国家自然科学基金(30600023)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：姜永强袁媛郑玉玲路玲玲李文君更多>>
- 相关机构：军事医学科学院华中农业大学中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 猪链球菌2型全基因组DNA芯片的研制及基因表达谱技术平台的建立被引量：2
- 2009年
- 目的:研制猪链球菌2型(SS2)全基因组DNA芯片,建立SS2基因表达谱技术平台。方法:利用SS2全基因组序列,挑选出2194条基因,经PCR扩增出2156条基因并将产物纯化,点样制备芯片;将芯片用于表达谱研究,采用实时定量PCR验证表达谱结果,对芯片进行可靠性分析。结果:芯片杂交数据与实时定量PCR验证显示了较高的相关性,二者相关系数r=0.87。结论:研制了一批SS2全基因组DNA芯片,并建立了基于DNA芯片的表达谱技术平台。
- 曾小涛袁媛郑玉玲周冬生姜永强陈福生
- 关键词：猪链球菌2型DNA芯片基因表达谱
- 2型猪链球菌假想转运蛋白89k/pTP与毒力的相关分析被引量：1
- 2008年
- 目的:构建2型猪链球菌假想转运蛋白89k/pTP的基因插入失活突变体并进行毒力相关分析。方法:首先将同源臂片段克隆到pSET4s质粒上,构建插入失活载体pSET4s-pTP,并通过对单交换的筛选获得89k/pTP的基因插入失活突变体,再用小鼠腹腔感染模型对突变株和野生株的毒力进行比较。结果:获得了89k/pTP的基因插入失活突变体,并发现其毒力与野生型相比明显下降。结论:2型猪链球菌假想转运蛋白89k/pTP与其毒力有关,其作用和机制值得进一步分析。
- 袁媛路玲玲李文君郑玉玲姜永强
- 关键词：2型猪链球菌毒力
- 插入失活法构建2型猪链球菌突变株被引量：1
- 2008年
- 目的构建2型猪链球菌突变株05ZYΔ0913,05ZYΔ0936。方法以05ZY为模版,分别扩增0913、0936基因内部504bp,549bp片段为同源臂,与pSET4S质粒进行连接,将连接产物转入DH5α感受态细胞中,构建载体0913-pSET4S,0936-pSET4S。然后利用插入失活法,将构建的0913-pSET4S、0936-pSET4S载体通过电转化导入2型猪链球菌的感受态细胞中,利用壮观霉素抗性筛选得到阳性转化子,并用PCR进行鉴定。结果筛选到的菌株均能抵抗100μg/ml壮观霉素,经PCR鉴定,为失活了目的片段(0913和0936片段)的2型猪链球菌突变株。结论本研究成功构建了2个突变株,为进一步研究目的片段的基因功能奠定了基础。
- 路玲玲李蓉李文君袁媛郑玉玲王恒樑姜永强
- 关键词：链球菌基因沉默诱变
