国家重点基础研究发展计划(G1998051207)
- 作品数：29 被引量：152H指数：9
- 相关作者：张开泰吴德昌霍艳英高燕宁胡迎春更多>>
- 相关机构：军事医学科学院中国医学科学院肿瘤医院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人支气管上皮细胞恶性转化相关基因的克隆被引量：1
- 2001年
- [目的]根据克隆的大鼠气管上皮细胞恶性转化EST片段 (GenBankAccessionNumberAF011363)克隆相应的人全长基因并探索其功能。[方法]根据大鼠EST序列进行生物素探针标记 ,cDNA文库筛选 ,cDNA快速终末端扩增延伸目的基因直至获得全长序列。[结果]HRNT 1全长cDNA4256bp ,开放阅读框架2760bp,位于254bp -3016bp之间 ,编码区内含有9个TRP序列 ;位于人类染色体Xq13;cDNA序列收录于GenBank中(AccessionNumberAF223393)。HRNT_1在人支气管上皮恶性转化细胞以及肺癌细胞中具有较高表达。[结论]HRNT_1为一功能基因 ,其高表达与支气管上皮细胞恶性转化相关。
- 张开泰李刚葛世丽胡迎春吴德昌
- 关键词：基因克隆恶性转化肺癌
- α粒子辐射诱导人肺鳞癌裸鼠转移模型的建立
- 2004年
- 目的 建立α粒子辐射诱导人肺鳞癌裸鼠转移模型。方法 α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4原代接种裸鼠皮下 ,后采用组织块接种的方法 ,在鼠间连续传代 3次 ,计算原代成瘤率及传代成活率 ,并观察肿瘤的转移情况 ,病理切片和免疫组织化学鉴定肿瘤的性质和来源。结果 (1)α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4原代接种成瘤率为 4 4 4 % (4 9) ;(2 )原代肿瘤的体表转移率与肺转移率均为 2 5 % (1 4 ) ;(3)病理切片鉴定为低分化鳞状上皮细胞癌 ;(4)免疫组织化学显示CK3和EMA表达阳性。结论 采用组织块接种的方法 ,在α粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4的基础上 ,经过裸鼠体内连续传代 3次 ,成功地建立了人类肺癌裸鼠转移模型。
- 胡迎春项晓琼徐勤枝霍艳英李邦印段瑞峰李刚张开泰吴德昌
- 关键词：Α粒子肺鳞癌免疫组织化学
- 利用组织芯片筛选肺鳞癌转移相关分子的初步研究
- 目的针对本课题组前期经高通量技术(包括比较基因组杂交、抑制性消减杂交 cDNA 文库、cDNA 芯片以及蛋白质组学等方法) 筛选出的肺癌相关差异表达基因或其蛋白产物共 23个(14-3-3 beta、14-3-3 sig...
- 林冬梅肖汀马莹韩迺珺郭素萍程书钧高燕宁
- 文献传递
- 染色体不稳定性与肺癌被引量：1
- 2004年
- 染色体不稳定性 (CIN)是肿瘤发生发展过程中的重要事件 ,常表现为染色体数目及结构异常。DNA损伤及检测点功能减弱、有丝分裂过程中姐妹染色单体分离异常、中心体及端粒异常等都可以导致CIN发生。
- 马金芳高燕宁
- 关键词：染色体不稳定性肺癌肿瘤发生细胞遗传学染色体易位DNA损伤
- Smad7基因在细胞恶性转化过程中的促增殖作用被引量：9
- 2003年
- 用基因转染的方法,建立稳定表达Smad7基因的永生化及恶性化人支气管上皮细胞系,用MTT法检测Smad7基因过表达对细胞生长、增殖的影响及对TGF β1介导的生长抑制效应的影响.结果表明在永生化和恶性化人支气管上皮细胞系BEP2D和BERP35T2中各筛选到2个稳定表达SMAD7蛋白的克隆,命名为BS7 1、BS7 2(来源于BEP2D),RS7 1、RS7 2(来源于BERP35T2).这些细胞系细胞的生长、增殖能力均强于转染空载体的对照细胞系,同时TGF β1对这些细胞系的生长抑制能力明显减弱.提示Smad7基因通过降低细胞对TGF β的应答来促进细胞的生长、增殖能力.
