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miR-590-3p调控人肝星状细胞LX-2TGF-β/SMAD通路抗肝纤维化的研究被引量：1: 2015年; 目的建立转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肝星状细胞LX-2体外纤维化模型,观察miR-590-3p对肝纤维化影响。方法设计并合成miR-590-3p模拟物和miR-590-3p抑制剂,瞬时转染至LX-2细胞,再经TGF-β1诱导24 h后,荧光定量PCR检测胞内miR-590-3p表达,Western Blot检测胞内纤维化相关蛋白Smad 4及CollagenⅠ表达变化,并分析胞内miR-590-3p表达改变对细胞纤维化指标的影响。结果 miR-590-3p过表达下调Smad 4蛋白水平表达50%(P<0.05),抑制miR-590-3p功能上调Smad 4蛋白表达50%(P<0.05)。结论 miR-590-3p可能通过下调LX-2 Smad4的表达,影响LX-2活化,在肝纤维化进程中发挥重要作用。; 曹聪许晨舒唐欲博陈杰陈孝; 关键词：肝星状细胞肝纤维化

五味子甲素在人肝星状细胞中的抗纤维化作用被引量：16: 2016年; 目的:研究五味子甲素对人肝星状细胞系LX-2细胞的增殖、纤维化指标及凋亡相关蛋白的影响。方法:采用不同浓度的五味子甲素与肝星状细胞LX-2共孵育,MTT法检测五味子甲素对细胞的抑制作用,RT-PCR法和Western blot法测定纤维化指标I型胶原α亚基1(collagen type I alpha 1,collagen I-1)和α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达量,并检测五味子甲素对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达量的影响。结果:五味子甲素在不同浓度时可抑制人肝星状细胞系LX-2细胞的增殖,可降低collagenⅠ和α-SMA的mRNA水平和蛋白表达量(P<0.05),并能降低Bcl-2的mRNA水平和蛋白表达量以及Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。结论:五味子甲素可能通过抑制细胞增殖、降低纤维化指标的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用。; 曹媛夏延哲陈杰陈孝; 关键词：五味子甲素肝纤维化

高效液相色谱串联质谱法分析菊花水提取液的化学成分被引量：12: 2012年; 目的采用高效液相色谱串联质谱法分析菊花水提取液的化学成分。方法采用水为溶剂加热回流提取法提取菊花药材,提取液采用高效液相色谱串联质谱法对其主要的化学成分进行分离和鉴定。结果通过高效液相色谱可将20个主要的化学成分较好的分离,其中13个通过串联质谱进行了结构鉴定,8个通过对照品得到了确证。结论高效液相色谱串联质谱法快速、准确,可用于菊花药材的化学成分鉴定。; 李瑞明宋伟峰陈杰喻丽元梁耀荣张俊鹏; 关键词：菊花水提取液化学成分高效液相色谱串联质谱法

克霉唑抗肝缺血-再灌注损伤凋亡机制的研究: 2015年; 目的观察孕烷X受体(PXR)诱导药克霉唑对肝脏缺血-再灌注损伤后肝细胞凋亡影响,并探讨其机制。方法建立大鼠肝脏缺血-再灌注模型,32只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型对照组和克霉唑小剂量组、大剂量组进行肝缺血-再灌注损伤。TUNEL法检测肝组织中凋亡细胞,Western blot检测肝脏CYP3A1、Bcl-2、Bax、PARP表达水平。结果克霉唑小剂量组、大剂量组与模型对照组比较,细胞凋亡数减少,组织损伤减轻,凋亡细胞百分率明显降低,Bcl-2/Bax比值明显升高,抑制PARP剪切,提示有较好的抗凋亡作用,均差异有统计学意义;作为PXR特异性强诱导药克霉唑,与假手术组比,能明显诱导CYP3A1基因表达。结论 PXR特异性强诱导药克霉唑可能通过促进Bcl-2表达及抑制Bax表达而拮抗肝细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血-再灌注损伤,也与抑制PARP剪切有关。; 许静陈杰罗子玲官碧琼何炳洪孙萍萍袁芳; 关键词：克霉唑肝细胞孕烷X受体

