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中国科学院知识创新工程重要方向项目(KJCX2YWH09)

作品数:10 被引量:42H指数:3
相关作者:张丽华张玉奎梁振张维冰袁辉明更多>>
相关机构:中国科学院中国科学院研究生院北京理工大学更多>>
发文基金:中国科学院知识创新工程重要方向项目国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
相关领域:理学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 8篇理学
  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 5篇蛋白
  • 3篇蛋白质
  • 3篇色谱
  • 3篇白质
  • 2篇液相
  • 2篇液相色谱
  • 2篇微柱
  • 2篇相色谱
  • 2篇磷酸
  • 2篇磷酸化
  • 1篇单分散
  • 1篇蛋白质组
  • 1篇蛋白质组学
  • 1篇地塞米松
  • 1篇电喷雾
  • 1篇电喷雾串联质...
  • 1篇血清白蛋白
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光标记
  • 1篇整体柱

机构

  • 10篇中国科学院
  • 2篇中国科学院研...
  • 1篇北京理工大学
  • 1篇天津科技大学

作者

  • 10篇张玉奎
  • 10篇张丽华
  • 8篇梁振
  • 5篇张维冰
  • 2篇王晖
  • 2篇刘晋湘
  • 2篇陶定银
  • 2篇袁辉明
  • 1篇韩彬
  • 1篇单亦初
  • 1篇朱贵杰
  • 1篇邓启良
  • 1篇张丽媛
  • 1篇乔晓强
  • 1篇赵鹏
  • 1篇屈锋
  • 1篇邓玉林
  • 1篇夏思敏
  • 1篇段继诚
  • 1篇于晓明

