黑龙江省青年科学基金(QC06C001)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
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- 牛乳溶菌酶在毕赤酵母中的分泌表达及活性分析被引量：3
- 2010年
- 为真核表达牛乳溶菌酶,本研究在通过酵母偏爱密码子改造并人工合成LYZ1基因的基础上,将LYZ1基因经克隆构建了高效表达具有生物活性牛乳溶菌酶的分泌型表达载体pPICZα-A-LYZ1,将其经SacⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母菌株GS115中,通过Zeocin筛选和PCR鉴定后的阳性重组菌用甲醇诱导60h后,进行SDS-PAGE和western blot鉴定,用溶壁微球菌对其进行活性检测,并对其进行体外抑菌效果检测分析。结果表明:分泌表达的重组目的蛋白约16ku,而且抗血清具有良好的反应原性。活性检测表明,培养液中重组溶菌酶活性达到2842u/mL。体外抑菌试验结果表明,重组牛乳溶菌酶对标准葡萄球菌及大肠杆菌菌株具有较好的抗菌作用,而对无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌作用较弱。
- 付世新齐长学罗春海张丽王瑶
- 关键词：毕赤酵母分泌表达抗菌活性
- 奶牛血浆钙离子浓度及胎儿胎盘eNOS表达的研究
- 2010年
- 本试验采用终点法检测血浆中Ca2+浓度变化,分别采用免疫组织化学SP法及荧光定量PCR法检测奶牛胎儿胎盘eNOS蛋白及其mRNA的表达。通过对血浆中Ca2+浓度的检测及胎儿胎盘内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达量的研究,探讨奶牛胎衣不下的发生与这些物质变化的关系。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中Ca2+浓度在分娩前后均低于正常组;两组eNOS蛋白均在胎盘绒毛滋养层细胞和内皮细胞胞浆内表达,蛋白的表达量差异显著(P<0.05);两组胎儿胎盘eNOS mRNA表达量差异显著(P<0.05)。本研究证明分娩前后血浆中Ca2+水平对奶牛胎衣不下的发生有重要的调节作用,低浓度的Ca2+容易导致子宫收缩无力,同时影响eNOS在胎儿胎盘绒毛中的表达。
- 张丽罗春海付世新齐长学王瑶
- 关键词：CA2+胎衣不下胎盘ENOS
- 奶牛胎衣不下与胎儿胎盘中iNOS、eNOS及MMP-2表达的相关性
- 2010年
- 目的分析奶牛胎衣不下(Retained fetal membranes,RFM)与胎儿胎盘中诱导型一氧化氮合酶(Induction nitric oxid esynthase,iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和基质金属蛋白酶-2(Matrix metallopeptidase-2,MMP-2)表达的相关性,探讨RFM发生的分子机制。方法 RT-PCR扩增、克隆产后胎衣正常脱落(No retention of fetal membranes,NRFM)和RFM奶牛胎儿胎盘中iNOS、eNOS和MMP-2基因,以牛β-actin基因为内参,采用荧光定量PCR法检测RFM和NRFM奶牛胎儿胎盘组织中iNOS、eNOS和MMP-2基因表达的差异。结果克隆的iNOS、eNOS和MMP-2基因片段与GenBank中登录的核苷酸序列同源性均达100%。RFM组iNOS基因mRNA的转录水平明显高于NRFM组(P<0.05),eNOS和MMP-2基因mRNA的转录水平则明显低于NRFM组(P<0.05)。结论 iNOS、eNOS和MMP-2基因mRNA的转录水平与RFM的发生密切相关。
- 付世新张丽齐长学罗春海李鹏夏成
- 关键词：胎衣不下基质金属蛋白酶2
- 大庆地区奶牛胎衣不下的病因调查被引量：7
- 2009年
- 试验对黑龙江省大庆市红岗奶牛城饲养的奶牛进行跟踪记录，将1年内的奶牛胎衣不下情况进行统计分析。结果表明：奶牛胎衣不下的发生无季节性，而产公犊的奶牛发病率略高于产母犊。但是随着奶牛胎次的增加，奶牛患有胎衣不下的概率增高；产双胎的母牛胎衣不下的发病率明显高于产单胎的母牛；流产奶牛胎衣不下的发病率与正常分娩奶牛差异显著（P〈0．05），说明奶牛胎次、流产、产双胎等因素对奶牛胎衣不下均有影响。
- 罗春海杨毅昌付世新刘海瑞
- 关键词：奶牛胎衣不下
- 胎衣不下奶牛血浆中矿物质及维生素含量变化被引量：1
- 2010年
- 选取胎衣不下组和胎衣正常排出组奶牛各6头,通过终点法对两组奶牛血浆中矿物质指标Ca、P、Fe、Zn的含量检测,同时采用高效液相色谱法测量两组奶牛血浆中维生素指标VA、VD、VE的含量。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中矿物质Ca、Zn、Fe的含量较胎衣排出组正常奶牛低,而血浆中P的含量较正常奶牛的高;胎衣不下组奶牛血浆中维生素VD和VE的含量低,而血浆VA的含量与胎衣正常排出组奶牛无差异性。
- 罗春海齐长学付世新张利
- 关键词：奶牛胎衣不下矿物质维生素
- 奶牛血浆钙离子浓度及胎儿胎盘eNOS表达的研究 被引量：3
- 2010年
- 通过对血浆中Ca2+浓度的检测及胎儿胎盘内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达量的研究,探讨奶牛胎衣不下的发生与这些物质变化的关系。采用终点法检测血浆中Ca2+浓度变化;分别采用免疫组织化学SP法及荧光定量PCR法检测奶牛胎儿胎盘eNOS蛋白及其mRNA的表达。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中Ca2+浓度在分娩前后均低于正常组;两组eNOS蛋白均在胎盘绒毛滋养层细胞和内皮细胞胞浆内表达,蛋白的表达量差异显著(P<0.05);两组胎儿胎盘eNOS mRNA表达量差异显著(P<0.05)。说明分娩前后血浆中Ca2+水平对奶牛胎衣不下的发生有重要的调节作用,低浓度的Ca2+容易导致子宫收缩无力,同时影响eNOS在胎儿胎盘绒毛中的表达。
- 张丽罗春海付世新齐长学王瑶
- 关键词：CA2+胎衣不下胎盘ENOS
