广东省科技计划工业攻关项目(2004B30301003)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：李娟罗绍凯刘俊茹苏畅邹外一更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 可溶性FLT-1基因的克隆以及原核表达被引量：2
- 2006年
- 目的：克隆可溶性血管内皮生长因子受体1（soluble vascular endothelial growth factor receptor 1，sVEGFR1或sFLT-1）基因的第1～3个Ig样区域，并在原核表达系统中表达。方法：采用RT_PcR的方法从人脐静脉内皮细胞中扩增sFLT-1基因的第1～3个Ig样区域，并克隆到PMD-18T载体中，经酶切及测序证实。然后采用BamHI／EcoRI双酶切，亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中，并转化至EcoliBL21菌株。应用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行Western1310t分析。结果：经RT-PCR成功扩增了sFLT-1基因第1～3个Ig样区域；成功地克隆了sFLT-1基因第1～3个k样区域；经IPTG诱导的重组质粒pGEX—sFLT表达出相对分子质量约为62×10。的融合蛋白，与预期的结果相符。结论：成功克隆sFLT_1基因第1～3个Ig样区域，并在EcoliBL21中表达出GST-sFLT融合蛋白，为进一步研究sFLT-1蛋白在肿瘤治疗中的作用奠定了技术基础。
- 刘俊茹郑朝旭罗绍凯李娟苏畅
- 关键词：内皮生长因子遗传学技术
- VEGF及其受体在多发性骨髓瘤中的表达及意义被引量：5
- 2007年
- 背景与目的:骨髓新生血管形成在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的发生、发展和预后中起着重要的作用,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在此过程中扮演了关键角色。本研究旨在研究VEGF及其受体在MM中的表达,分析其与MM发生、发展的关系。方法:采用RT-PCR的方法检测35例MM患者、16例非肿瘤患者(下称对照组)以及KM3细胞株中VEGF及其受体Flt-1和KDR的表达,并分析阳性率以及表达相对含量在MM患者和非肿瘤患者、MM不同分期间的差异。结果:VEGF和Flt-1基因在MM组的阳性率(62.9%和80.0%)显著高于对照组(18.8%和31.3%)(P<0.01),VEGF在两组中的表达水平为0.41±0.19vs.0.06±0.01(P<0.05),Flt-1为0.60±0.33vs.0.08±0.03(P<0.01);VEGF基因在初治组和复发/难治MM组的阳性率为66.7%vs.60.9%(P>0.05),Flt-1基因为83.3%vs.78.3%(P>0.05);VEGF在Ⅱ期和Ⅲ期MM的阳性率为50%vs.73.7%(P>0.05),Flt-1为81.3%vs.78.9%(P>0.05);复发/难治MM组的VEGF和Flt-1基因的表达水平明显高于初治组(0.49±0.20vs.0.28±0.04,P<0.05;0.70±0.38vs.0.41±0.06,P<0.05),Ⅲ期MM患者VEGF和Flt-1基因的表达水平明显高于Ⅱ期患者(0.48±0.19vs.0.28±0.09,P<0.05;0.75±0.35vs.0.41±0.21,P<0.05)。KDR仅在3例MM患者中检出,对照组未检出。结论:VEGF和Flt-1在MM中高表达,并与疾病进展相关。
- 刘俊茹罗绍凯李娟苏畅
- 关键词：多发性骨髓瘤血管内皮生长因子受体逆转录-聚合酶链反应
- 非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血被引量：3
- 2008年
- 【目的】探讨非清髓性异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的近期疗效及其并发症。【方法】9例确诊的年轻SAA患者接受了同胞HLA全相合外周造血干细胞(PBSC)移植,预处理方案为:环磷酰胺(50mg·kg-1·d-1,移植前5d至移植前2d静滴)+兔抗人胸腺细胞球蛋白(antithymocyte globulin,2.5mg·kg-1·d-1,移植前5d至移植前3d静滴)。观察移植后临床造血重建时间及近期并发症,并于移植后40d、180d和360d用短小片段重复序列(STR)动态检测其植入情况。【结果】9例患者移植后中性粒细胞升至0.5×109/L的时间平均为14.5d、血小板升至20×109/L的时间平均为23.5d,移植后180d和360d的外周血象及骨髓象均恢复正常,移植后40d、180d和360dSTR显示9例均表现为完全嵌合体(FDC);所有病例中,有1例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)、2例出现Ⅰ度aGVHD,2例发生局限性慢性GVHD;6例患者出现CMV血症,更昔洛韦治疗有效;1例发生念珠菌性肠炎、1例发生曲霉菌性肺炎和1例发生细菌性肺炎,抗真菌或细菌治疗后痊愈;3例患者出现口腔溃疡,1例患者出现出血性膀胱炎,未发现肝静脉闭塞病。所有患者目前均存活且在随访中。【结论】非清髓同胞Allo-HSCT造血重建快、植入率高且并发症少,是治疗年轻SAA患者的有效手段,但本研究中病例年龄轻、诊断到移植之间的时间短、血制品输注少,是移植成功的有利因素,在其他SAA的患者中能否取得良效还需更多临床验证。
- 陈媚邹外一许多荣童秀珍彭爱华李娟罗绍凯黄珊
- 关键词：重型再生障碍性贫血异基因造血干细胞移植疗效并发症