- 霍艳英张开泰项晓琼李邦印徐勤枝段瑞峰胡迎春李刚吴德昌
- 关键词：SMAD7基因细胞恶性转化促增殖作用真核表达
- MTAP在人BEP2D细胞辐射致癌模型和肺癌中表达研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探索甲硫腺苷磷酸化酶 (MethylthioadenosinePhosphorylase ,MTAP)在人支气管上皮BEP2D永生化细胞的恶性转化过程和临床非小细胞肺癌中的表达变化。方法 培养BEP2D和BERP35T 2细胞 ,制备细胞总蛋白 ,进行双相电泳和质谱分析 ;选择有表达差异的蛋白质点MTAP ,在细胞模型中进行NorthernBlot分析 ;对获得的 15例肺癌标本用RT PCR方法分析验证MTAP的表达水平。结果 双相电泳发现MTAP在恶性转化细胞BERP35T 2中表达降低 ;NorthernBlot分析表明MTAPmRNA在BEP2D永生化细胞中表达水平很高 ,而在BERP35T 2恶转细胞中表达极低 ;对 15例非小细胞肺癌进行RT PCR分析 ,发现MTAP在 73 3% ( 11 15 )的肿瘤组织中低表达 ;在中 低分化组肺癌的低表达频率 ( 90 9% )显著高于高分化组 ( 2 5 % ) ,在腺癌与鳞癌组则没有显著性差异。结论MTAP低表达现象与肺癌恶性转化密切相关 。
- 李邦印应万涛戴为民徐勤枝霍艳英胡迎春张开泰吴德昌
- 关键词：MTAPBEP2D细胞肺癌基因表达Α粒子
- 甲硫腺苷磷酸化酶在人支气管上皮细胞辐射致癌模型中的表达变化研究
- 2007年
- 目的研究甲硫腺苷磷酸化酶(Methylthioadenosine Phosphoylase,MTAP)在人支气管上皮细胞(BEP2D)辐射致癌恶性转化前后的表达水平变化。方法培养永生化细胞BEP2D和恶性转化细胞BERP35T-2;制备细胞总蛋白质,进行双相电泳和质谱分析;选择有表达差异的蛋白质点MTAP,在细胞模型中进行Northern Blot和Western blot分析。结果双相电泳发现MTAP在恶性转化细胞BERP35T-2中基本没有表达;Northern Blot和Western Blot分析表明MTAP基因在BEP2D永生化细胞中转录和翻译表达水平均很高,而在BERP35T-2恶转细胞中表达极低;发现MTAP基因在两种细胞中的表达差别在10倍以上。结论MTAP的低表达与辐射致肺癌的发生有密切关系,是BEP2D受到α粒子辐射后基因表达谱的主要改变之一。
- 李邦印张开泰霍艳英胡迎春徐勤枝应万涛吴德昌
- 关键词：甲硫腺苷磷酸化酶BEP2DΑ粒子
- 人肺腺癌染色体8p21～p22杂合性缺失精细作图
- 2002年
- 目的 在染色体 8p2 1 8p2 2界定发生于中国人肺腺癌的杂合性缺失 (LOH)的最小区域 ,为定位克隆肺腺癌相关抑癌基因提供线索。方法 利用 32例肺腺癌患者肿瘤组织检测位于 8p2 1～p2 2的 17个微卫星多态性标记的LOH频率 ,并且探讨各位点LOH与病理分级和临床分期的关系。结果 在 32例肺腺癌患者组织中有 31例 (96 6 7% )存在至少 1个位点的LOH ;主要集中于 3个区域 :位于 8p2 2的D8S2 5 4～ 2 6 1、D8S182 7～ 1731以及D8S1135。所检测位点中仅D8S2 6 1位点的LOH发生频率与肺腺癌分期呈正相关 (P <0 0 5 )。结论 8p2 2区域可能存在位于D8S2 5 4～ 2 6 1,D8S1135和D8S182 7～ 1731的。
- 邵淑娟孙文越张建军安倩肖汀程书钧高燕宁杨佩满
- 关键词：肺腺癌杂合性缺失抑癌基因
- 在BEP2D细胞恶性转化过程中TGF-β1对Smad7表达的调节被引量：20
- 2002年
- 背景与目的:细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制。Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads,它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导,其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一。本研究旨在分析在细胞恶性转化过程中,Smad7基因表达是否发生紊乱,TGF-β1对Smad7基因的调控功能有无发生变化,以探索细胞发生恶性转化的原因。方法:培养BEP2D细胞及BERP35T-2细胞,于收获前60min和90min加入不同剂量的TGF-β1,提取细胞总RNA,分别以未加TGF-β1的细胞组作为对照,用Northernblot杂交比较两组细胞Smad7mRNA表达的差异以及细胞对TGF-β1细胞因子刺激的反应性。同时提取BEP2D及BERP35T-2细胞蛋白,用Westernblot方法比较两组细胞内源性TGF-β1表达的差异。结果:Smad7mRNA表达水平恶性转化细胞高于永生化细胞;加了TGF-β1细胞因子后,BEP2D细胞Smad7mRNA表达增高,BERP35T-2细胞表达水平改变不明显。而内源性TGF-β1的表达水平,BERP35T-2细胞稍高于BEP2D细胞。结论:Smad7在辐射致肺癌细胞系中的过表达及对TGF-β1应答的降低可能是辐射诱发肺癌发生的机制之一。
- 霍艳英张开泰李邦印段瑞峰范保星项晓琼胡迎春谢玲吴德昌
- 关键词：BEP2D细胞恶性转化TGF-Β1SMAD7
- 甲硫腺苷磷酸化酶与肿瘤关系的研究进展
- 2003年
- 李邦印张开泰吴德昌
- 关键词：甲硫腺苷磷酸化酶肿瘤遗传学生物学特性抑癌基因
