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天津市卫生局科技基金(2012KZ081)
作品数:
2
被引量:2
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李宏杰
李常颖
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畅继武
张婷
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尿液蛋白质组学在膀胱尿路上皮癌早期诊断中的应用
被引量:1
2013年
目的寻找膀胱尿路上皮癌(BUC)患者与健康志愿者尿液蛋白质组学差异,为BUC的早期诊断奠定基础。方法采用25%乙醇沉淀法制备尿液双向电泳样品,尿液蛋白经双向凝胶电泳(2-DE)分离后行考马斯亮蓝染色,利用PDQuest8.02D凝胶图像分析软件进行分析,所得差异蛋白点用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱仪(MALDI-TOF-TOF-MS)进行肽序测定,结合Swiss-Prot蛋白质数据库对差异蛋白进行初步鉴定,并应用Western blot方法对差异蛋白在两组间的差异表达情况进行验证。结果获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱。BUC组与对照组凝胶的蛋白质点数分别为(789±18)个和(762±14)个;与对照组比较,BUC组有6个蛋白质点表达明显下调,11个蛋白质点表达明显上调。经质谱分析后,初步鉴定了5种蛋白质,分别为纤维蛋白原、乳酸脱氢酶B、载脂蛋白A1、丛生蛋白和触珠蛋白,均在BUC组呈表达增高趋势。Western blot验证了双向凝胶电泳结果。结论BUC患者与健康志愿者的尿液蛋白质组存在明显的差异,差异蛋白的鉴定为进一步寻找BUC早期诊断的分子标志物提供了研究基础和依据。
李宏杰
李常颖
张婷
王世鑫
畅继武
蒋守芳
章广玲
李建民
关键词:
膀胱尿路上皮癌
双向凝胶电泳
分子标记物
载脂蛋白-A1在膀胱尿路上皮癌早期诊断及分类中的意义
被引量:1
2013年
目的探讨尿液载脂蛋白-A1(Apo-A1)在膀胱尿路上皮癌(BUC)早期诊断及“两类癌”分类中的意义。方法设正常对照组(24例)、膀胱良性病变组(8例)、低恶性BUC组(24例)和高恶性BUC组(16例),根据4组间单例尿液标本的双向电泳(2-DE)图谱,挑选表达差异显著的Apo-A1,采用ELISA方法检测该蛋白在4组尿液中的含量,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线来确定Apo-A1对BUC早期诊断和“两类癌”分类的最佳工作点(OOP)并进行临床正确性的验证,计算相应的特异度和灵敏度。结果双向电泳图谱显示,在4组间Apo-A1呈现逐渐升高的趋势;在正常对照组和膀胱良性病变组间Apo-A1含量无明显差异,而在BUC组Apo-A1含量明显高于正常对照组和膀胱良性病变组,差异有统计学意义(P〈0.01);在高恶性BUC组Apo-A1含量明显高于低恶性BUC组,差异有统计学意义(P〈0.01)。以18.22ng/ml为临界点,可将BUC患者与非患者进行较好区分;以29.86ng/ml为临界点,可将低恶性BUC与高恶性BUC进行较好区分。进一步的临床验证实验显示,以Apo-A1作为分子标志物诊断膀胱癌的灵敏度和特异度分别为91.6%(98/107)和85.7%(42/49);以Apo-A1作为分子标志物进行膀胱癌分类的灵敏度和特异度分别为83.7%(41/49)和89.7%(52/58)。结论Apo-A1有可能是BUC早期诊断及”两类癌”分类的一个生物学标志物,具有潜在的临床应用价值。
李常颖
李宏杰
张婷
高宏生
畅继武
门秀丽
吴静
李建民
关键词:
膀胱尿路上皮癌
分子标志物
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