传媒

  • 3篇色谱
  • 2篇中国科学:化...
  • 1篇分析化学
  • 1篇高等学校化学...
  • 1篇中国科学(B...
  • 1篇分析测试学报
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2011
  • 2篇2010
  • 2篇2009
  • 1篇2008
  • 4篇2007
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用被引量:1
2009年
通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2mol/LNaCl、50mmol/LGly-HCl(pH2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定。与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个。此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中。上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质。
赵鹏陶定银梁振张丽华张玉奎
关键词:蛋白质肾病患者
非水溶性药物潜在靶蛋白筛选方法探索
2011年
针对化学蛋白质组学在筛选非水溶性药物的靶蛋白中存在的问题,建立了以非水溶性药物颗粒为载体的靶蛋白筛选方法.通过避免药物固定化,不仅可以保留全部的药物官能团,而且减少了蛋白质在固载基质上的非特异性吸附,可提高获得数据的可信度.将非溶性药物地塞米松颗粒直接与人小细胞肺癌H446细胞提取蛋白质通过间歇性振荡孵育24h,然后采用缓冲液清洗药物颗粒,最后对药物颗粒特异性结合的蛋白质进行酶解和分离鉴定.结果表明,筛选出41个潜在的药物靶蛋白,参与了与DEX药物作用机理相关的多种蛋白质代谢通路和糖代谢通路,同时还发现部分蛋白质参与了帕金森症疾病过程.
陶定银夏思敏刘晋湘张丽华梁振张玉奎
关键词:地塞米松
蛋白质荧光标记中协同效应的高效液相色谱
2007年
To improve the detection sensitivity of low abundance proteins in samples,fluorescence labeling might be a good solution method.In this manuscript,with 5-({2-[(iodoacetyl)amino]ethyl} amino)naphthalene-1-sulfonic acid(1,5-I-AEDANS)as the derivatizing reagent,the cooperative effects of insulin and BSA during the derivatization were studied.Through HPLC analysis,it was found that with BSA added,the detection sensitivity of the derivatized insulin could be improved.When the concentration ratio of BSA to insulin reached 200∶1,the peak area of insulin was increased by over 4-fold,which demonstrates that the existence of BSA had a positive effect on the derivatization of insulin.Furthermore,even when the ratio reached 1000∶1,the S/N of insulin was 8,which could not be detected without BSA being added.However,on the contrary,with insulin being added,the peak area of the derivatized BSA was decreased,demonstrating that insulin had a negative effect on that of BSA.All these results might be of great significance to the detection of low abundance proteins in proteome study.
乔晓强张琳梁振张维冰张丽华张玉奎
关键词:荧光标记蛋白质高效液相色谱
用氨甲蝶呤偶联琼脂糖亲和吸附法从人肝脏cDNA噬菌体展示文库中筛选氨甲蝶呤相互作用蛋白
2007年
目的:利用氨甲蝶呤(MTX)偶联琼脂糖凝胶吸附法从人肝脏细胞cDNA噬菌体展示文库中筛选与MTX相互作用的蛋白。方法:以偶联于琼脂糖凝胶表面的MTX为配基,通过"结合-洗脱-扩增"过程筛选与MTX相互作用的噬菌体。利用PCR对筛选结果进行监测,对筛选得到的噬菌体PCR产物进行序列测定和基因同源性分析。结果:通过五轮亲和筛选富集到特异噬菌体克隆,再通过PCR获得cDNA插入片段。通过BLAST程序搜索GenBank,证明筛选到的片段与人PI-3K相关蛋白激酶SMG-1异构体1蛋白同源性达100%。结论:利用偶联MTX的琼脂糖凝胶作为筛选基质,从T7噬菌体展示cDNA文库中富集特异噬菌体是一种方便、高效的MTX相互作用靶蛋白筛选方法,可为探讨小分子药物的分子作用机制提供借鉴和参考。
于晓明张维冰张丽华张玉奎
关键词:噬菌体展示技术肝脏细胞氨甲蝶呤相互作用
整体材料研究进展及其在微柱分析领域中的应用被引量:3
2007年
整体材料具有通透性好、传质速度快、性能稳定而且容易制作等优点。它不仅可以作为微柱液相色谱和毛细管电色谱的固定相,而且也可用作样品富集和酶反应器的载体。目前,整体材料已受到越来越多的关注,并被广泛应用于各个领域。本文对近两年有机基质和无机基质整体材料的研究进展及其在微柱分析领域中的应用进行了系统的综述。
朱贵杰张丽华梁振张维冰张玉奎
关键词:微柱分离
新型固定化铁离子亲和色谱整体柱的制备及评价被引量:2
2010年
以N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺为功能单体,制备了含有高活性基团的整体材料基质。以次氨基三乙酸为配体,通过固载Fe3+,发展了一种固定化Fe3+亲和色谱(Fe-IMAC)整体柱的制备方法。该整体柱不仅对磷酸化肽具有很好的选择性,而且富集容量大、回收率高、重现性好。此外,利用该整体柱实现了牛奶蛋白质酶解产物中磷酸化肽段的选择性富集。本实验研制的Fe-IMAC整体柱有望用于磷酸化蛋白质组研究。
张丽媛王晖梁振单亦初张丽华张玉奎
关键词:整体柱
新型单分散血清白蛋白印迹微球的制备被引量:2
2009年
以猪血清白蛋白(PSA)为模板,采用分级印迹方法,制备了新型单分散多孔蛋白质表面印迹微球.将PSA吸附在5μm粒径、1000孔径的球形硅胶表面及孔内后,将甲基丙烯酰胺、甲基丙烯酸为功能单体、甲叉双丙烯酰胺为交联剂的聚合物溶液,通过真空负压引入到硅胶孔内,并在室温下聚合24h.反应完成后,用3mol/LNH4HF2刻蚀硅胶,获得形状和结构与硅胶颗粒互补的PSA印迹聚合物微球.竞争吸附实验结果表明,在非模板蛋白质存在的情况下,实现印迹颗粒对模板蛋白的高选择性吸附,选择因子达到3.6,说明该印迹聚合物材料有望成为一种可以同生物抗体相媲美的新型亲和材料.
刘晋湘邓启良张丽华梁振张玉奎
关键词:血清白蛋白
新型全二维微柱液相色谱分离平台的构建被引量:7
2008年
采用自动进样器和一套二元梯度泵构建了以阳离子交换色谱-反相色谱(SCX-RPLC)为分离模式的新型全二维微柱液相色谱分离平台。在第一维分离中,通过自动进样器将不同浓度的盐溶液以台阶梯度输送至SCX柱上,实现肽段的分级洗脱。洗脱下的肽段经C8预柱富集、除盐后,进入第二维C18RPLC柱上,通过线性梯度实现进一步的分离。采用该平台分离了5种标准蛋白的酶解产物,系统峰容量可达1467。结果表明,该平台可以自动完成进样、除盐、分离及检测。
袁辉明张丽华张维冰梁振张玉奎
关键词:自动进样器蛋白质组学
微柱液相色谱-电喷雾串联质谱检测多磷酸化肽位点被引量:4
2007年
基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基酸序列预计的单磷酸化肽相差80的色谱峰,可以证实样品中含有单磷酸化肽。此外,经碱性磷酸酶处理后的样品的色谱峰数目的增加,说明样品中可能存在多磷酸化肽段。通过控制去磷酸化反应的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基团被去除,从而可以推断其中3个磷酸化位点可能处于氨基酸残基序列的第17、18和19位。
王晖段继诚袁辉明张丽华张维冰张玉奎
关键词:微柱液相色谱电喷雾串联质谱磷酸化位点碱性磷酸酶
离子液体在分离领域的研究进展被引量:23
2010年
室温离子液体,又称离子液体,是一种在室温及接近室温的环境中完全以离子状态存在的液态物质.由于其具有不可燃、蒸汽压极低、黏度大、导电性和溶解能力好、高温稳定等特点,已被广泛应用于有机合成、催化、电化学、分析化学等领域.本文侧重介绍离子液体在样品预处理、毛细管电泳、高效液相色谱、气相色谱、质谱等分离领域的最新研究进展,并对其发展方向进行了展望.
韩彬张丽华梁振屈锋邓玉林张玉奎
关键词:离子液体色谱
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