分化过程中抑制PPARγ的表达,说明IRS-1通过调节PPARγ的表达或与PPARγ共同作用在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥决定性作用。
- 唐玲丽唐爱国周后德
- 关键词：胰岛素受体底物-1RNA干扰3T3-L1前脂肪细胞
