湖南省自然科学基金(09JJ6048)
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 相关作者：贺爱兰张波吴小玲廖艳阳彭东海更多>>
- 相关机构：湖南人文科技学院湖南农业大学湖南中医药大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- UFC1基因在乳腺癌和正常乳腺组织中的表达被引量：5
- 2011年
- 为探讨泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)基因在乳腺癌组织及相对应的癌旁正常乳腺组织中的表达,以及与临床病理特征之间的关系,分别应用RT-PCR法、Western-blot法、免疫组织化学检测20例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其对应的癌旁正常乳腺组织中UFC1基因的表达水平,并进行比较,同时分析UFC1蛋白表达与临床病理特征之间的关系.在mRNA水平上检测,乳腺癌组织中UFC1基因的表达率明显高于其对应的正常乳腺组织,差异显著(P<0.05);在蛋白质水平上检测,乳腺癌组织中UFC1蛋白表达明显增强,是正常乳腺组织表达量的3.15倍,其免疫组织化学所检测的结果也是如此.实验结果表明乳腺癌组织中UFC1基因的表达明显高于正常乳腺组织,其表达量的不同,提示UFC1基因与乳腺癌的发生和发展有着密切关系.
- 贺爱兰张波刘如石
- 关键词：乳腺癌RT-PCRWESTERN-BLOT免疫组织化学
- UFC1基因在乳腺癌细胞中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的:泛素结合酶UFC1是一个新鉴定的类似泛素结合酶E2的基因,探讨UFC1基因在不同类型的乳腺癌细胞中是否表达及表达量情况.方法:分别应用RT-PCR法、Western-blot法检测分别检测一系列的乳腺细胞系MCF7、HBL100、MDA-MB231和MDA-MB-453中UFC1基因的表达水平,并进行比较.结果:在正常的HBL100乳腺细胞系中的表达最低,而在乳腺癌细胞系MCF7、MDA-MB231、MDA-MB-453中的表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05).结论:UFC1在乳腺细胞系中的差异表达的结果为将UFC1作为新的靶分子引入乳腺癌的临床预防和治疗提供实验依据.
- 贺爱兰吴小玲张波
- 关键词：乳腺癌RT-PCRWESTERN-BLOT
- UFCI基因在乳腺细胞系中的表达分析被引量：1
- 2011年
- 泛素结合酶UFC1是一个新鉴定的类似泛素结合酶E2的基因。目前,对UFC1的功能研究报道还比较少,有待更进一步的研究和探讨。采用半定量RT-PCR技术分别检测一系列的乳腺细胞系MCF7、HBL100、MDA-MB231和MDA-MB-453中UFC1基因的转录水平,结果显示,在正常的HBL100乳腺细胞系中的表达最高,而在乳腺癌细胞系MCF7,MDA-MB231,MDA-MB-453中的表达明显降低。UFC1在乳腺细胞系中的差异表达的结果为将UFC1作为新的靶分子引入乳腺癌的临床预防和治疗提供实验依据。
- 贺爱兰张梦成彭东海
- 关键词：泛素化乳腺癌
- 泛素结合酶UFC1基因的荧光表达载体构建被引量：1
- 2011年
- 利用pEGFP-C3作为载体,构建与绿色荧光蛋白基因相连的泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)序列的真核表达质粒,观察其在真核细胞中的表达和定位,为进一步研究UFC1基因功能打下了基础。采用RT-PCR方法从宫颈癌Hela细胞中扩增UFC1基因全长cDNA,双酶切后克隆到真核表达载体pEGFP-C3中,构建并鉴定pEGFP-C3-UFC1质粒。经脂质体介导转染Hela细胞后,在荧光显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况。双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pEGFP-C3-UFC1重组载体。重组载体转染Hela细胞,观察到绿色荧光蛋白表达,还可见绿色荧光呈点状分布于细胞质中;而对照pEGFP-C3质粒转染Hela细胞,绿色荧光蛋白则呈弥散状分布。成功克隆了UFC1基因,构建了pEGFP-C3-UFC1重组质粒。
- 贺爱兰彭东海吴小玲廖艳阳
- 关键词：克隆真核表达载体
- 泛素结合酶UFC1基因的原核表达载体构建
- 2012年
- 克隆人的泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)基因,并为实现UFC1基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备做准备。方法:采用RT-PCR方法从宫颈癌Hela细胞中扩增UFC1基因全长cDNA,双酶切后克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建并鉴定pGEX-4T-2-UFC1质粒。结果:双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pGEX-4T-2-UFC1重组载体。结论:成功构建泛素结合酶UFC1基因的原核表达载体,为在原核系统中表达UFC1重组蛋白,并制备多克隆抗体奠定了基础,也为进一步研究UFC1基因功能提供了工具。
- 周后兵黄文雄颜斌阳晨希刘姝梅吴娟贺爱兰
- 关键词：克隆原核表达载体