刺囊酸预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用被引量：6: 2013年; 目的研究刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法用终浓度分别为0.5,5和50μmol.L-1的刺囊酸预处理原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞1 h,予以缺氧3 h后,再复氧2 h后,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、丙二醛含量及热休克蛋白70表达等指标,观察其对缺氧/复氧损伤的延迟保护作用,并探讨一氧化氮合成酶抑制剂0.1 mmol.L-1的N-硝基-L-精氨酸甲酯、促分裂原活化蛋白激酶抑制剂50μmol.L-1的PD98059和1μmol.L-1K+-ATP通道阻断剂格列苯脲对其保护作用的影响。结果与缺氧/复氧组比较,不同剂量的刺囊酸预处理组能显著提高细胞存活率,降低乳酸脱氢酶活性,呈剂量依赖性,且显著能增加超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低丙二醛含量,增加热休克蛋白70表达,能对抗缺氧/复氧损伤;而N-硝基-L-精氨酸甲酯和PD98059能部分取消刺囊酸预处理的上述保护作用。结论刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤有显著抗氧化作用,且其保护作用机制可能与一氧化氮生成、促分裂原活化蛋白激酶活化及增加热休克蛋白70表达有关。; 韦炳华陈杰许静官碧琼罗子玲; 关键词：刺囊酸缺血预处理热休克蛋白70

岩白菜素对脂多糖诱导RAW264.7细胞IL-6、TNF-α及NF-κB表达的影响: 目的:研究岩白菜素预处理对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导RAW264.7细胞IL-6、TNF-α及NF-κB表达的影响。方法 :将RAW264.7细胞随机分为空白对照组;DMSO组（DMSO浓...; 陈杰许静夏延哲曹媛陈孝; 关键词：岩白菜素脂多糖白细胞介素-6 细胞核因子-ΚB; 文献传递

旱莲草单体对人孕烷X受体调控CYP3A4转录表达的调节作用被引量：4: 2012年; 目的研究旱莲草5种中药单体木犀草素、芹菜素、槲皮素、刺囊酸和蟛蜞菊内酯是否可以通过PXR的激活而诱导CYP3A4转录表达。方法采用MTT法检测5种中药单体对人结肠癌细胞系LS174T细胞的毒性,采用脂质体瞬时转染的方法,在LS174T细胞中同时转入人PXR表达质粒、CYP3A4报告质粒以及内参质粒,建立双荧光报告基因体系,与不同浓度及不同给药时间的中药单体共同孵育,检测细胞中荧光素酶。结果 5种中药单体对LS174T的IC50值分别为木犀草素(71.08±5.35)μmol/L、芹菜素(185.54±9.57)μmol/L、槲皮素(112.68±8.34)μmol/L、蟛蜞菊内酯(36.01±9.37)μmol/L、刺囊酸(26.04±5.62)μmol/L。刺囊酸(5、10和20μmol/L)分别诱导PXR调控的CYP3A4表达(1.52±0.31)倍、(1.95±0.31)倍和(2.57±0.23)倍,蟛蜞菊内酯(5、10和20μmol/L)分别诱导PXR调控的CYP3A4表达(1.57±0.30)倍、(1.91±0.25)倍和(2.14±0.51)倍,木犀草素、槲皮素、芹菜素在试验的浓度范围内不能明显诱导LS174T细胞中PXR调控的CYP3A4表达。在不同给药时间试验中,10μmol/L和20μmol/L的刺囊酸在12～48 h能诱导PXR调控的CYP3A4表达,诱导能力随时间的延长而呈增强的趋势,各浓度的最大诱导倍数均在48 h出现;10μmol/L和20μmol/L的蟛蜞菊内酯只能在12～24 h诱导PXR调控的CYP3A4表达,在48 h时2个浓度组均出现诱导表达倍数的下调。结论刺囊酸和蟛蜞菊内酯在LS174T细胞系中可以通过激活PXR诱导CYP3A4转录表达,而木犀草素、芹菜素、槲皮素无此作用。; 夏延哲韦炳华陈杰曹媛吴海燕陈孝; 关键词：芹菜素刺囊酸孕烷X受体 CYP3A4

