国家自然科学基金(30170376)
- 作品数:5 被引量:21H指数:3
- 相关作者:段金虹戴顺龄孙仁宇吴云清徐海珊更多>>
- 相关机构:中国医学科学院北京协和医学院四川大学中国医学科学院基础医学研究所更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 植物雌激素α-ZAL抑制同型半胱氨酸诱导HUVECs的ET-1基因表达及抗氧化机制被引量:1
- 2006年
- 目的:通过氧应激(ROS)信号转导通路探讨植物雌激素α-ZAL对同型半胱氨酸(HCY)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中ET-1基因表达的抑制作用及抗氧化机制。方法:用荧光探针DCF检测HUVECs内ROS的含量;采用RT-PCR方法对ET-1mRNA的表达进行分析,运用WesternBlot法测定细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-jun/AP-1)的表达;同时测定HUVECs上清液中ET-1的浓度,利用瞬时转染技术观察HUVECs的AP-1报告基因的活性。结果:α-ZAL能降低AP-1的活性,抑制由HCY诱导ET-1的分泌和ET-1mRNA的表达,并可能通过抗氧化作用阻断由HCY诱导的HUVECsROS的产生。结论:α-ZAL能抑制HCY诱导HU-VECs的ET-1基因表达,推测可能是α-ZAL减弱了氧应激(ROS)、抑制了蛋白激酶ERK的激活和调节ET-1基因上核转录因子AP-1的表达。
- 段金虹徐海珊戴顺龄王小明吴云清张彦东孙仁宇
- 关键词:HUVECS抗氧化机制基因表达ET-1雌激素Α内皮功能紊乱
- 植物雌激素α-ZAL对oxLDL诱导的人内皮细胞分泌NO和ET-1的影响及其机制研究被引量:8
- 2005年
- 目的探讨植物雌激素α-ZAL影响oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞分泌NO、ET-1的机制。方法采用RTPCR方法对eNOS、iNOS、ET-1mRNA的表达进行分析;采用WesternBlotting方法对eNOS、iNOS蛋白表达进行分析;同时测定内皮细胞上清液中NO、ET-1分泌的变化。结果植物雌激素α-ZAL增加oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,降低ET-1mRNA的表达和蛋白的分泌。结论植物雌激素α-ZAL通过上调oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,下调ET1mRNA的表达和蛋白的分泌起着保护血管内皮的作用。
- 徐海珊段金虹孙仁宇王小明许雪梅吴云清程锦轩戴顺龄
- 关键词:植物雌激素氧化低密度脂蛋白NOET-1
- 植物雌激素α-ZAL和17βE_2对大鼠单个心室肌细胞缩舒功能和胞内钙瞬时变化的影响
- 2006年
- 目的:比较植物雌激素α-ZAL和17βE2对大鼠心肌细胞缩舒和胞内钙瞬变的影响。方法:从成年雌性大鼠心脏分离单个心肌细胞,应用美国Ionoptix视频跟踪计算机图像分析系统在0.5Hz的电刺激下测定离体单个心肌细胞的收缩参数,其中包括最大收缩幅度(PS)、最大收缩幅度时间(TPS)、90%舒张幅度时间(TR90)和最大收缩速率(+dL/dttmax)及最大舒张速率(-dL/dttmax);同时用Fura2/AM钙荧光指示剂测定胞内钙浓度的变化。结果:10-9~10-5mol/L17βE2能使PS产生浓度依赖性的增加,最大增加35%,高浓度的17βE2对TPS有显著影响(P<0.05),能够使ΔFFI最大增加25%;而10-9~10-5mol/Lα-ZAL无论是心肌细胞缩舒功能还是胞内钙含量均无明显变化。且α-ZAL和17βE2对心室肌细胞静息状态下胞内钙浓度和胞内钙的荧光衰减率均无显著影响。结论:α-ZAL对心室肌细胞的作用与17βE2有很大不同,17βE2对心肌细胞缩舒有直接刺激作用,增强心肌收缩可能是通过胞内钙释放与胞外钙内流所介导;而α-ZAL无这种作用,它可能是通过抑制胞外钙内流和其抗氧化反应达到保护心室肌细胞的作用。
- 赵小元崔小岱段金虹任骏吴云清鲁杰孙仁宇戴顺龄
- 关键词:单个心室肌细胞植物雌激素胞内钙E2抗动脉粥样硬化作用Α-玉米赤霉醇
- 植物雌激素α-ZAL对oxLDL诱导人内皮细胞中ET-1基因表达的抑制作用及其抗氧化机制被引量:7
- 2006年
- 目的通过氧应激信号转导通路探讨植物雌激素αZAL对oxLDL诱导人脐静脉内皮细胞中ET1基因表达的抑制作用。方法用荧光探针DCF检测内皮细胞活性氧的含量;采用RTPCR方法对ET1mRNA的表达进行分析,运用WesternBlot法测定了ERK、pERK和cjun/AP1蛋白的表达;同时测定了内皮细胞上清液中ET1的分泌的变化,利用瞬时转染技术观察了内皮细胞的AP1报告基因的活性。结果实验结果表明αZAL对oxLDL诱导的ET1的分泌有抑制作用(P<0.05),它可能通过抗氧化作用阻断oxLDL诱导的内皮细胞氧应激的产生;并能抑制oxLDL诱导的内皮细胞AP1的激活(P<0.05)。结论研究发现αZAL可能是通过氧应激激活细胞外信号调节激酶,进一步通过调节ET1基因上的核转录因子AP1结合位点来抑制oxLDL诱导内皮细胞的ET1基因表达。
- 段金虹徐海珊戴顺龄孙仁宇吴云清张彦东胡绍毅程锦轩
- 关键词:ET-1氧应激
- EDN1基因5′上游AP-1顺式调控元件在同型半胱氨酸诱导HUVECs EDN1基因转录中的作用被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨EDN1基因5′上游AP-1顺式调控元件在同型半胱氨酸(Hcy)诱导HUVECs EDN1基因转录中的作用。方法:用荧光探针DCF检测HUVECs内活性氧的含量;用RT-PCR法检测EDN1mRNA的表达,用Western blotting法测定c-jun/AP-1蛋白的表达;同时用双抗夹心法测定HUVECs上清液中EDN1的分泌;利用重组质粒的瞬时转染技术观察了HUVECs的AP-1报告基因的活性。结果:Hcy能明显增加HUVECs ROS的生成,促进EDN1的分泌和提高EDN1mRNA的表达;瞬时转染分析实验结果显示Hcy能明显诱导质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)的突变体pGL3-EDN1-AP-1MU(-115/+135)荧光素酶的基础表达及Hcy的诱导作用均明显降低。结论:推测Hcy可能改变HUVECs内的氧化还原状态,促进ROS的释放,激活核转录因子AP-1,通过EDN1基因中AP-1顺式作用元件调控该基因转录。
- 段金虹徐海珊戴顺龄王小明吴云清张彦东程锦轩孙仁宇李良陈槐卿
- 关键词:转录因子AP-1