蟛蜞菊内酯抗大鼠肝缺血再灌注损伤作用的研究被引量：9: 2014年; 目的观察蟛蜞菊内酯预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)和蟛蜞菊内酯高、低剂量预处理组。动物术前分别腹腔内注射蟛蜞菊内酯10,20 mg·Kg-1,1次/d,连续3 d,再进行肝缺血1 h,再灌注4 h,实验结束后检测大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量及肝组织中脂质过氧化反应产物丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性,并通过光镜观察肝组织结构的形态学改变。结果不同剂量蟛蜞菊内酯处理组血清ATL、AST及肝组织中MDA含量明显低于肝缺血再灌注组(P<0.01),肝组织中SOD及GSH-Px活性含量则高于缺血再灌注组(P<0.01),肝细胞形态学异常改变较模型组也明显减轻。结论蟛蜞菊内酯对肝缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与减轻肝细胞脂质过氧化作用有关。; 许静陈杰孙萍萍袁芳; 关键词：肝脏缺血再灌注损伤脂质过氧化作用

PDGF-BB对大鼠肝星状细胞T6增殖及细胞外基质的影响被引量：2: 2013年; 目的研究血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)在不同条件下对大鼠肝星状细胞系T6(HSC-T6)增殖及表达细胞外基质的影响。方法不同浓度(5、10、20、40 ng/mL)的PDGF-BB在不同的孵育时间(3、6、12、24、36 h)时刺激HSC-T6细胞,噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖作用,RT-PCR检测CollagenⅠ、TGF-β1、TIMP-1和MMP-2 mRNA表达量。结果 PDGF-BB在不同浓度及孵育时间时可诱导大鼠HSC-T6细胞的增殖,呈现时间依赖性,当剂量到达40 ng/mL时,增殖出现饱和现象;10～40 ng/mL浓度范围内的PDGF-BB孵育12 h和24 h时,可显著升高CollagenⅠ、TGF-β1、TIMP-1的mRNA水平(P<0.05),显著降低MMP-2的mRNA水平(P<0.05),达36 h时,CollagenⅠ的mRNA表达量逐渐下降。结论 10～20 ng/mL浓度范围的PDGF-BB刺激大鼠HSC-T6细胞24 h时对细胞增殖及表达细胞外基质最明显。; 曹媛陈杰夏延哲许晨舒陈孝; 关键词：血小板衍生生长因子-BB 肝星状细胞肝纤维化

6种中药单体对人孕烷X受体介导细胞色素酶P450 3A4转录的调节作用被引量：4: 2012年; 目的研究6种中药单体野黄芩苷、丹皮酚、芍药苷、甘草苷、黄芪甲苷以及黄芩素是否可以通过诱导孕烷X受体(PXR)介导细胞色素酶P4503A4(CYP3A4)转录表达。方法采用脂质体瞬时转染的方法,将人PXR表达质粒、CYP3A4报告质粒以及内参质粒转入LS174T细胞中,建立报告基因体系,与不同浓度及不同给药时间的中药单体共同孵育,检测细胞中荧光素酶的活性。结果黄芩素(20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L)分别诱导PXR介导CYP3A4表达(1.49±0.23)倍(P<0.05)、(2.45±0.56)倍(P<0.01)和(5.27±0.40)倍(P<0.01),野黄芩苷、丹皮酚、芍药苷、甘草苷和黄芪甲苷在实验的浓度范围内不能明显诱导LS174T细胞中PXR介导CYP3A4表达。在不同给药时间实验中,20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L的黄芩素在12～48h能诱导PXR介导CYP3A4表达,诱导能力随时间的延长而呈增强的趋势,各浓度的最大诱导倍数均在48h出现。结论黄芩素在LS174T细胞系中可以通过诱导PXR介导CYP3A4转录表达,而野黄芩苷、丹皮酚、芍药苷、甘草苷或黄芪甲苷无此作用。; 夏延哲陈杰潘裕华陈孝; 关键词：野黄芩苷甘草苷黄芩素孕烷X受体 CYP3A4

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